付延军
- 作品数：12 被引量：58H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达被引量：3
- 2007年
- 目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中,构建新型真核表达载体pCS,再将含HIV-1 MEGp24基因插入至pCS载体中,构建重组核酸疫苗pCS-MEGp24。用脂质体法将重组质粒转染入BHK-21细胞,进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示,重组质粒转染的BHK-21细胞能有效表达HIV-1 MEGp24,并与HIV阳性血清反应。结论所构建的核酸疫苗可在BHK-21细胞系内进行表达,且MEGp24基因的表达蛋白具有特异性,为构建新型HIV-1中国流行株核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。
- 付延军金宁一金洪涛李臻辛苏文李萍韩贞珍李太元
- 关键词：人免疫缺陷病毒复制子核酸疫苗
- 猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响被引量：22
- 2007年
- 通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体,用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖(PPS1),经纯化测定其糖含量,用红外光谱分析鉴定多糖;纯化鉴定的PPS1,通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用,同时与猪苓菌核多糖(PPS2)进行比较。试验数据经统计学分析显示,E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著(P<0.05);腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验及EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明,PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。
- 李太元田广燕许广波李艳茹金庆日王浩然付延军韩贞珍
- 关键词：免疫小鼠
- 链重叠PCR构建抗HIV免疫毒素及其表达与鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的提高抗HIV免疫毒素DT-ScFv原核表达的可溶性与生物活性。方法利用链重叠PCR融合的方法,构建了免疫毒素DT-ScFv,二者之间添加了connector序列,免疫毒素基因PCR连接测序以后,将其克隆入pET28a质粒,在BL21(DE3)工程菌中诱导表达,通过免疫印迹鉴定表达的重组蛋白,并通过与表达HIV-1gp120的靶细胞的间接免疫荧光实验,验证免疫毒素的细胞识别结合能力。结果本研究成功地构建了免疫毒素DT-ScFv,经原核表达证明目的蛋白以部分可溶的形式存在于表达菌中,添加的connector序列有助于DT-ScFv在细胞中获得正确折叠,重组免疫毒素能与表达gp120的细胞发生特异性的识别结合。结论利用链重叠PCR融合的方法,添加connector序列,有助于提高免疫毒素表达的可溶性与生物活性。本研究对抗HIV免疫毒素的活性研究与应用研究具有重要的意义。
- 金洪涛金宁一李臻李昌付延军王宏
- 关键词：免疫毒素原核表达
- 含塞姆利基森林病毒复制子的HIV多表位核酸疫苗的构建与表达
- 获得性免疫缺陷综合征/(Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS/)即艾滋病，是由人免疫缺陷病毒/(Human jmmunodeficiency Virus，HIV/)感染引起的一种...
- 付延军
- 关键词：HIV真核表达载体IFA
- 文献传递
- 一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明公开了一种HIV复合多表位DNA疫苗，其是以HIV－1衣壳蛋白p24为载体骨架分子，以ER信号肽作为引导序列，包含有HIV基因组中26个高度保守的免疫优势表位，其中包括3个中和抗体表位和23个CTL表位；1个HIV...
- 金宁一李昌李霄鲁会军田明尧金扩世申镇维金洪涛李臻付延军
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫苗的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段。将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEA-ORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXI中,构建重组质粒pVAXI-SEA-ORF6,转化大肠杆菌。经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达。通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性。结果表明,所构建的重组质粒pVAXI-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础。
- 韩贞珍金宁一沈国顺庄天中孙中锋李臻付延军李太元李红文郑敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- 新型鸡痘病毒重组转移载体的构建
- 本文将鸡痘病毒的TK基因分三段经PCR克隆,在每两个片断中间设计酶切位点XhoⅠ和HindⅢ/SacⅠ,并连入pMD载体中.由早晚期启动子p7.5控制的筛选标记基因gpt和由晚期启动子pL控制的报告基因LacZ串联后,克...
- 李臻金宁一金洪涛郑敏付延军辛苏文
- 关键词：鸡痘病毒TK基因
- 文献传递
- 一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明公开了一种HIV复合多表位DNA疫苗，其是以HIV-1衣壳蛋白p24为载体骨架分子，以ER信号肽作为引导序列，包含有HIV基因组中26个高度保守的免疫优势表位，其中包括3个中和抗体表位和23个CTL表位；1个HIV...
- 金宁一李昌李霄鲁会军田明尧金扩世申镇维金洪涛李臻付延军
- 文献传递
- 新型鸡痘病毒重组转移载体的构建
- 将鸡痘病毒的TK基因分三段经PCR克隆,在每两个片断中间设计酶切位点Xho I和HindIII／Sac I, 并连入pMD载体申．由早晚期启动子p7．5控制的筛选标记基因gpt和由晚期启动子pL控制的报告基因LacZ 串...
- 李臻金宁一金洪涛郑敏付延军辛苏文
- 关键词：鸡痘病毒
- 文献传递
- 木醋液抑菌效果的观查被引量：23
- 2005年
- 木醋液是利用木材边脚料提炼的一种多功能天然药物.为了进一步开发利用木醋液,选择多种微生物进行体外抑菌试验,观察抑菌效果.试验结果表明,木醋液对金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌等有明显的抑菌作用.
- 李太元田广燕王浩然付延军韩贞珍
- 关键词：木醋液微生物抑菌作用
