井伟东
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种应用生物反应器及片状载体生产狂犬疫苗的方法
- 本发明涉及一种应用生物反应器及片状载体生产狂犬疫苗的方法，属于生物制品技术领域。在具有固定床篮式搅拌系统的Celligen310型14L生物反应器中以台湾赛宇細胞科技股份有限公司的BioNOCII?cellculture...
- 郭秀侠杨屹苗丽刘岩蔡月红李宇辉崔文广姜文波井伟东苑志刚丁丽丽
- 文献传递
- 狂犬病病毒抗原定量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用被引量：6
- 2012年
- 目的建立狂犬病病毒(Rabies virμs,RV)抗原定量双抗体夹心ELISA检测方法,以应用于疫苗生产过程中RV含量的监测。方法将RV aGV株纯化抗原经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,制备抗RV单克隆抗体,纯化后以HRP进行标记,建立双抗体夹心ELISA检测方法。以狂犬病疫苗(效力检定用)国家标准品为定量标准,建立剂量-反应曲线,确定该方法的灵敏度,并对该方法的专属性、精密性及适用性进行验证。结果制备了2株针对不同抗原位点的单克隆抗体1E9和2H1,间接ELISA法测定腹水效价为1∶105～1∶107,纯化后蛋白含量分别为10.285和7.64 mg/ml。建立的ELISA法对RV抗原的最低检出限为1.03 mIU/ml,标准曲线的最佳线性范围为1.03～66 mIU/ml,相关系数为0.991 9。该方法对检测过程中可能遇到的杂质和添加物(人血清白蛋白、牛血清、Vero细胞培养上清)的检测结果均为阴性;检测3个浓度(20、12.50和3.13 mIU/ml)狂犬病疫苗(效力检定用)国家标准品的试验内和试验间变异系数的平均值分别为7.78%和14.0%;用该方法检测不同毒株、不同细胞生产的狂犬病疫苗的RV抗原含量的平均值在0.67～4.86 IU/ml之间。结论成功建立了RV抗原定量双抗体夹心ELISA检测方法,可对来自不同毒株、不同细胞的狂犬病疫苗的RV抗原进行快速定量检测,为疫苗生产中的质量控制提供了简便的监测手段。
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- 关键词：狂犬病病毒抗原酶联免疫吸附测定
