- PUMA基因转染乳腺癌MCF-7细胞增强表柔比星致凋亡敏感性的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨PUMA基因转染是否增强乳腺癌MCF-7细胞对表柔比星致凋亡的敏感性。方法:应用脂质体介导重组真核表达载体PUMA-pCDNA3和空载体pCDNA3质粒瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞中,G418筛选阳性细胞。将系列浓度(0.01～100μmol/L)的表柔比星分别作用于MCF-7、MCF-7/PUMA和MCF-7/pCDNA3细胞72 h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50,FCM、TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化。结果:MCF-7、MCF-7/PUMA和MCF-7/pCDNA3细胞的表柔比星IC50分别为(13±1.4)、(1.8±0.2)和(10.7±1.3)μmol/L,MCF-7/PUMA细胞对表柔比星作用的敏感性增加了7.2倍。表柔比星以剂量依赖方式诱导MCF-7细胞凋亡,但对MCF-7/PUMA细胞所诱导的凋亡比MCF-7和MCF-7pCDNA3更明显。低浓度表柔比星(0.1μmol/L)轻微引起MCF-7/pCDNA3[(1.15±0.26)%]和MCF-7细胞凋亡[(0.9±0.24)%],但能诱导MCF-7/PUMA细胞明显凋亡[(6.44±1.46)%];高浓度表柔比星(1μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但表柔比星MCF-7/PU MA细胞凋亡率[(35.47±9.36)%]明显高于MCF-7[(12.6±3.73)%]和MCF-7/pCDNA3细胞[(15.2±5.17)%],差异均有统计学意义(P<0.01);FCM和TUNEL方法检测显示相同的结果。PUMA蛋白在MCF-7/PUMA细胞中的表达明显高于MCF-7和MCF-7/pCD NA3细胞。结论:PUMA基因稳定转染明显地增强了乳腺癌MCF-7细胞增强表柔比星致凋亡作用的敏感性。
- 姜真孙长岗庄静刘瑞娟王华庆王兴曲美婷
- 关键词：PUMA基因乳腺癌MCF-7细胞凋亡
- 天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的影响。办法主要采用MTT法检测不同浓度的天花粉蛋白（TCS）对MCF-7／ADR细胞增殖的抑制作用；流式细胞术（FCM）检测MCF-7／ADR细胞的凋亡情况；四唑氮盐（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法观察天花粉蛋白对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／ADR的耐药逆转作用。结果MTT分析结果显示，TCS在20-100mg／L浓度范围内有明显的抑制作用，存在剂量-效应和时间-效应关系。流式细胞术检测结果显示：20，40，80mg／L TCS作用48h后，MCF-7／ADR细胞凋亡率分剐为12．56％±0．70％，18．34％±1．01％，38．92％±1．79％，细胞凋亡率随药物浓度增加而增加，各实验组之间比较有显著性差异（P〈0．05）。（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法结果发现：MCF-7中未测出ALDH1蛋白，在MCF-7／ADR空白对照和TCS20mg／L作用2d后检测出ALDHJ蛋白表达开始下降，MCF-7／ADR在TCS20mg/L作用3（1，4d后ALDH1蛋白表达明显下降，MCF-7／ADR在TCS 20mg/L作用5d后来检测到ALDHI蛋白的表达。结论天花粉蛋白（TCS）具有逆转乳腺癌细胞株MCF-7／ADR耐药性的作用，可明显下调ALDHI蛋白的表达。天花粉蛋白（TCS）可能通过下调ALDH1蛋白的表达，抑制乳腺癌干细胞的富集，来诱导MCF-7／ADR细胞凋亡，抑制MCF-7／ADR细胞的增殖。
- 姜真孙长岗庄静唐世锋刘瑞娟韩海娥冯福彬
- 关键词：天花粉蛋白MCF-7细胞
- 肿瘤干细胞学说及相关性中药作用机理的研究被引量：12
- 2013年
- 干细胞是一群未分化的具有自我更新、多系分化潜能的细胞。随着对干细胞研究的不断深入,越来越多证据表明肿瘤中极少数细胞具有干细胞特征,肿瘤干细胞概念随之产生,且已从血液肿瘤、乳腺癌、脑肿瘤、结直肠癌、卵巢癌等多种实体肿瘤中分离出肿瘤干细胞。肿瘤的发生、复发、转移与肿瘤干细胞有密切关系,但目前针对肿瘤干细胞的干预治疗尚处于研究阶段,暂无靶向调控肿瘤干细胞功能的成熟方法。实践证明,中医药对恶性肿瘤的治疗在临床有确切疗效,实验研究也发现中药可影响干细胞的生物学行为,因此,文章就肿瘤干细胞的生物学特性、调控机制及中药对其作用机理的研究进展作一综述。
- 庄静孙长岗梁艳姜真冯福彬韩海娥
- 关键词：肿瘤干细胞中药
- 逆转胶囊对人乳腺癌MCF-7/ADR细胞中P-gp和MRP表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:检测逆转胶囊对乳腺癌耐药相关蛋白表达的影响,探讨其逆转乳腺癌多药耐药的作用机制。方法:流式细胞术、免疫印迹技术(Western-blot)检测逆转胶囊作用前后MCF-7/ADR细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:逆转胶囊能显著抑制MCF-7/ADR细胞表面P-gp的表达,并可诱导MRP表达下降,其作用随血药浓度增加和作用时间的延长而增强。结论:逆转胶囊逆转乳腺癌多药耐药的机制与下调P-gp和MRP的表达有关。
- 刘瑞娟孙长岗姜真庄静刘丽娟
- 关键词：多药耐药MCF-7P-糖蛋白多药耐药相关蛋白
