刘艳华
- 作品数：19 被引量：17H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O139方法
- 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O139检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O－抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O139特异性基因rfb中的一段DNA序列。...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 新型小分子重组毒素GnRH－luffinS2融合蛋白及其制备和应用
- 本发明涉及一种抗肿瘤的重组免疫毒素及其制备方法和应用。本发明构建了一种靶向毒素融合蛋白，其含有luffin S2的氨基酸片断、人促性腺激素释放激素以及中间的连接肽。该融合蛋白的制备方法包括：1)构建含有目的基因的质粒；2...
- 王景林刘艳华康琳高姗
- 文献传递
- 小分子GnRH-luffinS重组嵌合毒素的制备及其细胞毒性检测
- 2008年
- 目的:制备以小分子丝瓜素(luffin)S2为毒性部分,以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH)为导向部分的重组嵌合毒素GnRH-luffinS,体外检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:重叠PCR方法扩增GnRH-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化。纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒性。结果:成功构建了GnRH-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为93%。GnRH-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为67.19,70.42,84.44和106.25μg/ml,而对CEF无作用。结论:重组毒素GnRH-luffinS对肿瘤细胞有一定的杀伤作用。
- 刘艳华康琳高姗王俊红赵金银高艳丽胡瑞王景林
- 关键词：细胞毒性
- 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O139方法
- 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O139检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O-抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O139特异性基因rfb中的一段DNA序列。...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- GnRH-PE Ⅱ-luffinS重组嵌合毒素的制备与细胞毒性检测被引量：1
- 2008年
- 目的:制备以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH Ⅰ)为导向部分,以绿脓杆菌外毒素的结构域Ⅱ(PEⅡ)为转膜区,以丝瓜毒素luffinS2为毒性部分的重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS,体外实验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:重叠PCR法扩增GnRH-PEⅡ-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化。纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒作用。结果:成功构建了GnRH-PEⅡ-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为94%。GnRH-PEⅡ-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为13.50μg/ml,13.74μg/ml,16.79μg/ml和26.07μg/ml,而对CEF无作用。结论:重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS对肿瘤细胞有较强的杀伤作用。
- 刘艳华高姗康琳王俊红赵金银高艳丽胡瑞王景林
- 关键词：细胞毒性
- 应用xMAP液态芯片多重快速检测四种病原微生物的研究被引量：11
- 2008年
- 目的:建立一种多重、快速、特异性好、灵敏度高的病原微生物检测方法。方法:根据GenBank数据库中的小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生性李斯特菌、产气荚膜梭菌、鼠疫耶尔森氏菌基因序列,分别针对ail、hly、cpe、3a基因设计4对引物和4条探针。通过重叠PCR扩增各目的基因并构建重组质粒,以该重组质粒DNA为模板,通过多重PCR同时扩增上述4个基因,建立xMAP液态芯片检测技术,在此基础上对标准菌株基因组DNA进行检测并验证该方法的特异性和敏感性。结果:xMAP液态芯片对质粒DNA和标准菌株基因组DNA的检测结果与多重PCR结果一致。该方法能在3.5 h内同时完成对4种病原菌的检测,特异性好,且敏感性要高于PCR方法,灵敏度最高可达200CFU/ml。结论:xMAP液态芯片技术是病原微生物的多重快速检测的新方法,具有很好的应用价值和前景。
- 胡瑞赵金银陈德坤刘艳华高姗康琳高艳丽王景林
- 关键词：病原微生物
- 三种毒素ELISA检测试剂盒的研制
- 列入生物武器核查核查清单中攻击人的生物毒素战剂约11大类,其中,绝大多数毒素清单剂我军没有现成的标准检测鉴定方法。为了迎接生物武器核查的挑战、反对生物战和防范生物恐怖袭击,必须及早建立一套标准化的毒素战剂检测和鉴定方法。...
- 商姗康琳刘艳华王景林
- 关键词：生物武器生物毒素检测试剂盒
- 文献传递
- 一种应用悬浮芯片技术检测致病性志贺氏菌方法
- 本发明涉及一种用于致病性志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从致病性志贺氏菌筛选的特异性基因侵袭相关位点(invasion associated...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 一种应用悬浮芯片技术检测福氏志贺氏菌方法
- 本发明涉及一种用于福氏志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从志贺氏菌O-抗原基因簇筛选的福氏志贺氏菌特异性基因rfc中的一段DNA序列。利用设计...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 小分子重组免疫毒素GnRH-luffinS的制备及其靶向治疗肿瘤的实验研究
- 重组免疫毒素是由靶向区和细胞毒性区组成、可以识别并选择性杀伤特定细胞的融合蛋白,是一类重要的肿瘤靶向性治疗药物。靶向区为能与肿瘤细胞表面抗原特异结合的抗体、细胞因子或激素,毒性区为细菌毒素,如铜绿假单胞菌外毒素(PE)和...
- 刘艳华
- 关键词：肿瘤导向治疗促性腺激素释放激素抑瘤作用
- 文献传递
