王建设
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠心肌缺血预适应相关基因MIP5的克隆及特性分析
- ＜正＞目的:克隆缺血预适应诱导表达上调的新基因,为进一步揭示心肌缺血预适应内源性保护的分子机制提供线索和思路。方法:通过反复结扎和松解大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血预适应动物模型,取其心肌组织与假手术组心肌组织,经基因...
- 王建设袁灿张华莉王尧玲邓恭华涂自智肖献忠
- 文献传递
- 大鼠心肌缺血/再灌注相关基因Mip5的表达及特性分析被引量：1
- 2005年
- 目的:研究新基因Mip5(GenBank登录号AY553870)的特性及其在生理或病理状态下的表达变化。方法:运用BLAST,spidey,psort,ClustalW等生物信息学方法对Mip5的相应特性进行分析,并运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)研究基因Mip5的表达。结果:生物信息学分析显示Mip5位于第13号染色体,其开放读码框为909bp,编码302个氨基酸,含有8个外显子和7个内含子。Mip5蛋白含有6个Kelch结构。RT-PCR检测发现正常时,Mip5在心,脑,肾等组织中表达丰度较高,而在骨骼肌和肝脏组织未能检测到其表达;缺血/再灌注损伤后不同时间心肌组织中Mip5的表达较假手术组明显升高,在再灌注后3h达高峰,12h恢复至基线水平。结论:上述结果表明Mip5为缺血/再灌注相关基因,可能在心肌缺血病理过程中发挥作用。
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- 关键词：生物信息学心肌缺血
- 热休克反应对氧化应激所致nucleolin裂解的影响被引量：3
- 2004年
- 观察热休克反应对氧化应激 (0 .5mmol/LH2 O2 )诱导细胞凋亡发生时nucleolin(C2 3)裂解的影响并探讨其机制。方法 :采用caspase 3活性定量分析及免疫印迹技术检测氧化应激诱导的原代心肌细胞、RAW 2 6 4 .7巨噬细胞及K5 6 2白血病细胞凋亡及C2 3的裂解 ;通过热休克反应观察热休克反应对C2 3裂解的影响。结果 :0 .5mmol/LH2 O2处理细胞 2hcaspase 3活性显著升高 ,12h达高峰。免疫印迹结果显示上述各种细胞的C2 3蛋白均发生了裂解 (有 80kD裂解片断出现 ) ,而且最早出现裂解片段的时间都在H2 O2 处理 30min到 1h左右 ;同时热休克反应通过诱导HSP70 ,HSP2 5等应激蛋白表达而显著减少氧化应激所致C2 3的裂解。结论 :氧化应激诱导凋亡发生的同时也引起C2 3的裂解 ;热休克反应显著抑制氧化应激所致C2 3的裂解 。
- 王慷慨蒋磊易宇欣刘可鄂顺梅唐道林王建设石永忠王秋鹏肖献忠
- 关键词：热休克反应氧化应激CASPASE-3H2O2片段
- 大鼠心肌缺血预适应延迟相的差异蛋白质的分离及鉴定被引量：9
- 2005年
- 目的采用蛋白质组学技术探讨缺血预适应心肌内源性保护的分子机制。方法应用双向凝胶电泳技术分离假手术组和心肌缺血预适应延迟相组大鼠的心肌总蛋白质。结果在假手术组的双向凝胶电泳图谱上展示704±27个蛋白质点,而在心肌缺血预适应延迟相组展示778±35个蛋白质点。经凝胶图像分析找到的差异蛋白质23个,基质辅助激光解析—电离飞行时间质谱对差异蛋白进行鉴定,共鉴定出12个蛋白质。这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、结构蛋白等。结论这些差异蛋白可能通过其分子伴侣功能、清除自由基、改善能量代谢等发挥心肌缺血预适应延迟相的心肌保护作用。
- 王尧玲王建设刘双袁灿吕青兰刘梅冬刘可肖献忠
- 关键词：病理学与病理生理学双向凝胶电泳缺血预适应蛋白质组
- 大鼠心肌缺血/再灌注相关基因MIP5、USP38-S、MIP6-v1/v2、paxillinδ和klp5的克隆
- 本研究采用生物信息学方法结合实验证实等手段克隆了几个缺血/再灌注诱导发生改变的新基因，并对其部分特性进行了分析和实验研究。
研究结果表明：大鼠心肌缺血/再灌注诱导表达上调新基因MIP5，其最大开放阅读框(openr...
- 王建设
- 关键词：心肌缺血预适应编码蛋白
- 文献传递
- 大鼠心肌缺血预适应相关基因5的克隆与特性分析被引量：6
- 2006年
- 目的采用生物信息学分析表达序列标签AW918640以获得其所代表基因的全长序列,并对该基因进行初步的特性分析。方法利用基因银行(GeneBank)数据库,通过BLAST比对等生物信息学方法进行电子克隆,采用逆转录聚合酶链反应和基因测序等技术进行鉴定,采用mapviewer软件进行染色体定位,ExPASy和SMART软件对获得的全长基因进行翻译和蛋白质功能结构分析。结果AW918640(基因银行登录号)为一个在大鼠心肌缺血预适应后3h表达升高的表达序列标签序列,通过电子克隆得到其所代表基因的全长,且为一新基因,经逆转录取合酶链反应和基因测序证实后,将其命名为心肌缺血预适应相关基因5(MIP5),并在基因银行数据库上登录,登录号为AY553870。心肌缺血预适应相关基因5最大开放读码框为909bp,编码302个氨基酸,含有6个kelch重复基序。结论心肌缺血预适应相关基因5为一与大鼠心肌缺血预适应相关的新基因。
- 王建设袁灿王慷慨王尧玲刘梅冬刘可肖献忠
- 关键词：病理学与病理生理学心肌缺血预适应电子克隆基因
- 大鼠心肌短暂缺血-再灌诱导表达上调的新基因Mip1的功能初步研究
- 目的:Mip1为本室克隆的一个大鼠心肌短暂缺血-再灌诱导表达上调的新基因。本研究通过建立稳定表达Mip1的CC肌原细胞株,研究Mip1的过表达对细胞氧化应激损伤及对应激状态下细胞生长周期的影响,探讨Mip1是否具有细胞保...
- 袁灿刘瑛王秋鹏王建设肖献忠
- 文献传递
- 大鼠心肌缺血预适应延迟相的蛋白质组学分析
- ＜正＞目的:心肌缺血预适应对心肌的保护作用包括两个时相:早期相和延迟相,其中延迟相缺血预适应保护作用出现时间较晚,持续时间较长,可以减轻心肌顿抑、心肌梗死,因而具有更大的临床应用价值。以往的研究常针对单个基因或单个蛋白在...
- 王尧玲王建设刘双袁灿吕青兰刘梅冬刘可肖献忠
- 文献传递
- HSP70减轻氧化应激所致细胞核仁损伤的分子机理
- 目的:细胞核仁在细胞的增殖与分化,核糖体生成,个体生长、发育与衰老中发挥十分重要的作用。热休克蛋白70(HSP70)是重要的分子伴侣蛋白,应激时可从细胞浆移位到细胞核及核仁。应激对核仁结构与功能有何影响,HSP70向核仁...
- 王慷慨蒋磊易宇欣鄂顺梅王建设刘可肖献忠
- 文献传递
- 新基因Mip1的过表达对去血清培养条件下C_2C_(12)细胞生长周期的影响被引量：5
- 2004年
- 【目的】建立稳定表达新基因Mip1的细胞株 ,并探讨正常和应激状态下Mip1过表达对细胞生长周期的影响。【方法】脂质体转染Mip1的真核表达质粒于C2 C12 细胞中 ,G4 18筛选阳性克隆 ,Westernblot鉴定高表达克隆 ,流式细胞术检测正常和去血清状态下Mip1转基因细胞株和空载体转基因细胞株的生长周期分布情况。【结果】建立了稳定高表达新基因Mip1的C2 C12 细胞株 ,并发现Mip1的过表达可减轻去血清对C2 C12 细胞的生长抑制作用。【结论】Mip1在应激状态下可能具有促细胞生长的功能。
- 袁灿王秋鹏刘瑛王建设陈广文刘梅冬肖献忠
- 关键词：转染细胞周期
