李建华
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人巨细胞病毒主要立即早期蛋白功能研究进展被引量：3
- 2006年
- 人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染在人群中广泛存在,是导致新生儿出生缺陷最主要的感染性因素和免疫低下病人的重要病原,其最先表达的主要立即早期蛋白(major immediate-early proteins,MIEPs)在HC-MV与宿主细胞的相互作用中发挥重要作用。本文对MIEPs在病毒增殖,调控宿主细胞基因表达、细胞周期和凋亡以及诱导免疫和炎症反应中的作用进行综述。
- 李建华陈利玉
- 关键词：人巨细胞病毒细胞周期凋亡免疫反应
- 结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5′NCR调控荧光素酶基因的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:分析丙型肝炎病毒(HCV)5′端非编码区(NCR)的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用。方法:以质粒pCMVN CRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5′端20nt和43nt的HCV 5′NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5′NCR,构建结构域Ⅰ缺失的HCV 5′NCR调控萤火虫荧光素酶(luc)基因表达的真核表达质粒(pCN1-d1、pCNl-d2)。以脂质体方法转染人肝癌细胞株HepG2,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对于内参考的海肾荧光素酶表达活性,同时采用RT-PCR方法检测转染后细胞中萤火虫荧光素酶基因的相对表达水平。结果:酶切和测序结果表明,各重组质粒构建成功。各重组质粒转染细胞后luc mRNA的相对表达水平与pCMVNRluc相比差异无显著性(P＞0．05);pCNl-dl、pCNl-d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无显著性(P＞0．05)。结论:HCV 5′NCR的5′端20nt和43nt序列缺失不影响它的翻译启动活性。
- 杨滔赵俊琴刘水平李洪涛李建华
- 关键词：丙型肝炎病毒荧光素酶
- 人巨细胞病毒蛋白IE1及pp65在HEL细胞中表达的时空特性被引量：1
- 2006年
- 目的 研究HCMV感染HEL细胞后，病毒蛋白IE1及pp65在不同时间点的亚细胞分布及其表达量-时效变化相关性。方法 HCMV感染HEL细胞后，吸附2h，维持培养0、2、4、6、10、22及46h后，用病毒蛋白IE1的单克隆抗体及蛋白pp65的单克隆抗体做免疫细胞化学染色，检测此两种蛋白的胞内分布；同时运用图像分析系统对此检测结果进行灰度值测定，并利用方差分析分析此测定结果。结果 IE1蛋白仅在核内检测到；表达趋势是：4～6hp．i．呈表达上升趋势，6～8hp．i．又下降。pp65首先于仅在核内被检测到，之后也分布于胞浆中。pp65表达于2～8hp．i．表达增多，8～24hp．i．呈胞内稳定表达，24-48hp．i．表达降低。结论 IE1蛋白及pp65表达的亚细胞分布具有时空特异性；两种蛋白的表达量上都表现为量-时效相关性；本研究间接反映了病毒复制增殖的连续过程。
- 傅鹰陈利玉罗敏华李建华文兰
- 关键词：HCMVPP65蛋白HEL细胞
- 综合运用社会心理方法对社区康复海洛因依赖者的干预研究
- 目的：评估通过在戒毒机构和社区层面间建立有效的“无缝连接”机制的社区社会心理综合干预方法对改善社区康复海洛因依赖者心理社会功能、降低了复吸及毒品相关问题，探索适合我国社区康复海洛因依赖者的综合康复模式。<br>...
- 谭林湘郝伟赵敏陈含晖李建华杨芳王绪轶罗涛王婧余钰
- 关键词：海洛因成瘾脱毒治疗戒毒模式社区康复
- BrdU标记的人巨细胞病毒感染HEL细胞的方法学研究
- 2006年
- 目的以标记在人巨细胞病毒(HCMV)DNA上的BrdU为示踪剂,研究病毒在受染HEL细胞中的移动过程;同时结合病毒蛋白pp65的表达探讨病毒复制、增殖的过程。方法以BrdU标记的HCMV(MOI=4)感染HEL细胞,分别选取感染后2h、4h、6h、24h及48h 5个时间点的细胞,用抗BrdU单克隆抗体,研究病毒核酸的胞内定位;同时用抗HCMV蛋白pp65的单克隆抗体检测此蛋白的表达及分布。结果免疫细胞荧光染色结果提示:在感染5个时间点,病毒DNA依次位于胞质、胞核及同时位于胞核和胞质;蛋白pp65的表达及分布规律为:胞内无表达、胞核分布、胞核与胞质同时分布及巨细胞和融合细胞内分布。结论以BrdU为标记物标记双链DNA病毒核酸不仅为研究HCMV．的胞内移动提供了良好的模型,同时也为其他病毒的研究提供了良好的工具;本实验结合HCMV蛋白pp65的表达和分布直观地反应了HCMV感染HEL细胞并在其中复制、增殖的过程。
- 傅鹰陈利玉罗敏华李建华杨滔
- 关键词：人巨细胞病毒BRDUHEL细胞PP65
- 以社区为基础、综合干预海洛因依赖者无缝连接模式研究
- 目的：评估通过在戒毒机构和社区层面间建立有效的“无缝连接”机制的社区社会心理综合干预方法对改善社区康复海洛因依赖者心理社会功能、降低了复吸及毒品相关问题，探索适合我国社区康复海洛因依赖者的综合康复模式。<br>...
- 谭林湘郝伟陈晗晖杨芳李建华赵敏王绪轶罗涛王婧余钰
- 关键词：麻醉剂中毒脱毒治疗戒毒模式医务管理
- HCMV IE1和pp65在人神经胶质瘤U_(251)细胞中的时序表达
- 2007年
- 目的:研究人神经胶质瘤U251细胞对人巨细病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的容许性,并探讨病毒蛋白IE1及pp65的时序表达特点。方法:HCMV感染U251细胞,以透射电镜观察U251细胞的形态学改变,以PCR方法检测HCMV核酸,于不同的时间点分别用抗蛋白IE1及蛋白pp65单克隆抗体进行免疫细胞化学染色,检测IE1及pp65的表达水平。结果:受染的U251细胞出现了明显的形态学改变,并用PCR方法检测到了HCMV核酸。免疫细胞化学染色表明,蛋白IE1在感染后30min～2h无表达,4h开始表达,14h达高峰,随后下降;蛋白pp65在感染后1h为入侵型pp65,4～96h一直呈低水平表达,至120h表达急剧升高。结论:U251细胞是HCMV的容许细胞,HCMV在其中的表达具有时序性,但是其时序表达较在人成纤维细胞中延迟。
- 李建华傅鹰陈利玉戴橄罗敏华杨滔
- 关键词：U251细胞PP65
- 细菌双杂交系统及其在病原微生物学中的应用被引量：3
- 2006年
- 细菌双杂交系统是一种用于体内研究蛋白质之间相互作用的有力工具。近年来,新的细菌双杂交系统被不断地开发,并被广泛地应用于病原微生物基因产物功能和致病机制研究。本文主要就细菌双杂交系统的原理与分类,在对病原微生物蛋白质之间相互作用的识别与作用域作图、基因组范围的蛋白质之间相互作用图谱的描绘、基因工程和药物的开发中的应用以及其优缺点等方面进行综述。
- 李建华陈利玉
- 关键词：功能基因组学
