方卫国
- 作品数：23 被引量：389H指数：12
- 供职机构：西南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一种新的DNA银染方法被引量：46
- 2000年
- 本文介绍一种有效的聚丙烯酰胺中的DNA银染方法 ,其具有背景浅、快速、灵敏度高等特点。利用该方法对MarkerX和棉花的RAPD产物进行银染 ,取得了较满意的结果。说明该方法适于聚丙烯酰胺中的DNA银染。
- 方卫国韦宇拓裴炎
- 关键词：银染聚丙烯酰胺DNA棉花
- 球孢白僵菌胞外蛋白酶及类枯草杆菌蛋白酶的诱导被引量：23
- 2000年
- 研究了接种物和诱导物对球孢白僵菌总胞外蛋白酶及类枯草杆菌蛋白酶 (Pr1)产生的影响 .结果表明 ,球孢白僵菌不同接种物产生的总胞外蛋白酶及Pr1活性有明显差异 ;不同诱导物对产酶水平也有较大影响 .其中芽管状物在蝉蜕诱导液中的总胞外蛋白酶和Pr1活性均最高 ,诱导 12h酶活性达高峰 .不同来源的菌丝产酶水平有差异 .在诱导液中 ,接种物总胞外蛋白酶和Pr1的变化趋势一致 ,但总胞外蛋白酶活性和Pr1活力间没有直接的相关性 .图 2表 2参
- 张永军彭国雄方卫国杨星勇裴炎王中康
- 关键词：球孢白僵菌胞外蛋白酶昆虫病原菌
- 全文增补中
- 利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增被引量：6
- 2002年
- 在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 .
- 肖月华罗明方卫国罗克明侯磊罗小英裴炎
- 关键词：棉花胚珠CDNA末端快速扩增
- 根癌农杆菌介导真菌遗传转化的研究进展被引量：80
- 2002年
- 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化是近年来发展的一种新方法 ,与其它方法相比 ,该方法具有操作简便、转化效率高和易得到稳定转化子等特点。目前 ,在根癌农杆菌介导下已实现了多个属种真菌的遗传转化 ,显示出良好的应用前景。综述了根癌农杆菌介导真菌遗传转化的转化机理和T DNA在真菌细胞中的存在方式等方面的研究结果 ,并展望这一方法的应用前景。
- 方卫国张永军杨星勇裴炎
- 关键词：根癌农杆菌介导真菌
- 耐低水活度高毒力虫生真菌菌株选育被引量：15
- 2001年
- 以球孢白僵菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ和玫烟色拟青霉Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅｕｓ为研究对象，利用紫外线诱变芽生孢子和低水活度条件胁迫筛选，选育出突变株Ｂｂ０７２４０、Ｐｆ０１１２０和Ｐｆ０１１６０，它们在低水活度（或相对湿度）下的生长和萌发均明显优于其相应的初始菌株。生物测定表明，突变株对桃蚜的毒力明显高于其初始菌株。
- 张永军裴炎方卫国杨星勇王中康
- 关键词：球孢白僵菌玫烟色拟青霉相对湿度毒力虫生真菌选育
- 真菌核酸的一种快速提取方法被引量：52
- 2002年
- 在总结多种真菌DNA和RNA提取方法的基础上 ,发展了一种提取真菌核酸新方法 .与其它方法相比 ,该方法具有快速、操作简便等特点 ,而且提取DNA和RNA步骤基本一致 .用该方法提取的DNA完整、纯度高 ,可用于PCR、限制性内切酶酶切和Southern杂交等分子生物学操作 ;提取RNA产量高 ,RNA无降解 ,纯度高 ,适用Northern和cDNA合成等分子生物学操作 .
- 方卫国杨星勇张永军裴炎
- 关键词：真菌快速提取方法核酸
- 金龟子绿僵菌羧基转运蛋白基因MaJEN1及其启动子的克隆与分析被引量：3
- 2003年
- 用YADE法扩增了球孢白僵菌T DNA插入突变体T1 2 中与T DNA左边界相连的基因组序列。在此基础上得到了金龟子绿僵菌的羧基转运蛋白的全长cDNA ,MaJEN1。MaJEN1全长 16 95bp ,其中含有长为 15 2 4bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 5 0 8个氨基酸的蛋白。氨基酸序列与粗糙脉孢霉和啤酒酵母菌的羧基转运蛋白JEN1相似性分别为 6 9%和 31%。采用PCR扩增得到了MaJEN1的基因组序列GMaJEN1,序列分析发现 ,GMaJEN1含有两个内含子。Southern杂交发现GMaJEN1在金龟子绿僵菌基因组上为单拷贝。利用RT PCR法对MaJEN1的表达特性进行了分析 ,结果表明MaJEN1在蟑螂壳诱导培养基中表达 ,在该培养基中的表达受葡糖糖抑制。进一步采用YADE法得到了长为 16 2 6bp的GMaJEN1上游序列 ,其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列。
- 方卫国张永军肖月华马金成杨星勇裴炎
- 关键词：金龟子绿僵菌启动子克隆球孢白僵菌
- 利用交错延伸剪接PCR技术扩增油菜花粉育性基因MS2 Bnap全长cDNA序列被引量：5
- 2001年
- 交错延伸剪接PCR是一种用于分子进化研究的DNA改组技术。本实验利用其原理 ,将已获得的油菜花粉育性基因MS2Bnap有部分序列重叠的三段PCR产物作为模板进行扩增 ,获得了花粉育性基因MS2Bnap的全长cD NA序列。
- 李德谋罗小英侯磊裴炎方卫国杨光伟
- 关键词：全长CDNA序列油菜植物
- 金龟子绿僵菌羧基转运蛋白基因JEN1的克隆与分析
- 昆虫病原真菌是自然界控制害虫群体的主要因素之一,由于其具有能主动侵染昆虫体壁等特点,被广泛应用于害虫的生物防治。但昆虫病原真菌存在的击到害虫时间长和防效不稳定等缺点,限制了它们进一步的应用,造成这一现象的主要原因是对昆虫...
- 方卫国张永军肖月华杨星勇罗明范艳华裴炎
- 文献传递
- 白僵菌制剂防治香料烟蚜虫的试验研究被引量：12
- 2002年
- 烟蚜 [Myzuspersica(Sulzer) ]是危害香料烟的重要害虫。应用生物制剂防治烟蚜 ,对提高香料烟的产量和品质具有重要意义。在保山香料烟种植区用白僵菌制剂防治烟蚜 ,取得了较好效果。小区试验表明 ,喷施 3d后防治效果达 5 4 5 4 % ,5d后控制了蚜虫的危害 ,防治效果达 92 2 % ,接近化学杀虫剂 2 5 %功夫防治效果 (97 4 % )。大田试验也取得了明显的效果 ,喷施 5d后防治效果达 80 2 %～ 85 6 % .
- 李光西张永军方卫国裴炎
- 关键词：白僵菌制剂香料烟蚜虫
