赵金银
- 作品数：18 被引量：14H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O139方法
- 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O139检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O－抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O139特异性基因rfb中的一段DNA序列。...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 一种应用悬浮芯片技术检测致病性志贺氏菌方法
- 本发明涉及一种用于致病性志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从致病性志贺氏菌筛选的特异性基因侵袭相关位点(invasion associated...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 一种应用悬浮芯片技术检测福氏志贺氏菌方法
- 本发明涉及一种用于福氏志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从志贺氏菌O-抗原基因簇筛选的福氏志贺氏菌特异性基因rfc中的一段DNA序列。利用设计...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 重要水源性病原微生物的多重快速监测技术研究
- 目的:建立基于xMAP液态芯片技术的多重、快速、高通量检测技术平台。方法:以志贺菌、嗜肺军团杆菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌、肉毒梭菌为主要研究对象,通过Clustal W分析和Blast比对,筛选病原体的特异性基因片段,...
- 赵金银胡瑞高姗王景林
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- 应用xMAP液态芯片多重快速检测四种病原微生物的研究被引量：11
- 2008年
- 目的:建立一种多重、快速、特异性好、灵敏度高的病原微生物检测方法。方法:根据GenBank数据库中的小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生性李斯特菌、产气荚膜梭菌、鼠疫耶尔森氏菌基因序列,分别针对ail、hly、cpe、3a基因设计4对引物和4条探针。通过重叠PCR扩增各目的基因并构建重组质粒,以该重组质粒DNA为模板,通过多重PCR同时扩增上述4个基因,建立xMAP液态芯片检测技术,在此基础上对标准菌株基因组DNA进行检测并验证该方法的特异性和敏感性。结果:xMAP液态芯片对质粒DNA和标准菌株基因组DNA的检测结果与多重PCR结果一致。该方法能在3.5 h内同时完成对4种病原菌的检测,特异性好,且敏感性要高于PCR方法,灵敏度最高可达200CFU/ml。结论:xMAP液态芯片技术是病原微生物的多重快速检测的新方法,具有很好的应用价值和前景。
- 胡瑞赵金银陈德坤刘艳华高姗康琳高艳丽王景林
- 关键词：病原微生物
- 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O1方法
- 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O1检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O-抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O1特异性基因rfb中的一段DNA序列。利用设计...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
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- 小分子GnRH-luffinS重组嵌合毒素的制备及其细胞毒性检测
- 2008年
- 目的:制备以小分子丝瓜素(luffin)S2为毒性部分,以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH)为导向部分的重组嵌合毒素GnRH-luffinS,体外检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:重叠PCR方法扩增GnRH-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化。纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒性。结果:成功构建了GnRH-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为93%。GnRH-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为67.19,70.42,84.44和106.25μg/ml,而对CEF无作用。结论:重组毒素GnRH-luffinS对肿瘤细胞有一定的杀伤作用。
- 刘艳华康琳高姗王俊红赵金银高艳丽胡瑞王景林
- 关键词：细胞毒性
- 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O139方法
- 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O139检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O-抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O139特异性基因rfb中的一段DNA序列。...
- 王景林赵金银高姗刘艳华康琳
- 文献传递
- 相思子毒素抗原和抗体制备
- 2009年
- 〔目的〕研究一种相思子毒素抗原、抗体的制备技术。〔方法〕根据相思子毒素对半乳糖的特异性结合能力,采用亲和层析技术将相思子种子中大部分杂质除去;经凝胶过滤层析,进一步去除植物种子中与蛋白毒素并存的凝集素,获得电泳纯度天然相思子毒素纯品。〔结果〕利用大肠埃希菌表达重组相思子毒素A链蛋白,经金属螯合层析法纯化,得到重组相思子毒素A链蛋白抗原。重组抗原免疫大耳白兔、昆明小鼠,采用辛酸-硫酸铵盐析法和亲和层析法纯化兔血清和鼠腹水获得多抗;2种抗体与天然毒素特异性结合的活性效价均为106。〔结论〕抗原、抗体的制备为建立相思子毒素检测方法奠定了基础。
- 聂聪王静孙肖红杨宇高姗康琳赵金银王景林
- 关键词：抗原抗体
- 寡核苷酸探针悬浮芯片在病原体检测中的应用被引量：1
- 2009年
- 悬浮芯片与固体芯片、荧光定量PCR并列成为核酸序列鉴定中的重要的分子生物学工具,并在病原菌检测方面显示出不同的应用领域。悬浮芯片能同时检测多种病原菌,具有处理多样本能力、使用灵活、低成本等特点,适合对未知样本检测及环境监控,能够在生物安全、公共卫生、工农业生产中发挥重要作用;而固体芯片能耦联成千上百个探针,但由于在多样本处理、成本方面欠缺,因此适合于对重要的未知病原体的鉴定;荧光定量PCR具较好特异性、灵敏度,以及多样本处理能力,但在高通量方面欠缺,适合有目的地检测已知病原体。目前已建立三种基于悬浮芯片的检测方法:多重PCR扩增、通用引物扩增16S/23SrDNA、直接对实际样本杂交检测。多重PCR具较好特异性,但其多重能力还难以满足悬浮芯片的高通量的需要;通用引物具较好灵敏度及扩增多靶分子能力,但也存在交叉反应等缺陷。同时,采用PCR扩增方法,悬浮芯片检测的是PCR产物,不能客观反应实际样本中存在病原菌数量及是否具生命力。直接杂交环境样本尽管避免了PCR的缺陷,但在灵敏度方面非常欠缺。目前,在环境样本处理上,仍然缺乏有效的、高通量、自动化的方法,不能满足PCR与悬浮芯片多样本检测的需要。
- 赵金银王景林
- 关键词：悬浮芯片病原体基因芯片荧光定量PCR
