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IL-4、IL-13蛋白表达及抗IL-4、IL-13人源单链抗体的筛选被引量：3: 2013年; 目的:表达IL-4和IL-13蛋白,从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体。方法:采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC)mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的IL-4和IL-13为抗原从前期构建的人源抗体文库中采用噬菌体展示技术分别筛选抗IL-4和抗IL-13人源单链抗体(scFv)。结果:扩增的IL-4 cDNA大小为280 bp,表达的融合蛋白大小为27 kD左右。扩增的IL-13 cDNA大小为252 bp,表达的融合蛋白大小为25 kD左右。分别以生物素化的IL-4和IL-13蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对人源抗体文库进行3轮富集后,分别有大约37%的scFvs与IL-4有结合特性,有约27%的scFvs与IL-13有结合特性。筛选了4株分别与IL-4和IL-13结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论:成功筛选到抗IL-4和抗IL-13人源性单链抗体。; 袁青黄黎郭夕源叶迎春年四季; 关键词：IL-4 IL-13 人源单链抗体

天然人源抗体文库构建及多种人源抗体的筛选: <正>目的:构建天然人源抗体文库并筛选多种人源抗体。方法:提取健康人外周血单个核细胞(PBMC)mRNA,构建全长c DNA文库。从全长c DNA文库中扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL,包括Vκ和Vλ),L...; 年四季黄黎郭夕源邬于川袁青; 文献传递

医学免疫学教学中数字化平台的应用研究被引量：2: 2014年; 信息技术的发展给人类知识与文化的传播带来了革命性的意义,大量数字化教学资源的运用为教育教学提供了有力的保障。医学免疫学是一门以研究机体免疫系统结构和功能,探讨免疫功能异常所致的病理过程和机制,以及疾病预防、诊断与治疗的学科,在医学免疫学教学中应用数字化平台具有极高的价值,不过也存在一些缺陷。本文就医学免疫学教学中数字化平台的应用进行了探讨,对提高医学免疫学教学中数字化平台应用效能有一定促进意义。; 高燕徐文峰郭夕源; 关键词：医学免疫学教学创新

免疫学实验教学改革的初步探索被引量：1: 2016年; 免疫学实验教学是培养医学生科研思维和实践能力的重要实验平台,面对免疫学新技术的出现以及人才培养新的要求,通过探究式教学理念,TBL教学方法,形成性考核方式及多种资源的应用等方式,科学的实现了提高医学生综合运用免疫学基本知识和技能的能力,提高免疫学实验教学质量,为培养高素质、创新型人才开辟了有效的途径。; 郭夕源杨江华; 关键词：医学免疫学实验教学

虚拟仿真实验在医学实验教学中的应用探索被引量：26: 2016年; 虚拟仿真实验技术以其高效率、学习体验真实、安全无风险等优点,应用于高校医学专业实验教学活动中,能够突破传统教学模式的制约,提升教学质量,发展学生创新意识和能力,在医学实验教学中具有广阔的应用前景。; 杨江华李成文郭夕源; 关键词：虚拟仿真实验教学

IL-4,IL-13人源性单链抗体的筛选与鉴定: 目的从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体。方法采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC)mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大肠杆菌BL21,...; 年四季黄黎郭夕源叶迎春袁青

不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离株与HtrA关系的研究被引量：4: 2013年; 目的探讨不同龋敏感儿童口腔变异链球菌HtrA mRNA和蛋白质的表达情况与乳牙龋坏程度和HtrA的关系。方法以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,复苏,增菌,分离纯化核酸,采用逆转录PCR(RT-PCR)法,提取变异链球菌临床分离株总RNA,凝胶电泳检测RNA完整性,合成cDNA,PCR扩增,将扩增产物凝胶成像系统下观察记录结果,将目的基因HtrA及内参的电泳图像利用凝胶定量分析软件Gel-Pro analyzer 4.0进行灰度扫描,分析计算基因相对表达值;采用蛋白质印迹(Western blot)法,验证变异链球菌临床分离株总蛋白,结果用Bio-Rad凝胶摄像分析系统扫描入计算机中,凝胶定量分析软件Quantity One 4.4.0分析其灰度值,计算蛋白的相对表达水平。结果高龋、中龋及无龋儿童口腔变异链球菌临床分离株HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达均存在差异,从高到低为高龋组、中龋组、无龋组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离菌株HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达均存在差异,龋敏感性越高,HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达越高。; 杨江华郭夕源王光平李明霞刘兴容; 关键词：龋齿乳牙变异链球菌 HTRA

IL-33蛋白及抗IL-33全人源单链抗体的表达、纯化及鉴定被引量：2: 2016年; 目的表达IL-33蛋白及抗IL-33全人源天然单链抗体并进行纯化及鉴定。方法前期采用噬菌体展示技术从文库容量为108的全人源天然抗体文库筛选了抗IL-33全人源单链抗体,并将筛选的抗IL-33基因转入表达载体p LY16中。在前期工作的基础上,进行了以下研究:表达并纯化人IL-33蛋白,将构建的IL-33/PET102/D-TOPO质粒转化到大肠杆菌BL21中,表达后用Ni-NTA树脂纯化、浓缩再进行SDS-PGE电泳和Western blot验证。将抗IL-33 sc Fv/p LY16重组质粒转化入大肠杆菌DH5αF’中,应用PCR技术挑选阳性克隆并进行验证,IPTG诱导可溶性表达,Ni-NTA树脂纯化,SDS-PGE电泳和Western blot验证。结果 IL-33/PET102/D-TOPO质粒测序结果显示,插入的外源基因为人全长IL-33 c DNA。表达的IL-33融合蛋白相对分子质量为45 000左右。Western blot结果显示表达的蛋白为人IL-33蛋白。对从天然抗体文库中筛选的抗IL-33单链抗体进行测序,结果显示序列大小为750 bp左右,为开放阅读框,各序列之间有个别氨基酸的差异,说明为不同的单链抗体。ELISA结果显示抗IL-33单链抗体与IL-33有一定的结合能力。Western blot结果证实,表达的抗体为抗IL-33抗体。结论成功表达并纯化了IL-33抗原、抗IL-33全人源天然单链抗体。; 郭夕源杨江华徐文峰邬于川袁青

人源性治疗性抗体的应用与制备进展被引量：1: 2013年; 治疗性抗体在疾病的诊断和治疗方面具有重要意义。鼠源性单克隆抗体的临床应用受限于诱导产生人抗鼠抗体、亲和力低和半衰期短等,随着转基因小鼠和噬菌体展示技术的成熟,人源性治疗性抗体飞速发展,在肿瘤治疗、自身免疫性疾病的治疗、感染性疾病的治疗及减轻移植排斥反应、体内定位诊断、免疫调节等方面发挥重要作用。本文综述了治疗性抗体在肿瘤及免疫、移植等疾病中的治疗应用及人源性治疗性抗体的制备。; 郭夕源杨江华邬于川袁青; 关键词：单克隆抗体治疗性抗体人源性

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郭夕源