桂丹
- 作品数：11 被引量：11H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛种布鲁氏菌2308株wbkA、pmm基因缺失株的构建及免疫效果的初步研究
- 布鲁氏菌病(Brucellosis,简称布病)是由革兰氏阴性菌布鲁氏菌引起的一类人兽共患的慢性传染病,目前在我国以及世界上大多数国家有比较广泛的流行。该病原菌可感染多种家畜及人,还可感染野生动物,近来还发现该病菌还可感染...
- 桂丹
- 关键词：牛种布鲁氏菌病免疫效果毒力作用
- 文献传递
- 布鲁氏菌ery操纵子突变株生物学特性分析被引量：3
- 2013年
- 布鲁氏菌ery操纵子参与赤藓醇代谢.赤藓醇能够促进布鲁氏菌的生长.为进一步研究布鲁氏菌引发宿主流产的分子机制,采用基因重组技术构建布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株(△ery),通过体内外实验探讨布鲁氏菌ery操纵子的生物学功能.研究结果显示,获得了布鲁氏菌ery操纵子缺失株;布鲁氏菌ery操纵子缺失株侵染胚胎滋养层细胞脱落较亲本株明显下降;巨噬细胞CFU计数缺失株作用组和亲本株作用组差异显著(P<0.05).试管凝集和虎红平板实验结果显示均出现凝集现象;检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平,△ery诱导机体产生的IL-10和TNF-α明显低于亲本株(P<0.05).小鼠脾脏细菌CFU计数结果显示,△ery较亲本株毒力明显下降.本研究表明,布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株毒力较亲本株明显下降,为进一步揭示布鲁氏菌引起流产的致病机制提供了一定的理论依据.
- 桂丹张辉孟仁孟茹张豫孙志华蒋攀文李天森陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌毒力
- 流产布鲁氏菌2308株磷酸甘露糖变位酶pmm基因缺失株构建及鉴定
- 布鲁氏菌是兼性厌氧性革兰氏阴性细菌,主要造成人和动物的流产.当布鲁氏菌引起慢性感染时,主要引起宿主生殖系统的疾病.流产布鲁氏菌2308株为光滑型,具有完整的脂多糖(LPS),由于布鲁氏菌的LPS 不像其他的革兰氏阴性细菌...
- 李亚张辉郭飞陈创夫张科桂丹温书香纪太旺张欢
- 关键词：流产布鲁氏菌基因缺失株脂多糖
- 布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析法快速检测技术的建立
- 本研究拟应用胶体金免疫层析法(GICA)研制牛布鲁氏菌病诊断试剂条,以期用于布鲁氏菌病的快速检测,尤其是基层畜牧兽医站对本病的初筛.本文拟建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法.以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26...
- 程婷婷张辉郭飞李志强桂丹刘娟陈创夫
- 关键词：动物医学布鲁氏菌病抗体检测胶体金免疫层析法
- 文献传递
- 表达ORFV F1L基因的重组山羊痘病毒的构建及初步鉴定
- 为了研制安全有效的预防羊口疮的重组山羊痘病毒活载体疫苗。本研究通过PCR技术从ORFV-shz分离株基因组中扩增目的基因F1L，将获得的基因片段与载体pUC-TK12连接，同时酶切插入LacZ筛选报告基因和Pb56双向启...
- 张倩张辉郭飞李志强桂丹刘娟王鹏雁陈创夫
- 关键词：羊口疮山羊痘病毒活载体疫苗
- 文献传递
- 布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶基因的原核表达与鉴定被引量：5
- 2013年
- 对布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)蛋白进行了表达与纯化,为研究该基因的功能提供了物质基础。首先利用PCR方法从羊种布鲁氏菌基因组DNA中PCR法扩增pgm基因,并将该基因亚克隆至pET-28a(+)载体中,转化入大肠杆菌(DE3),诱导表达融合蛋白;表达产物经Ni-NTA Agarose亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示:扩增了pgm的全基因,成功构建了布鲁氏菌pgm基因的原核表达载体pET-28a(+)-pgm,并且在大肠杆菌中进行了表达,经Western blot鉴定,该蛋白可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,且具有良好的免疫反应性。本研究为进一步研究布鲁氏菌pgm蛋白的生物学功能提供基础物质,也为进一步开发基因工程疫苗提供理论基础。
- 张豫张辉张艳陈瑞花王震桂丹孙志华陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌原核表达
- 流产布鲁氏菌2308株磷酸甘露糖变位酶pmm基因缺失株构建及鉴定
- 2014年
- 旨在构建流产布鲁氏菌2308株pmm基因缺失株。PCR扩增流产布鲁氏菌2308株pmm基因的上、下游同源臂片段,并与枯草芽孢杆菌上SacB基因片段融合。连接至自杀载体PGEM-7Zf+,构建自杀载体PGEM-7Zf+Δpmm-SacB。电转化至流产布鲁氏菌2308株感受态细胞内,通过氨苄抗性和蔗糖敏感性筛选,获得基因缺失株2308Δpmm,对其进行PCR鉴定和稳定性检测。成功构建可稳定遗传的2308Δpmm基因缺失株,并在15代内未发生回复。在此基础上可以对2308Δpmm进行深入研究。
- 李亚张辉郭飞陈创夫张科桂丹温书香纪太旺张欢
- 关键词：基因缺失株
- 羊传染性脓疱病毒F1L基因重组山羊痘病毒的构建及生物学特性研究
- 研究选择GPV作为病毒载体，构建可高效表达F1L蛋白的重组山羊痘病毒，并对其生物学特性进行初步研究。首先将F1L基因与转移载体pUC-TK12-LacZ连接;转染己接种山羊痘病毒的BHK-21细胞，通过蓝白斑筛选、纯化，...
- 张倩张辉郭飞李志强桂丹刘娟陈创夫王鹏雁
- 关键词：山羊痘病毒疫苗制备
- 文献传递
- 牛种布鲁氏菌2308株pmm基因缺失株的构建及其免疫效果的初步研究
- 以灭活的牛种布鲁氏菌2308为模板,克隆pmm基因的上下游同源臂,将上下游同源臂序列克隆到自杀载体pGEM-7Zf+上,构建成pGEM-7zf+-Δpmm;并以枯草芽孢杆菌为模板克隆Sac B基因,再将SacB基因重组到...
- 桂丹纪太旺乔军陈创夫
- 关键词：基因缺失免疫效果毒力评价
- 文献传递
- 牛种布鲁氏菌2308株pmm基因缺失株的构建及其免疫效果的初步研究
- 以灭活的牛种布鲁氏菌2308为模板,克隆pmm基因的上下游同源臂,将上下游同源臂序列克隆到自杀载体pGEM-7Zf+上,构建成pGEM-7zf+-Δpmm;并以枯草芽孢杆菌为模板克隆SacB基因,再将SacB基因重组到自...
- 桂丹纪太旺乔军陈创夫
- 关键词：毒力评价
