王波
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 人工膝关节置换中胫骨侧定位方法的选择:髓内+髓外定位、单纯髓内定位或髓外定位?
- 目的:探讨髓内+髓外定位与单纯髓内定位、髓外定位方法在膝关节表面置换术后,哪种方法获得的假体力线的更加精确,以指导临床工作,最大限度的减少术后的相关并发症。方法:共测量155例行全膝关节置换术的膝关节胫骨假体力线,其中单...
- 温宏潘孝云王波胡月正张宇陈成旺余华晨
- 关键词：全膝关节置换术力线胫骨假体
- 文献传递
- rVvhA诱导小鼠单核巨噬细胞凋亡的作用及其机制被引量：1
- 2010年
- 目的研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）诱导小鼠单核巨噬细胞（J774A．1）凋亡的作用及机制。方法MTT法、电子透射电镜、流式细胞仪结合AnnexinV-PI标记法、线粒体膜电位和caspase活性检测等方法测定rVvhA诱导J774A．1凋亡的作用。结果MTT结果显示rVvhA能够抑制J774A．1生长。2．0溶血单位（HU）／ml和3．0HU／ml的rVvhA作用J774A．18h后，透射电镜观察细胞和线粒体形态发生凋亡改变；流式细胞仪检测凋亡率分别为（7．80±0．62）％、（12．33±0．12）％，均高于正常组（3．07±0．67）％；线粒体膜电位也下降，流式细胞仪结果显示绿色荧光率分别是9．8％、39．2％。其中3．0HU／mlrVvhA作用组，caspase-3、9活性增加，并且具有时间依赖性，而caspase-8活性没有明显改变。3．0HU／mlrVvhA加caspase-3抑制剂（Ac—DEVD-FMK）或caspase-9抑制剂（Ac—LEHD-FMK）的凋亡率与3．0HU／mlrVvhA作用组相比都降低，分别为（6．23±3．95）％、（9．60±3．14）％；同时caspase-3、9活性也下降。结论rVvhA具有诱导J774A．1凋亡的生物学活性；其机制可能与依赖caspase的线粒体途径有关。
- 王波金疆钟毓红赵志超杨军楼永良严杰
- 关键词：创伤弧菌凋亡线粒体
- 重组创伤弧菌溶细胞素诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及其机制被引量：5
- 2010年
- 为了研究重组创伤弧菌溶细胞素(rVvhA)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用及其机制。采用MTT法、普通光学显微镜和电子透射电镜、流式细胞仪结合Annexin V-PI标记法、caspase活性检测等方法测定rVvhA诱导HUVEC凋亡的作用。结果显示rVvhA能够抑制HUVEC生长。3.0溶血单位(HU)/ml和4.0 HU/ml的rVvhA作用HUVEC 8 h后,细胞和线粒体的形态发生凋亡改变,其中4.0 HU/ml处理组的凋亡率(51.73±1.96)%高于对照组(3.53±0.64)%和3.0 HU/ml处理组(12.83±5.00)%,具有剂量依赖性;4.0 HU/ml rVvhA诱导HUVEC凋亡过程中,caspase-3、caspase-9活性增加,并且具有时间依赖性,而caspase-8活性没有明显改变;4.0 HU/ml rVvhA加caspase-3抑制剂Ac-DEVD-FMK或caspase-9抑制剂Ac-LEHD-FMK的凋亡率分别下降到(14.2±3.47)%、(24.93±3.93)%。同时caspase-3、caspase-9活性也下降。结果表明rVvhA具有诱导HUVEC凋亡的生物学活性;其机制可能与依赖caspase的线粒体途径有关。
- 王波丁卉谢旦立楼永良严杰杨军赵志超
- 关键词：创伤弧菌人脐静脉内皮细胞凋亡CASPASE
- 创伤弧菌溶细胞素T和B有效联合表位的筛选与鉴定被引量：2
- 2010年
- 利用生物信息学预测技术成功筛选出含部分创伤弧菌溶细胞素(Vibrio vulnificushemolysin,VvhA)基因片段的T细胞、B细胞联合表位Vvha1、Vvha2、Vvha3和Vvha4,通过噬菌体展示技术成功获得四段表位多肽M13KE-Vvha1、M13KE-Vvha2、M13KE-Vvah3、M13KE-Vvha4,且M13KE-Vvah2、M13KE-Vvha4抗原反应性强于M13KE-Vvha1、M13KE-Vvha3。将四种抗原性多肽经腹腔注射ICR小鼠后,利用流式细胞仪及ELISA方法检测小鼠CD4^+T淋巴细胞亚群及IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ细胞因子时发现,与M13KE-Vvha3相比,经M13KE-Vvha1、M13KE-Vvha2、M13KE-Vvha4作用的小鼠CD4^+T淋巴细胞亚群的变化更为显著。与正常组相比,该三组小鼠的IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ细胞因子分泌量的变化都具有统计学意义;而经M13KE-Vvha3作用的小鼠仅IL-4的改变具有明显统计学意义。因此本研究成功筛选出含部分VvhA片段的T细胞、B细胞联合表位Vvha2、Vvha4,从而为进一步研制多抗原肽(multipleantigenic peptide,MAP)疫苗打下基础。
- 王波丁卉谢旦立楼永良肖美英庞碧芳严杰
- 关键词：创伤弧菌噬菌体展示B细胞表位T细胞表位
- 创伤弧菌溶细胞素融合蛋白对人Caeo-2细胞IL-8基因表达和IL-8分泌的影响
- 2010年
- 目的研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白（rVvhA）对人肠上皮细胞（human intestinal epithelial cell，Caco-2）IL-8基因表达的影响。方法IPTG诱导、表达、纯化、复性及Western blot鉴定rVvhA表达和纯化情况；CCK-8法检测rVvhA对Caco-2的细胞毒性作用；RT—PCR检测rVvhA诱导Caco-2细胞IL-8基因的表达情况；ELISA检测Caco-2细胞培养上清IL-8的分泌情况。结果Ni^2＋-NTA亲和层析柱对rVvhA进行纯化后纯度可达95％以上；CCK-8结果显示rVvhA活性蛋白显著降低了Caco-2细胞的存活率，有效浓度为1．5HU／ml（P〈0．05）；RT—PCR结果显示，0．6HU／ml rVvhA 30 min即可诱导Caco-2细胞IL-8mRNA基因表达上调；ELISA结果显示，Caco-2细胞经rVvhA作用后，培养液上清中IL-8多肽的表达时相在4h。RT—PCR与ELISA结果皆显示，IL-8基因的转录及IL-8表达皆具有时间-剂量依赖性。结论rVvhA在转录水平上能诱导人Caco-2细胞IL-8 mRNA表达，促进IL-8的合成，在创伤弧菌引起的过度炎症反应和败血症的发生、发展中可能具有重要意义。
- 谢旦立王波丁卉郑丽楼永良严杰
- 关键词：创伤弧菌IL-8
