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一种高免疫原性抗胃泌素释放肽核酸疫苗的构建及其在体内对前列腺癌移植瘤的抑制作用: 2009年; 对多株肿瘤细胞的研究表明胃泌素释放肽（GRP）可作为生长因子刺激多种肿瘤的生长，并提示GRP可作为肿瘤免疫治疗的靶点。该研究构建了一系列抗GRP的核酸疫苗以激活针对GRP特异性的体液免疫应答，达到阻断GRP的目的。为打破机体已建立的GRP免疫耐受，将6个串联重复的B细胞表位GRP18～27作为抗原插入到真核表达质粒载体pCR3．1中，并辅之以多种免疫分子佐剂以达到增强核酸疫苗免疫原性的目的。构建的抗GRP核酸疫苗免疫小鼠后，pCR3．1-VS—HSP65-TP—GRP6-M2免疫组诱导出的特异性针对GRP的抗体滴度显著高于其它疫苗免疫组，并在随后的体内抗肿瘤实验中显著的抑制了GRP依赖性的RM-1移植瘤的生长。构建的这种高免疫源性和高效抑制肿瘤生长的抗GRP核酸疫苗为针对GRP依赖性的肿瘤及其并发症的免疫疗法提够了一种新的策略。; 鲁勇王华倩欧阳可栋张会勇胡向兵李泰明曹荣月刘景晶; 关键词：胃泌素释放肽核酸疫苗前列腺癌

一种人血管内皮细胞生长因子类似物: 本发明提供了一种内皮细胞生长因子类似物的构建及制备方法。发明的内皮细胞生长因子类似物VEGF192是通过将VEGF165中110位置的Gly突变成Pro，且在其C末端融合有VEGF183(131-158)的氨基酸序列，使...; 刘景晶张会勇孟雨涵鲁勇张宇胡向兵曹荣月李泰明; 文献传递

一种谷氨酸脱羧酶65相关肽融合蛋白的制备及其治疗1型糖尿病的药效研究被引量：2: 2009年; 使用基因工程方法构建了霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase65,GAD65)串联三肽GADⅢ(包括p217—236,p524—538,p290—306)的融合基因CTB-GADⅢ。将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过15%SDS-PAGE分析表明该菌株可以以包涵体形式表达融合蛋白,Mr约为17.6k。含有CTB-GADⅢ重组蛋白的包涵体经过变性、复性、纯化后,可以得到五聚体结构的CTB-GADⅢ。神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)结合实验表明重组CTB-GADⅢ蛋白可以与GM1特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。使用该重组蛋白在NOD小鼠8周龄、10周龄和12周龄时滴鼻免疫小鼠共3次,可以显著降低小鼠的发病率,达到治疗1型糖尿病的作用。; 王华倩张会勇杨洁鲁勇李泰明金亮曹荣月刘景晶; 关键词：谷氨酸脱羧酶65 霍乱毒素B亚单位治疗1型糖尿病 NOD小鼠

人胰岛素类似物的制备方法及用途: 本发明属于人药的领域，涉及一类治疗I型和II型糖尿病的药物，提供了一类人胰岛素类似物的制备方法和用途。本发明所涉及的人胰岛素类似物的特征具有如下形式：<Image file="B2007101338674A00011.G...; 刘景晶鲁勇刘素丽李祝芳范豪吴洁曹荣月; 文献传递

重组人胰岛素pET28a-IHI下游工艺研究: 2010年; 目的对含有重组人胰岛素原基因的大肠杆菌工程菌pET28a-I HI摇瓶发酵,并探讨采用磺酸化方法对包涵体蛋白纯化复性的工艺。方法工程菌pET28a-I HI经摇瓶发酵、机械破碎得到包涵体,包涵体经过磺酸化、等电点沉淀、DEAE-52柱层析三步纯化后采用15%SDS-PAGE电泳检测,经过复性,酶切,DEAE-52纯化后,冷冻干燥,样品进行HPLC检测以及整体生物学活性实验。结果工程菌表达量约在30%左右,经过三步纯化,包涵体纯度可达98%以上,酶切之后经质谱检测,与人胰岛素标准品相对分子质量一致,而且动物实验降血糖效果明显,1 L发酵液最终可得到人胰岛素140mg。结论该工艺耗时短,效果好,成本较低。; 杨亚男鲁勇刘景晶曹荣月; 关键词：基因工程重组人胰岛素纯化

热休克蛋白HSP65DNA疫苗抑制黑色素瘤血行转移的实验研究被引量：4: 2009年; 观察卡介苗来源的热休克蛋白HSP65的DNA疫苗对小鼠B16/F10黑色素瘤血行转移的抑制作用。构建含HSP65编码基因的真核分泌表达DNA疫苗pCR3.1-VS-HSP65及其后融合多个T细胞辅助表位的pCR3.1-VS-HSP65-TP-M2。连续8次肌肉注射免疫C57BL/6J雄性小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HSP65-IgG类抗体滴度,于最后一次免疫后第2周,尾静脉接种B16/F10黑色素瘤细胞,考察该疫苗的免疫原性及药效。ELISA结果显示两种HSP65核酸疫苗均能诱发高滴度抗HSP-IgG类抗体。pCR3.1-VS-HSP65-TP-M2诱发抗体滴度较pCR3.1-VS-HSP65显著增加,并能显著抑制B16/F10的血行转移(P<0.05),且与生理盐水对照组对比抑瘤率达到74.8%(肝),53.2%(肺)。HSP65在增强其免疫原性的基础上能显著抑制B16/F10黑色素瘤的血行转移。; 林明鲁勇张宇谢燕飞胡向兵王华倩李泰明吴洁刘景晶曹荣月; 关键词：热休克蛋白 HSP65 DNA疫苗黑色素瘤抑瘤率

HSP65重组蛋白质的制备及用途: 本发明提供一种具有抗肿瘤作用的、源于牛结核分枝杆菌(Mycobacteriiumbovine)热休克蛋白65(国际基因库登录号是M17705)的重组蛋白Hsp65。该蛋白质作用于机体后能显著抑制肿瘤内部及其周围新生血管的...; 刘景晶谢燕飞鲁勇吴国君林明范豪吴洁曹荣月; 文献传递

一种降低血总胆固醇的免疫调节剂及其给药方式: 本发明提供了牛结核分枝杆菌热休克蛋白65在预防和治疗动脉粥样硬化中的新用途，及达到这个用途的给药途径、剂量。本发明的牛结核分枝杆菌热休克蛋白65通过基因工程和生物工程手段获得，并证明其具有降低血总胆固醇，增加细胞胆固醇逆...; 刘景晶张宇胡向兵张会勇鲁勇曹荣月李泰明; 文献传递

基于热休克蛋白65的抗动脉粥样硬化蛋白疫苗的免疫效果被引量：2: 2011年; 选取了HSP65上对自身免疫性炎症疾病有防治作用的两段功能表位P1(179-190)、P2(31-46),分别以HSP65和CTB为载体蛋白构建高效表达载体pET28a-HSP65-P1P2P1与pET28a-CTB-P1P2P1,以硫酸铵分级沉淀和包涵体洗涤、经DEAE阴离子交换柱层析分离纯化得到HSP65-P1P2P1与CTB-P1P2P1融合蛋白,并用戊二醛一步偶联法将两者偶联形成HpCp复合物。以小剂量滴鼻粘膜免疫高胆固醇膳食诱发产生动脉粥样硬化的新西兰大白兔,结果显示两组融合蛋白均表现出一定的减斑功效,与PBS对照组相比较,主动脉病斑面积分别减少了34.9%和27.9%,为进一步开发能用于临床的抗AS疫苗提供了良好的设计思路,可经进一步优化设计提高其免疫原性,研发为抗动脉粥样硬化疫苗。; 孙云霄鲁勇李祝方徐强刘晓明李泰明刘景晶; 关键词：热休克蛋白动脉粥样硬化免疫

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鲁勇