王晓杰
- 作品数：124 被引量：430H指数：11
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校学科创新引智计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 小麦扩张蛋白TaEXPA11及其应用
- 本发明属于农业生物技术领域，公开了小麦扩张蛋白TaEXPA11及其应用。小麦扩张蛋白TaEXPA11的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码该蛋白的<I>TaEXPA11</I>基因开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ...
- 王康王晓杰熊佳慧王宁王建锋汤春蕾康振生
- 小麦WRKY转录因子基因TaWRKY40及其应用
- 本发明公开了一种小麦WRKY转录因子基因<I>TaWRKY40</I>及其应用，包含所述基因<I>TaWRKY40</I>全长的开放阅读框具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。在小麦植株体内过表达小麦WRKY转录...
- 王建锋王晓杰康振生汤春蕾王宁何佳妮
- 小麦钙调素新亚型TaCaM5的克隆及表达分析被引量：7
- 2010年
- 利用RT-PCR技术,从条锈菌诱导的小麦叶片中分离出一个编码CaM基因的cDNA序列,经氨基酸序列分析确定其为一个新的小麦CaM亚型,暂被命名为TaCaM5。TaCaM5包含一个完整450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸;编码的蛋白不含跨膜区、无信号肽、定位在胞内,具有4个EF-hand保守结构域。在目前已知的CaM基因中,TaCaM5与玉米CaM基因的亲缘关系最近,相似性高达97%。该基因在根、茎、叶等组织中均有不同程度的表达;并且受条锈菌诱导表达,在非亲和组合与亲和组合中,分别在接种后6h和24h表达量最高。外源植物激素脱落酸、茉莉酸甲酯和乙烯诱导TaCaM5上调表达,水杨酸诱导其下调表达。TaCaM5在机械伤害、干旱和低温条件下表达量上升,在高盐环境下表达量降低。表明TaCaM5可能通过茉莉酸和乙烯等信号途径参与小麦对条锈菌的防御反应,同时参与机械伤害、低温和干旱环境下的Ca2+-CaM信号转导途径。
- 刘新颖王晓杰薛杰夏宁邓麟蔡高磊汤春蕾魏国荣黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈病非生物胁迫实时荧光定量RT-PCR
- 小麦条锈菌Ⅱ类几丁质合成酶基因PstChsⅡ的克隆及表达特征被引量：1
- 2009年
- 【目的】克隆小麦条锈菌几丁质合成酶基因PstChsⅡ,分析其在小麦条锈菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用RT-PCR和PCR技术克隆PstChsⅡ的cDNA序列和基因组序列,利用不同的生物信息学软件对序列进行分析,运用实时荧光定量技术分析基因在孢子、芽管以及不同侵染时间的表达水平。【结果】PstChsⅡ基因(GenBank登录号GQ329851)编码区存在15个内含子,开放阅读框长2727bp,编码908个氨基酸。PstChsⅡ蛋白C端含有7个跨膜螺旋区,N端含多个保守结构域和"QXRRW"、"GXGPL"、"DXD"等motifs,蛋白序列与小麦杆锈菌的PgtChsⅡ相似性达94%,系统进化分析表明PstChsⅡ属于Ⅱ类Chs蛋白亚家族,与担子菌亚门真菌同源序列的相似度高于子囊菌亚门真菌。基因在小麦条锈菌夏孢子萌发时期明显上调(约10倍),而在其他发育阶段表达基本恒定。【结论】PstChsⅡ可能参与了小麦条锈菌夏孢子萌发时芽管细胞壁的合成;PstChsⅡ的克隆与表达分析为进一步研究该基因在小麦条锈菌专性寄生生活中的功能奠定了基础。
- 梁晓飞刘博朱琳张晓羽王晓杰黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌几丁质合成酶基因克隆基因表达分析
- 小麦与条锈菌互作关系的研究进展
- 由条形柄锈菌(Puccinia striiformisf.sp.tritici)引致的小麦条锈病是一种气传性真菌病害，在全世界小麦种植区域均有不同程度发生.在中国，小麦条锈病发生、危害十分严重，一直是影响小麦生产可持续发...
- 王晓杰郭军赵杰张红昌詹刚明黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌抗病性
- 小麦条锈菌效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能分析被引量：2
- 2019年
- 为明确小麦条锈菌吸器特异表达效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能,利用PCR获得Hasp58的全长cDNA序列;借助生物信息学软件预测Hasp58的信号肽;将Hasp58构建到pGR106载体用于农杆菌(Agrobactrium tumefacien)介导的烟草瞬时表达系统,明确Hasp58抑制细胞坏死的毒性功能;将Hasp58构建到pCambia1302载体用于烟草细胞定位,明确Hasp58定位情况;将Hasp58构建到pEDV6载体用于荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens)介导的小麦瞬时表达系统,对小麦胼胝质、过敏性坏死面积、活性氧、菌丝面积、菌丝长度进行统计分析,明确Hasp58抑制寄主植物PAMPs引发的免疫反应(PTI)和效应蛋白诱导的免疫反应(ETI)功能。结果表明,条锈菌Hasp58的cDNA全长为1 026 bp,编码342个氨基酸,N端含26_aa的信号肽;通过农杆菌侵染,在烟草中瞬时表达Hasp58,发现其能够抑制由BAX诱导的细胞坏死,为条锈菌的候选效应蛋白;烟草细胞定位发现,含有信号肽和缺失信号肽的Hasp58与GFP融合表达均定位在细胞质,推测该效应蛋白在胞质作用;利用细菌的三型分泌系统在小麦中瞬时表达Hasp58,发现其能够抑制荧光假单胞杆菌引起的胼胝质积累,导致由无毒性条锈菌小种CYR23引起的小麦过敏性坏死面积和活性氧减少,使菌丝面积和长度增加。推测小麦条锈菌效应蛋白Hasp58可抑制寄主植物的PAMPs引发的免疫反应(PTI)和效应蛋白诱导的免疫反应(ETI),并促进自身侵染。
- 陈增菊王婷汤春蕾赵梦鑫康振生王晓杰
- 关键词：条锈菌
- 小麦与条锈菌互作关系的研究进展
- 由条形柄锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)引致的小麦条锈病是一种气传性真菌病害,在全世界小麦种植区域均有不同程度发生。在中国,小麦条锈病发生、危害十分严重,一直是影响小麦生产可持续...
- 王晓杰郭军赵杰张红昌詹刚明黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌抗病性
- 文献传递
- 大豆疫霉的分子检测被引量：19
- 2005年
- 利用核糖体内转录间隔区(internaltranscribedspacer,ITS)序列通用引物ITS1/ITS4分别获得了大豆疫霉(Phytophthorasojae)和辣椒疫霉(P.capsici)的ITS序列,通过获得序列设计了大豆疫霉的特异性引物PS1和PS2,并建立了分子检测方法。该方法对大豆疫霉(P.sojae)菌丝体和土壤中卵孢子检测的灵敏度分别为10-5ng/μL和每克土壤0.05个卵孢子。
- 陈长卿康振生王晓杰黄丽丽左豫虎
- 关键词：大豆疫霉ITS分析PCR分子检测
- ABI3130xl全自动测序仪规模化测序的影响因素研究被引量：3
- 2008年
- 【目的】提高利用ABI3130xl全自动测序仪对小麦与条锈菌互作的cDNA文库进行大规模测序的成功率,降低成本。【方法】将BigDye(BigDye(Teminator V3.1 Cycle Sequencing RR-100)分别稀释16,24和32倍设计测序的PCR反应体系,分析了EDTA溶液(125 mmol/L,pH 7.0)和醋酸钠溶液(3 mol/L,pH 5.2)以及不同模板类型等相关因素对测序结果的影响。【结果】BigDye稀释16倍的PCR反应体系的测序结果易出现染料峰,影响碱基正确读值;稀释32倍体系的测序结果中可用序列短,成功率低;稀释24倍体系测序结果的可用序列长且准确率高,为最佳反应体系。EDTA溶液和醋酸钠溶液可提高DNA纯化的质量,改善测序效果。以质粒DNA为模板测序较PCR产物直接测序效果好,通过控制模板质量可以提高测序成功率。【结论】利用优化体系共测得15 000条ESTs序列,其中有高读长序列13 080条,占87.2%,表明该优化体系简单有效,且可有效节约成本。
- 屈志鹏王晓杰徐亮胜贾涛康振生
- 关键词：DNA测序DNA模板
- 条锈菌诱导的小麦TaHin1的克隆与表达特征分析被引量：1
- 2010年
- 【目的】克隆受条锈菌诱导的小麦Hin1,研究其在小麦抗条锈病防御反应以及抗非生物胁迫过程中的作用。【方法】通过电子克隆、RT-PCR方法,从条锈菌侵染的小麦水源11中分离出一个编码HIN1的cDNA序列;通过生物信息学工具对DNA序列及其编码的蛋白序列进行分析;利用实时荧光定量PCR分析该基因在小麦不同器官、与条锈菌互作、外源激素处理以及非生物胁迫下的表达情况。【结果】分离得到小麦Hin1,命名为TaHin1,开放阅读框为642bp,编码213个氨基酸,分子量为23.24kD,等电点8.67,具有信号肽和HIN1结构域,可能为分泌蛋白;与高粱和水稻HIN1同源性达80%;表达分析结果表明,TaHin1在小麦根、茎、叶组织中表达差异不显著,在小麦与条锈菌互作时,仅在非亲和组合中被诱导表达;外源植物激素水杨酸、茉莉酸诱导TaHin1上调表达,脱落酸诱导其下调表达,而乙烯不诱导其表达;高盐、干旱、机械损伤以及低温等非生物胁迫下,TaHin1均上调表达。【结论】首次克隆到一个受条锈菌诱导的小麦TaHin1,可能通过水杨酸、茉莉酸信号途径参与了小麦对条锈菌的防御反应,而脱落酸在防御反应中起负调控作用,该基因在小麦对非生物胁迫的抗逆应答过程中也发挥着一定作用。
- 邓麟王晓杰刘新颖蔡高磊汤春蕾魏国荣黄丽丽康振生
- 关键词：条锈菌电子克隆
