马金成
- 作品数：2 被引量：23H指数：2
- 供职机构：西南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 用YADE法克隆球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的启动子及启动子序列分析被引量：20
- 2003年
- 扩增与已知序列相连的未知序列是一项常用的分子生物学技术。与其它方法相比,目前在棉花上应用的YADE法具有效率高,成本低和假阳性低等特点。因此,作者尝试将该法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的YADE的技术体系。类枯草杆菌蛋白酶在昆虫病原真菌穿透寄主体壁时起重要作用,作者在已克隆的球孢白僵菌类蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的启动子CDEPP。序列分析发现:CDEPP中没有明显的TATA和CAAT框,含有8个可能的碳调控因子的结合位点5'>(g/c)YggRg<3'和2个氮调控因子的结合位点——相隔很近的GATA。这与CDEP-1的表达受碳/氮抑制的结果一致。本文的结果将会为研究CDEP-1的表达规律奠定基础。
- 方卫国张永军马金成肖月华杨星勇裴炎
- 关键词：昆虫病原真菌上游调控序列
- 金龟子绿僵菌羧基转运蛋白基因MaJEN1及其启动子的克隆与分析被引量：3
- 2003年
- 用YADE法扩增了球孢白僵菌T DNA插入突变体T1 2 中与T DNA左边界相连的基因组序列。在此基础上得到了金龟子绿僵菌的羧基转运蛋白的全长cDNA ,MaJEN1。MaJEN1全长 16 95bp ,其中含有长为 15 2 4bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 5 0 8个氨基酸的蛋白。氨基酸序列与粗糙脉孢霉和啤酒酵母菌的羧基转运蛋白JEN1相似性分别为 6 9%和 31%。采用PCR扩增得到了MaJEN1的基因组序列GMaJEN1,序列分析发现 ,GMaJEN1含有两个内含子。Southern杂交发现GMaJEN1在金龟子绿僵菌基因组上为单拷贝。利用RT PCR法对MaJEN1的表达特性进行了分析 ,结果表明MaJEN1在蟑螂壳诱导培养基中表达 ,在该培养基中的表达受葡糖糖抑制。进一步采用YADE法得到了长为 16 2 6bp的GMaJEN1上游序列 ,其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列。
- 方卫国张永军肖月华马金成杨星勇裴炎
- 关键词：金龟子绿僵菌启动子克隆球孢白僵菌
