张顺宝
- 作品数:5 被引量:19H指数:3
- 供职机构:河南工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市博士后基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及酶学性质研究被引量:5
- 2005年
- 目的获得具有生物学活性的结核分枝杆菌重组异柠檬酸裂解酶蛋白。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增该菌株的异柠檬酸裂解酶基因ic l,克隆入原核表达载体pET-28 a(+)中,通过在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,获得以镍离子螯合型琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化的重组蛋白,并对其酶学性质进行测定分析。结果纯化出具有生物学活性的重组结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶。酶学性质测定分析表明,重组异柠檬酸裂解酶ICL的比活力为7.657×102μmol.mg-1.m in-1,反应最适pH值约为7.4。重组蛋白经高效液相色谱及质谱鉴定,测得相对分子质量为50 603.347。在5 mmol/L Tris-C l缓冲液、pH值7.8、25℃条件下,重组ICL的二级结构中相对有43.8%的α螺旋、31.9%的β折叠、3.4%β转角、20.9%无规则卷曲。结论本研究成功克隆表达结核分枝杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶基因,酶学性质鉴定获得了具有生物学活性的重组蛋白,为该酶免疫学研究及新型抗结核药物的筛选奠定了基础。
- 郝方裴秀英张雪莲张顺宝赖煦卉王洪海
- 关键词:基因表达
- 抗结核一线药物及其主要作用靶点的突变被引量:10
- 2005年
- 张顺宝张雪莲郝方王洪海
- 关键词:结核分枝杆菌一线药物
- 结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶的纯化及快速抑菌方法的建立
- 本实验利用基因工程技术,将本实验室已经扩增的莽草酸脱氢酶基因aroE连接到不同的载体中,以增加大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中莽草酸脱氢酶(SD)的表达量,经亲和层析大量纯化可溶性有活性的的结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(...
- 张顺宝
- 关键词:结核分支杆菌重组蛋白分离纯化药物敏感实验抗结核药物
- 文献传递
- 生物技术在新药研发中的进展与展望被引量:4
- 2005年
- 郝方张雪莲张顺宝裴秀英
- 关键词:生物技术药物生物信息
- 赤羽病的诊断与防治
- 文章介绍了赤羽病的危害、流行病学、临床症状及诊断。该病多发生于热带和温带地区,可引起多种动物感染,怀孕的牛、绵羊和山羊对本病最易感。根据流行特点、临床表现和病理变化可做出初步诊断,但确诊必须进行实验室检查(包括病原学鉴定...
- 庄金秋张顺宝贾杏林
- 关键词:赤羽病血清学诊断防制
- 文献传递