宋娟
- 作品数：46 被引量：61H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 鼻病毒非结构蛋白2B诱导细胞发生内质网应激被引量：1
- 2015年
- 为探讨鼻病毒非结构蛋白2B诱导内质网应激和细胞凋亡的机制,本研究构建了鼻病毒非结构蛋白2B的真核表达载体p2B-GFP,通过转染BHK-21细胞检测相关标志蛋白的变化情况。结果显示,非结构蛋白2B定位表达于BHK-21细胞内质网,诱导内质网应激标志蛋白Grp78、CHOP的表达增加,并使活化转录因子6(ATF6)的转录活性增加,还诱导BHK-21细胞发生核浓缩而凋亡,使凋亡标志蛋白PARP发生降解而减少。结果提示,鼻病毒非结构蛋白2B可诱导细胞发生内质网应激,并经该途径诱导细胞凋亡。
- 迟苗苗宋娟宋芹芹于洁罗小暖张璐王欣玲韩俊
- 关键词：鼻病毒内质网应激凋亡
- 脑心肌炎病毒（EMCV）3C真核表达载体的构建及其功能鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的EMCV的pEGFP-3C真核表达载体的构建及功能鉴定。方法RT—PCR扩增EMCV功能蛋白3c基因并克隆至pEGFP—C3载体中，经双酶切和测序鉴定。将重组质粒分别转染到BHK-21细胞和293T细胞48h后，Western—Blot检测3c蛋白酶的表达，以及对PABPl的切割，共聚焦显微镜观测3c荧光表达位置。结果EMCV的pEGFP-3C重组质粒经双酶切及测序鉴定构建正确。表达的GFP融合蛋白相对分子质量约为49×10^（3），可切割PABPl，并表达于细胞核内。结论成功构建了EMCV的3c蛋白酶的真核表达载体pEGFP-3C，为进一步研究该蛋白酶的功能及作用奠定了基础。
- 李梅宋娟孙鹏宋芹芹盛琳君卢明枝迟苗苗王宝栋韩俊
- 关键词：脑心肌炎病毒基因质粒
- 肠道病毒71型抵抗I型干扰素诱导的抗病毒作用被引量：6
- 2012年
- 目的研究肠道病毒71型（EV71）抵抗I型干扰素（interferon，IFN）诱导的抗病毒作用。方法将1000U／ml的I型干扰素（α，β）加入HeLa细胞后，去除上清中的干扰素，感染带有GFP的重组单纯疱疹病毒（HSV-1）和EV71，观察GFP的表达和PCR检测HSV-1核酸，判断I型干扰素对HSV，1的作用。通过RT—PCR方法检测EV712A基因的表达从而判断EV71病毒的复制能力。结果I型干扰素（α，β）诱导HeLa细胞产生抗病毒蛋白而有效地抑制重组HSV-1GFP的表达和核酸扩增。而EV712A的RT—PCR结果证实EV71可在I型干扰素（α，β）作用后的HeLa细胞中有效增殖。结论I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白；EV71可在I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白的HeLa细胞中有效增殖。
- 崔雨宋娟宋芹芹孙鹏甘星李公启王克霞韩俊
- 关键词：肠道病毒属干扰素I型
- 《人间传染的病原微生物目录》中病毒部分的解读
- 2023年
- 为了更好的落实《中华人民共和国生物安全法》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》相关规定,2023年8月国家卫生健康委发布通告国卫科教发〔2023〕24号,正式印发了《人间传染的病原微生物目录》(以下简称《目录》)。随着新的病原微生物不断出现,对现有病原微生物认识不断更新,以及实验室生物安全研究不断深入,原有的《人间传染的病原微生物名录》已不能够满足需求,因此颁布了《目录》。本文旨在详细解读《目录》中病毒部分,包括制定背景、原则、过程以及主要内容,以便更好的了解和认识《目录》。
- 高晨宋芹芹宋娟韩俊
- 关键词：病原微生物生物安全
- EV71 IgM抗体均相酶联免疫检测方法的初步建立被引量：2
- 2016年
- 目的 建立一种快速检测肠道病毒71型（EV71） IgM抗体的均相ELISA新技术.方法 首先克隆表达纯化EV71 VP1蛋白,使用生物素标记该蛋白.通过ELISA法摸索出Bio-EV71 VP1的最适抗原量为0.0375 μg.优化供体微球、受体微球、血清等实验反应体系,建立EV71 VP1的均相酶联免疫检测方法的IgM检测技术.使用EV71感染的手足口病（HFMD）患者和健康人血清进行均相酶联免疫检测方法检测评价,并与ELISA检测结果相比较.结果 获得EV71 VP1纯化蛋白并生物素化.摸索出均相酶联免疫检测方法的体系：5 μg/ml受体微球、0.037 5μg生物素化的VP1、20μg/ml供体微球、血清2μl,总体系为20μl.采用ELISA和均相酶联免疫检测方法检测方法对样本血清进行IgM检测.两种方法同时检出手足口病患者lgM阳性16份;14份ELISA法检出阴性样本中,均相酶联免疫检测方法法检出阳性6份.20份健康人血清,2种方法检测结果均为阴性.结论 本研究初步建立了EV71 VP1 IgM的均相酶联免疫检测方法.
- 崔雨王颖甘星宋娟韩俊
- 关键词：EV71VP1IGM
- 人疱疹病毒6型三重芯片式数字PCR方法的建立
- 2021年
- 目的建立同时检测疱疹病毒(human herpesvirus,HHV)-6A、B和核糖核酸酶P/MRP 30 kDa亚基(RPP30)的三重芯片式数字PCR(chip digital PCR,cdPCR)方法确定HHV-6A与HHV-6B感染的病毒载量,及高病毒载量的HHV-6是否由病毒整合到染色体导致。方法根据已建立的HHV-6A、HHV-6B实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)方法,建立HHV-6三重cdPCR方法。分别使用HHV-6A、HHV-6B病毒培养物进行敏感性检测,并与其他疱疹病毒进行特异性检测。随后,使用127份全血样本进行三重cdPCR方法验证。结果HHV-6 cdPCR与RT-qPCR方法检测结果的相关性良好(R2>0.97),且与其他疱疹病毒无交叉反应。对经RT-qPCR与cdPCR检测均为阳性的14份样本,经三重cdPCR方法检测,得到HHV-6A和HHV-6B的最低检测病毒载量分别为50拷贝/ml和105拷贝/ml。并且14份样本中HHV-6病毒载量与(RPP30拷贝数/2)的比值均小于1。结论建立的三重cdPCR具有较好的敏感性和特异性,且HHV-6三重cdPCR方法可以定量检测HHV-6A、HHV-6B的病毒载量以及RPP30的拷贝数。通过检测样本中HHV-6病毒载量与(RPP30拷贝数/2)的比值,可以确定高病毒载量的HHV-6是否存在染色体整合。
- 王文军宋娟王瑞芳万以秋魏泽姚海兰韩俊
- 关键词：人疱疹病毒6型
- BSL-2实验室开展SARS-CoV-2核酸检测过程中的生物安全管理被引量：5
- 2021年
- 目的:总结生物安全二级(bio-safety level 2,BSL-2)实验室开展新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测过程中的生物安全管理经验与效果。方法:检测样本来源于2020年2月21日到2020年11月5日送达中国疾控中心病毒病预防控制所病毒资源中心科室的人体咽拭子、鼻拭子、痰液、尿液、便液等。在遵循常规生物安全管理要求的基础上,在检测过程中积极进行人员、岗位、标本、过程、安全巡视等生物安全管理。结果:共开展了27692人次样本的SARS-CoV-2核酸检测,平均每天检测(2.32±0.11)批样本,每批平均检测(87.22±6.83)件样本,BSL-2实验室平均每天工作时间(3.43±0.23)h。在检测过程中未出现任何生物安全问题。结论:BSL-2实验室在长时间的SARS-CoV-2核酸检测过程中,要积极从多方面加强生物安全管理,从而保障检测工作安全有序进行。
- 夏志强杜海军夏冬梅国勇王文军王瑞芳宋芹芹宋娟王衍海韩俊
- 关键词：核酸检测
- AlphaLISA技术的发展及应用被引量：2
- 2011年
- AlphaLISA技术是一种基于微珠的化学发光的新型均相检测技术,与传统的ELISA技术相比具有更高的敏感性、精确性、均一性、背景低、广泛的动态检测范围,而且无需洗涤及样本需求量极少等特点.该技术可用于多种组织、细胞来源的生物分子的检测,如细胞因子、抗原抗体的检测、蛋白相互作用及蛋白质与核酸相互作用的检测以及药物分析等研究.随着AlphaLISA技术的发展,该技术已在医学及分子生物学领域得到了广泛的应用.
- 王颖宋娟崔雨甘星孙鹏王克霞韩俊董小平
- 关键词：分子检测
- CVB3诱导Th17/Treg失衡导致小鼠病毒性胰腺炎
- 2023年
- 目的构建CVB3诱导的小鼠胰腺炎模型,观察胰腺组织病理学损伤和浸润Th17/Treg细胞的占比变化。方法BALB/c小鼠腹腔注射CVB3构建急性病毒性胰腺炎模型,通过HE染色观察胰腺病理学改变;q-PCR检测胰腺组织病毒核酸载量和细胞因子(IFN-γ、IL-6和IL-17)mRNA的相对表达量;流式细胞术检测胰腺组织浸润细胞CD45+CD3+T细胞、CD4+和CD8+T细胞、Th17和Treg细胞占比。结果CVB3感染第3天胰腺组织病毒核酸载量为0.96±0.18,且随感染时间点推移而逐渐降低;与3dpi组相比,7dpi组胰腺组织病毒核酸载量有降低趋势(0.96±0.18 vs.0.62±0.14),但无统计学差异。胰腺组织炎症细胞浸润在7dpi后明显增加,损伤评分>2;浸润的Th17细胞(1.05±0.21 vs.22.13±5.79)和Treg细胞(3.11±0.78 vs.8.25±1.30)在CD4+T细胞中占比在感染后7天同时升高(P<0.05),且Th17/Treg比值也明显增高(P<0.01)。与对照组相比,CVB3感染第7天,胰腺组织IFN-γ(1.05±0.23 vs.672.6±47.67)、IL-6(1.00±0.38 vs.68.28±4.57)、IL-17(1.01±0.11 vs.54.15±7.94)的mRNA相对表达量明显升高(P<0.01)。结论CVB3诱导小鼠病毒性胰腺炎,胰腺组织浸润Th17/Treg及其相关细胞因子IL-6和IL-17上调,促进疾病进展。
- 王瑞芳宗可鑫宋芹芹夏冬杜海军刘宓夏志强韩俊宋娟
- 关键词：CVB3炎性浸润TH17TREG
- 2015-2021年徐州市呼吸道合胞病毒感染与气象因素的关联分析与预测
- 2023年
- 目的分析呼吸道合胞病毒感染与气象因素的关联,预测并解释其变化趋势。方法收集2015—2021年徐州市住院儿童的严重急性呼吸道感染病例。通过实时荧光聚合酶链式反应检测呼吸道合胞病毒(RSV),使用SPSS 26.0软件对结果进行统计分析。使用2015—2019年数据构建负二项回归模型,探究对RSV感染有影响的气象因素。使用多变量时间序列模型预测2020—2021年RSV检出率。结果2015—2021年共收集1663例严重急性呼吸道感染患儿样本,其中RSV检出阳性样本218例(13.1%)。RSV季节效应明显,以1年为周期出现冬季(12月至次年2月)为高峰,夏季(6—8月)为低谷。负二项回归分析表明,月平均气温、月平均相对湿度和月总日照时数可能是本地区RSV感染的影响因素。以日照时数为协变量的时间序列模型预测结果表明,2020年预测效果较好,实际值与预测值接近。2021年的预测变化趋势一致,但实际值高于预测值。结论月平均气温降低、月平均相对湿度升高或月总日照时数延长可能是本地区儿童中RSV感染增加的影响因素。可以使用2015—2019年数据建立预测模型,其中2021年预测值的偏差,体现了疾病的流行是多因素相关,提示未来RSV的流行趋势可能会上升。
- 曹润冬夏冬宋芹芹宋娟夏志强刘宓杜海军朱人和韩俊高晨
- 关键词：呼吸道合胞病毒气象时间序列分析
