李惠英
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PU-579单核细胞趋化蛋白-1体外趋化经诱导分化后的小鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
- 刘举周红雨刘立斌罗丽连志云李惠英
- Micro-dystrophin基因转染C57/BL10小鼠成肌细胞的实验研究
- 目的研究micro-dystrophin基因在体外培养成肌细胞中的表达。方法pSL139质粒的转化、扩增和鉴定;C57/BL10小鼠成肌细胞的原代和传代培养,鉴定;脂质体法介导质粒pSL139转染P3代成肌细胞;转染48...
- 李惠英周红雨连志云刘立斌罗丽张伶君刘举赵代弟
- 文献传递
- 基因修饰成肌细胞移植治疗Duchenne型肌营养不良模型鼠的实验研究
- 目的研究成肌细胞携带micro-dystrophin基因移植后,在mdx鼠肌肉内的表达及对mdx鼠肌肉病变的修复和运动耐力的改善。方法C57/BL10小鼠成肌细胞的原代和传代培养及转染,将转染48小时后的成肌细胞、未转染...
- 李惠英周红雨连志云刘立斌罗丽张伶君刘举赵代弟
- 文献传递
- MICRO-DYSTROPHIN基因修饰骨髓间充质干细胞的实验研究
- 目的研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外培养、扩增及诱导分化;利用携带mi- cro-dystrophin基因的pSL139质粒转染MSCs进行基因修饰,观察micro-dy...
- 连志云周红雨李惠英刘立斌罗丽张伶君刘举赵代弟
- 文献传递
- MICRO-DYSTROPHIN基因修饰骨髓间充质干细胞治疗进行性肌营养不良的实验研究
- 目的基因修饰后的MSCs肌肉局部注射治疗进行性肌营养不良模型动物mdx小鼠,观察移植后mdx小鼠肌肉病理改变和细胞膜dystrophin蛋白表达情况;探讨基因治疗DMD的方法及可行性。方法用脂质体法介导pSL139质粒转...
- 连志云周红雨李惠英刘立斌罗丽张伶君刘举赵代弟
- 文献传递
- 抗肌萎缩蛋白微基因转染C57/BL10小鼠成肌细胞的实验研究
- 2010年
- 目的研究抗肌萎缩蛋白微基因(micro-dystrophin)体外转染成肌细胞后的表达,探讨成肌细胞移植联合基因治疗Duchenne型肌营养不良症的可行性。方法制备感受态大肠杆菌JM109,将pSL139质粒转化感受态大肠杆菌,挑取阳性克隆菌落,培养过夜后按碱裂解法提取质粒,并用PvuⅠ和ClaⅠ双酶切后琼脂糖凝胶电泳。取5～7天龄C57/BL10雄性小鼠10只,体重4～5g,采用多步酶消化与差速贴壁法行成肌细胞原代和传代培养,采用结蛋白(Des-min)免疫荧光检测鉴定。以pSL139质粒转染第3代成肌细胞为实验组,未转染为对照组。转染48h后行RT-PCR检测和细胞免疫荧光检测两组成肌细胞内micro-dystrophinmRNA和蛋白的表达,并计算转染效率。结果 pSL139质粒酶切后琼脂糖凝胶电泳40min,即观察到3.75kb的目的基因和载体部分。倒置相差显微镜观察示,培养24～48h后细胞完全贴壁,形态为三角形或菱形,大小基本一致;4～6d后细胞生长至融合,可以传代。第2代成肌细胞爬片经Desmin免疫荧光检测,多数细胞胞浆可见绿色荧光,纯度在90%以上。pSL139质粒转染成肌细胞48h后,RT-PCR检测示实验组和对照组成肌细胞cDNA在300bp左右均出现条带,且实验组条带亮度高于对照组。细胞免疫荧光检测显示实验组部分成肌细胞胞浆中有绿色荧光,micro-dystrophin阳性细胞表达效率为45%～55%,对照组成肌细胞胞浆中无绿色荧光。结论脂质体能介导pSL139质粒转染成肌细胞并在其胞浆中转录和表达。
- 李惠英周红雨
- 关键词：成肌细胞转染细胞移植小鼠
- Duchenne型肌营养不良肌肉病变机制研究被引量：4
- 2008年
- Duchenne型肌营养不良(DMD)是一种X连锁隐性遗传的致死性肌病,至今尚无有效治疗方法,尽管人类对DMD致病基因及其产物抗肌萎缩蛋白的研究已有15年之久,然而对抗肌萎缩蛋白缺失如何引起肌肉变性、坏死的具体机制至今仍不清楚,因此有必要对DMD发病机制做进一步研究。目前对DMD的发病机制主要有两种假说,一种是机械损伤假说,另一种是钙稳态失衡假说。
- 李惠英周红雨
- 关键词：DUCHENNE型肌营养不良钙稳态钙通道
