白冰珂
- 作品数：34 被引量：51H指数：4
- 供职机构：解放军第三○二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 肠道病毒71型强神经毒分离株VP1蛋白的表达鉴定
- 胡燕白冰珂沈宏辉侯俊高蓉罗声栋貌盼勇
- 文献传递
- 利用减毒沙门菌递送的柯萨奇病毒A16型VP1基因重组质粒的构建和鉴定被引量：6
- 2011年
- 目的:构建能够稳定携带柯萨奇病毒A16型(CoxA16)VP1基因的重组减毒伤寒沙门菌并鉴定目的抗原的表达,研发利用减毒沙门菌递送的口服疫苗。方法:利用DNA重组技术,构建表达CoxA16 VP1蛋白的真核表达质粒,体外转染Vero细胞后检测VP1蛋白表达情况及抗原活性,并将该质粒通过电转化构建重组减毒伤寒沙门菌。结果:构建了表达CoxA16 VP1蛋白的重组质粒,转染vero细胞后检测到CoxA16 VP1蛋白的表达并具有抗原活性;获得能稳定携带该质粒的重组减毒伤寒沙门菌。结论:成功构建稳定携带柯萨奇病毒A16型(CoxA16)VP1基因的重组减毒伤寒沙门菌,为口服CoxA16疫苗的研究打下了基础。
- 刘泽白冰珂高蓉蔡少平胡燕沈宏辉貌盼勇
- 关键词：柯萨奇病毒A16型
- 肠道病毒71型强神经毒分离株VP1蛋白的表达鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的利用大肠杆菌原核表达系统表达肠道病毒71型强神经毒分离株VP1蛋白,为抗体制备和病毒诊断试剂盒的开发奠定基础。方法利用一步法RT-PCR扩增出病毒VP1基因,构建重组原核表达质粒,IPTG诱导后经SDS-PAGE和Western blot验证蛋白表达的特异性。结果重组质粒在1 mmol/L的IPTG 37℃诱导6 h后可诱导表达得到约33 KD的蛋白,且表达的蛋白主要以不溶性的包涵体形式存在。VP1蛋白特异性单抗和His蛋白单抗验证了蛋白表达的特异性。结论获得特异性的EV71病毒河南分离株VP1蛋白,可用于开发病毒诊断试剂盒。
- 胡燕白冰珂沈宏辉侯俊高蓉罗声栋貌盼勇
- 关键词：肠道病毒71型VP1蛋白原核表达
- T7 RNA聚合酶真核表达质粒体外拯救脊髓灰质炎病毒疫苗SabinⅠ的研究
- 沈宏辉白冰珂柴艳涛胡燕高蓉貌盼勇
- 化学发光法检测HCVIgG抗体方法的建立和初步应用被引量：3
- 2015年
- 目的利用化学发光原理建立一种检On,0HCVIgG抗体的方法，用于HCV感染的检测并为试剂盒研制奠定基础。方法方法学建立。2013年1月至6月完全随机选取的解放军第三。二医院的198份丙型肝炎患者和222份献血员的血清样本。采用间接ELISA方法，用基因工程表达的丙型肝炎病毒（HCV）-NS3、HCV-Core抗原包被化学发光微孔板，辣根过氧化物酶标记抗人IgG抗体，初步建立HCVIgG抗体的化学发光检测方法，进一步与已批准的丙型肝炎病毒抗体检测试剂（化学发光法）同时检测并进行结果对比。结果自制试剂与对照试剂的阳性符合率为99．0％（196／198），阴性符合率为98．2％（218／222），总符合率为98．6％（414／420）。用自制试剂同时检测同1份HCV阳性血清重复10次，其变异系数〈10％。结论初步建立了HCVIgG抗体的化学发光检测方法，此法特异性强、敏感性高，适用于献血员的筛选和临床HCV感染的检测及流行病学调查。
- 侯俊胡燕邬顺全白冰珂姜棋予史素娟王保君欧卫军貌盼勇
- 关键词：丙型肝炎抗体免疫球蛋白G
- 肠道病毒71型（EV71）AH3株感染性克隆的构建与鉴定
- 2014年
- 目的 构建肠道病毒71型（Enterovirus71,EV71） AH3株的全基因序列感染性克隆.方法 通过分段扩增和酶切连接将EV71全基因组cDNA片段逐步克隆入PWSK29载体,构建含全病毒基因组序列的重组质粒.转染Vero细胞后,获得拯救病毒.经RT-PCR、酶切、测序、间接免疫荧光（IFA）等方法进行鉴定.结果 酶切鉴定结果与预期一致,序列分析显示为EV71基因；其转染Vero细胞后,可观察到典型的细胞病变；所获得的拯救子代病毒滴度（TCID50）为107.5；IFA检测可见感染细胞出现绿色荧光.结论 成功构建EV71全基因序列感染性克隆,为病毒致病机理及减毒疫苗的研究奠定基础.
- 侯俊李瑞生胡燕罗声栋白冰珂沈宏辉王志杰柴燕涛杨瑞创貌盼勇
- 关键词：肠道病毒属
- 携带肠道病毒71型VPl基因的重组减毒沙门菌的构建和鉴定
- 2011年
- 目的构建和鉴定能够稳定携带肠道病毒71型（EV71）VPl基因的重组减毒伤寒沙门菌，用于口服EV71DNA疫苗的研发。方法利用DNA重组技术，构建表达EV71VPl蛋白的真核表达质粒VR．EV7lVPl，体外转染Vero细胞后检测目的蛋白体外表达和抗原性，并将该质粒电转化至减毒伤寒沙门菌SL7027。结果酶切鉴定证实构建含EV7lVPl基因的重组质粒，体外表达目的蛋白具有较好的抗原性．并获得稳定携带该质粒的重组减毒伤寒沙门菌。结论成功构建稳定携带肠道病毒71型VPl基因的减毒伤寒沙门菌，为下一步的疫苗研究打下了基础。
- 刘泽胡燕沈宏辉蔡少平白冰珂高蓉罗声栋柴燕涛貌盼勇
- 关键词：肠道病毒属疫苗DNA沙门菌伤寒
- 甲型H1N1流感患者血清流感病毒血凝抑制抗体滴度变化分析被引量：1
- 2012年
- 目的了解甲型H1N1流感患者发病后体内流感病毒特异性血凝抑制抗体滴度变化。方法采集28例甲型H1N1流感患者发病后不同时间的血清，采用血凝抑制试验测定其抗体滴度并分析。结果患者距发病1、5、15、22、37、49天和58天的血凝抑制抗体滴度分别为5．36、9．39、39．02、57．99、137．92、55．19和57．99，患者的最高抗体滴度几何均数为148．55，其中96．4％（27／28）的患者在病程中产生保护性抗体和发生抗体血清转换。结论甲型H1N1流感患者能有效产生保护性水平的抗体，有较好的免疫反应。
- 沈宏辉侯俊赵敏徐军白冰珂赵静胡燕貌盼勇李伯安毛远丽
- 关键词：流感接种
- 新型呼肠病毒S1基因的表达鉴定
- 2012年
- 目的构建新型呼肠病毒主要抗原蛋白的编码基因S1的重组原核表达质粒，对其在原核细胞内的表达进行研究。方法将S1基因克隆入原核表达载体pProEX HTa，构建重组原核表达载体pPLS，通过IPTG诱导，利用蛋白电泳和蛋白免疫印迹等方法对其在大肠杆菌中的表达进行研究。结果酶切分析表明重组质粒构建成功。SDS-PAGE和Western-blot的检测结果一致表明，诱导后1-5h均可检测到目的蛋白的表达，其中以5h的蛋白表达量最大，且表达的目的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在。结论通过构建重组原核表达质粒，可使目的蛋白σ1得到诱导表达，为后续抗体制备及研究病毒一宿主相互作用提供实验基础。
- 白冰珂胡燕侯俊沈宏辉陆日北罗声栋黄维芝柴艳涛貌盼勇
- 关键词：S1基因
- 新型呼肠病毒M基因重组真核质粒的构建及免疫效果研究
- 目的：研究新型呼肠病毒M基因在小鼠体内的免疫原性,包括体液免疫和细胞免疫.方法：扩增M1,M2和M3片段,并分别克隆至真核表达载体pcDNA3.1+,构建重组质粒,按照每只100 μg的量免疫小鼠,对照质粒和PBS同时免...
- 胡燕王睿林侯俊罗声栋黄维芝杨锐创白冰珂
- 关键词：DNA疫苗细胞免疫体液免疫
