韩贞珍
- 作品数：9 被引量：65H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫苗的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段。将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEA-ORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXI中,构建重组质粒pVAXI-SEA-ORF6,转化大肠杆菌。经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达。通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性。结果表明,所构建的重组质粒pVAXI-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础。
- 韩贞珍金宁一沈国顺庄天中孙中锋李臻付延军李太元李红文郑敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- 猪繁殖障碍与呼吸道综合征的研究进展被引量：4
- 2007年
- 猪繁殖障碍与呼吸道综合征(PRRS)是由PRRSV引起的一种猪传染病,该病以母猪发热,厌食,流产,胎儿干尸化,产弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。PRRSV分为欧洲亚型和美洲亚型,这2个亚型的临床症状相似,但在病毒的抗原性、基因组成及结构上存在较大的差别。十几年来,PRRS给全球养猪业带来巨大经济损失,成为困扰当今世界养猪业健康发展的主要问题之一。作者主要就PRRS的病原、流行病学、发病机制、诊断和防制的研究进展作一综述。
- 韩贞珍李太元李艳茹
- 关键词：猪繁殖障碍与呼吸道综合征病原流行病学发病机制防制
- DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达被引量：3
- 2007年
- 目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中,构建新型真核表达载体pCS,再将含HIV-1 MEGp24基因插入至pCS载体中,构建重组核酸疫苗pCS-MEGp24。用脂质体法将重组质粒转染入BHK-21细胞,进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示,重组质粒转染的BHK-21细胞能有效表达HIV-1 MEGp24,并与HIV阳性血清反应。结论所构建的核酸疫苗可在BHK-21细胞系内进行表达,且MEGp24基因的表达蛋白具有特异性,为构建新型HIV-1中国流行株核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。
- 付延军金宁一金洪涛李臻辛苏文李萍韩贞珍李太元
- 关键词：人免疫缺陷病毒复制子核酸疫苗
- 猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响被引量：22
- 2007年
- 通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体,用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖(PPS1),经纯化测定其糖含量,用红外光谱分析鉴定多糖;纯化鉴定的PPS1,通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用,同时与猪苓菌核多糖(PPS2)进行比较。试验数据经统计学分析显示,E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著(P<0.05);腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验及EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明,PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。
- 李太元田广燕许广波李艳茹金庆日王浩然付延军韩贞珍
- 关键词：免疫小鼠
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6、ORF5基因的克隆、核酸疫苗构建及鉴定
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)主要引起母猪的繁殖障碍，给各国养猪业造成了巨大的经济损失。目前对PRRS的防治尚无切实有效的方法，主要采取疫苗免疫接种和综合防治相结合的方法。用于该病防制的疫苗主要是灭活苗和弱毒苗。但灭活苗...
- 韩贞珍
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒基因核酸疫苗
- 文献传递
- 表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2基因的重组鸡痘病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2007年
- 分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2-16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-ORF2。将该重组质粒与鸡痘病毒282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞,进行同源重组。通过3次溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)加压筛选,经RT-PCR、IFA和Western blot鉴定,表明重组鸡痘病毒中的目的基因在鸡胚成纤维细胞中得到表达,获得一株携带有目的基因ORF2和ORF5的重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5。
- 沈国顺金宁一庄天中韩贞珍李阳张金双
- 关键词：PRRSVORF5PCV-2鸡痘病毒
- 猪苓菌核与猪苓菌丝体中提取多糖对小鼠免疫器官重量影响的比较研究被引量：6
- 2005年
- 通过人工液体浅层培养的方法成功培养出猪苓菌丝体.用热水浸提法分别提取猪苓菌核和猪苓菌丝体中的多糖,并用3,5-二硝基水杨酸法测定其糖含量,进一步纯化处理后,用傅里叶红外吸收光谱仪进行比较分析表明,两者红外光谱图相似.通过对小鼠免疫器官重量的免疫学检测,表明从猪苓菌丝体中提取的多糖和从猪苓菌核中提取的多糖均有提高机体免疫器官重量的作用,统计学分析表明差异不显著.
- 田广燕李太元许广波金庆日韩贞珍
- 关键词：猪苓多糖免疫
- 木醋液抑菌效果的观查被引量：23
- 2005年
- 木醋液是利用木材边脚料提炼的一种多功能天然药物.为了进一步开发利用木醋液,选择多种微生物进行体外抑菌试验,观察抑菌效果.试验结果表明,木醋液对金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌等有明显的抑菌作用.
- 李太元田广燕王浩然付延军韩贞珍
- 关键词：木醋液微生物抑菌作用
- HIV多表位核酸疫苗构建及其免疫原性被引量：6
- 2007年
- 目的设计新型HIV复合多表位疫苗,并检测其在小鼠体内的免疫效果。方法检索抗原表位数据库,进行新型HIV多表位核酸疫苗的设计,利用化学合成的方法合成多表位基因,并构建重组质粒pVAX1-MEGNp24,转染BHK-21细胞,间接免疫荧光法检测多表位基因的表达。重组质粒免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测抗体动态变化,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚类。结果重组质粒pVAX1-MEGNp24经酶切及测序分析,证明构建正确。间接免疫荧光显示能在BHK-21细胞中表达多表位基因。免疫小鼠可诱导小鼠特异性体液免疫和细胞免疫。结论已成功构建了重组质粒pVAX1-MEGNp24,小鼠免疫试验显示其具有良好的免疫原性。
- 李臻金宁一金洪涛沈国顺付延军辛苏文韩贞珍刘玉生
- 关键词：人免疫缺陷病毒核酸疫苗多表位抗原
