魏政立
- 作品数：11 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中国医科大学实验动物部辽宁省转基因动物研究重点实验室更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄仓鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织器官中的差异表达
- 2015年
- 目的构建金黄仑鼠载脂蛋白A5（Apoa5）基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析，为深入研究Apoa5基因在金黄仓鼠不同组织中功能奠定基础。方法提取金黄仓鼠肝脏组织总RNA，采用RT—PCR方法对金黄仓鼠Apoa5基因的cDNA进行克隆，构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞，分别采用RT—PCR和Westernblot方法检测mRNA及蛋白质表达水平。采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5mRNA在8个组织中的表达量。结果经PCR检测鉴定，Apoa5基因表达载体构建成功，经测序分析金黄仓鼠Apoa5基因cDNA全长1243bp，编码366个氨基酸，与人、大鼠、小鼠等物种比对，核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性，金黄仓鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75％、84％、84％。转染293T细胞48h后，RT—PCR和Westernblot结果表明，Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达。荧光定量PCR结果显示，Apoa5mRNA在肝脏表达量最高，在脑和睾丸中中度表达，在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达。结论成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异，为制备Apoa5转基因金黄仓鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄仓鼠脂类代谢中的功能奠定基础。
- 董婉维张婀娜郭晓冲魏政立杨葳周生来赵文郑志红
- 关键词：金黄仓鼠基因表达
- 早期胃癌缩小手术适应症选择的研究被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨早期胃癌缩小手术的手术指征。方法 对147例治愈性切除的早期胃癌的临床病理资料进行对比分析。结果 147例早期胃癌淋巴结转移率为11.6％(17/147)。粘膜内癌(M癌)转移仅限于第一站淋巴结。粘膜下浸润癌(SM癌)第二站淋巴结转移度为62.5％(10/16),限于No7、8a淋巴结。Ⅱa型及Ⅱb型M癌未发现转移,而Ⅰ型,Ⅱc型Ⅲ型(主要是SM癌)有较高转移率。分化型癌的淋巴转移率为8.9％(9/101),低于未分化型17.4％(8/46)。癌灶内不伴有溃疡的早期癌淋巴结转移率为6.9％,伴有溃疡者转移率明显增高为18.3％。结论 M癌是缩小手术的最好指征。SM癌大多不适合缩小手术,应将开腹标准根治术(D_2)作为其基本术式;但对≤10mm的分化型SM癌可考虑开腹缩小手术(D_1+a)。
- 戚晓东魏政立王江陈波姚凡
- 关键词：早期胃癌手术指征适应症
- 羟基喜树碱伍用免疫制剂治疗癌性腹水研究
- 该实验探讨了羟基喜树碱(10-HCPT)及其伍用免疫制剂治疗腹膜转移癌的疗效及不同给药剂量对疗效的影响.结论:(1)羟喜腹腔内给药治疗癌腹膜转移时,小剂量分次给药疗效较大剂量一次给药好,提示疗效与作用时间有关,临床应用羟...
- 魏政立
- 关键词：羟基喜树碱免疫化疗腹膜转移癌
- 文献传递
- 一种能实现蛋白可逆表达的敲入载体构建方法被引量：1
- 2016年
- 在细胞或小鼠中使用Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)条件性地删除或修饰基因是不可逆的,基因删除后蛋白不能恢复表达。FK506-雷怕霉素结合蛋白FKBP L106P不稳定结构域(FKBP L106P destabilization domain)DD-C-Shield1系统可以解决这个问题,能人为控制蛋白表达或降解,避免胚胎致死。本实验以小GTP酶腺苷二磷酸核糖基化因子6(ADP-ribosylation factor 6,ARF6)为例,借助EL350细菌中Red/ET重组作用,使用DD-C-Shield1系统和重叠延伸PCR方法,发展一种通用的可实现蛋白可逆表达的构建敲入载体的方法。该方法缩短了构建时间,减少了重组的步骤,不需要使用rps L-neo DNA、链霉素和酶切位点。此敲入载体两侧同源臂5 kb左右,可用传统的ES打靶方法构建敲入小鼠,经过简单改造也可使用CRISPR/Cas9方法构建敲入细胞或小鼠模型,从而在细胞和动物模型中进行条件性修饰、快速、可逆地调节特异性蛋白表达,以利于发育学研究,为细胞和活体生物严谨调控蛋白功能提供了一种新的策略。
- 王金霞徐影琪魏政立杨葳张梅英郑志红
- 关键词：重叠延伸PCR
- 纤维蛋白粘合剂包埋顺铂治疗腹膜移植瘤的研究被引量：5
- 2003年
- 戚晓东王江魏政立傅炜昕
- 关键词：纤维蛋白粘合剂顺铂
- 中国与日本胃癌治疗成绩比较——附2438例报告被引量：2
- 2002年
- 目的 通过比较中国医科大学 (中国医大 )和日本东京大学 (东大 )胃癌诊疗成绩 ,探讨提高胃癌治疗方法。方法 比较两大学之间胃癌的临床病理特征、手术方式的分布特点及其对术后长期生存影响。结果 东大的治愈性切除率为 85 9% (914 10 6 4 ) ,高于中国医大的 6 7 5 % (75 6 112 0 )。中国医大高度进展期癌 (se ,si)占治愈性切除的 5 2 1% (394 75 6 ) ,远高于东大的 16 6 % (15 2 914 ) ;中国医大治愈性切除病例的早期癌占 17 3% (131 75 6 ) ,低于东大的 5 7 2 % (5 2 3 914 )。东大的胃癌治愈性切除术后总生存率明显高于中国医大 (77 2 % ,5 7 1% ,P <0 0 0 0 1)。两大学资料都显示 ,癌浸润深度越深 ,预后越差 ;D2 ,D3根治术 5年生存率均高于D1 根治术 ;手术方式不同 ,其生存率顺序为远切 >全切 >近切 >联合切 ;浸润型胃癌预后差。
- 戚晓东陈波王江魏政立金锋王舒宝陈峻青真船健一上西纪夫
- 关键词：胃癌手术方式病理特征
- 肿瘤研究常用动物小鼠病原菌16s rDNA检测方法的建立
- 2015年
- 目的:建立肿瘤研究常用动物小鼠病原菌快速检测方法。方法:提取经常规方法已被鉴定的小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌DNA,利用PCR技术扩增病原菌16s rDNA全长,经纯化后直接测序。利用BLAST软件从Gen Bank数据库中搜索相关菌株的序列进行序列比对和同源性分析,确定病原菌的种属。结果:测序结果与数据库中搜索到的相关菌株的序列进行序列比对显示,3种病原菌测序序列分别与绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌序列一致。结论:16s rDNA PCR方法可准确地检测肿瘤研究常用动物小鼠病原菌绿脓杆菌、溶血性链球菌和大肠埃希氏菌感染,并且缩短了检测时间。
- 时伟红魏政立郭晓冲刘佳吴腾飞郑志红
- 关键词：小鼠病原菌RDNA多聚酶链反应
- 羟基喜树碱联合免疫制剂治疗癌性腹水的研究被引量：1
- 2002年
- 戚晓东魏政立王江徐惠绵王舒宝
- 关键词：HCPT羟基喜树碱免疫制剂癌性腹水腹膜转移癌
- β-连环蛋白在结肠癌细胞及肿瘤球细胞中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的:研究信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中的表达状况。方法:培养ccl187细胞及其肿瘤球,分别提取ccl187细胞和肿瘤球细胞的总RNA,应用半定量RT-PCR和Westernblot方法分别检测β-连环蛋白在ccl187细胞及其肿瘤球中的mRNA水平及蛋白水平的表达。结果:半定量RT-PCR结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白转录水平分别为41.6%和42.6%(P>0.05)。半定量Western blot结果显示ccl187细胞和肿瘤球细胞中β-连环蛋白的含量分别为36.7%和73.4%(P<0.05)。结论:信号通路β-连环蛋白在人结肠癌ccl187细胞及其肿瘤球细胞中转录水平基本一致,但肿瘤球细胞中β-连环蛋白被积累,含量显著高于ccl187细胞。
- 时伟红王惟杨葳郭晓冲于萌魏政立秦英郑志红
- 关键词：Β-连环蛋白结肠癌
- 基因芯片筛选胃癌及肿瘤球细胞差异表达基因被引量：4
- 2012年
- 目的:利用基因芯片技术筛选人胃癌细胞HGC-27及其肿瘤球细胞的差异表达基因。方法:无菌条件下体外培养人胃癌细胞HGC-27及其肿瘤球细胞,Trizol试剂提取两种细胞的总RNA并纯化,按Gene-Chip IVT Express Kit说明对总RNA进行杂交,所得荧光信号用Cluster和TreeView软件进行分析和显示。结果:按差异显著性标准(差异为2倍),以人胃癌细胞为对照,在肿瘤球细胞中有610个基因表达上调,1135个基因表达下调,涉及细胞生长、信号传导、肿瘤形成等多个方面。结论:人胃癌细胞HGC-27与其肿瘤球细胞存在基因表达的差异,肿瘤球细胞与肿瘤的形成相关。
- 时伟红于岳宝李兆阳郭晓冲魏政立任萍萍郑志红
- 关键词：胃癌细胞基因芯片基因表达
