傅鹰
- 作品数：23 被引量：51H指数：4
- 供职机构：浙江省台州医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金台州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血清CXCL10在子宫内膜异位症患者中低水平表达初探
- 从1885年Von Recklinghausen首次提出并命名子宫内膜异位症(内异症)至今,内异症作为"现代病",已成为生育年龄妇女的多发病、常见病。内异症是指具有生长能力及功能的子宫内膜组织出现在子宫腔以外部位者。对于...
- 傅鹰沈波余素飞孟哲峰徐巍何小帆
- 文献传递
- 肺炎链球菌对大环内酯类的耐药机制研究被引量：16
- 2012年
- 目的探讨台州医院肺炎链球菌临床分离株的耐药性及对红霉素的耐药机制,为临床用药提供依据。方法收集临床分离的肺炎链球菌31株,运用K-B纸片法及VITEK细菌鉴定仪检测其对抗菌药物的药敏谱;通过纸片法筛选对大环内酯类抗菌药物(红霉素)的耐药表型,PCR扩增红霉素耐药基因:ermB、mefA,并送测序鉴定。结果 K-B法纸片药敏结果显示,肺炎链球菌临床分离株主要对红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和四环素耐药,耐药率分别为:100.0%、64.5%、32.2%;未发现有对青霉素、万古霉素及替考拉宁耐药的菌株;31株肺炎链球菌临床分离株耐药表型均为组成型耐药;31株红霉素耐药菌株的基因均为ermB(+)/mefA(+),测序结果正确。结论台州医院肺炎链球菌临床分离株对红霉素耐药率高,erm基因介导的靶修饰作用和mef基因介导的外排泵机制的共同作用,是主要的耐药机制。
- 余素飞厉世笑傅鹰陈慧红朱海燕陈文娴张慧娜
- 关键词：肺炎链球菌大环内酯类耐药机制
- 控制院内多重耐药鲍曼不动杆菌的流行被引量：2
- 2008年
- 鲍曼不动杆菌是医院感染的重要病原菌，尤其在免疫力低下或人住重症监护病房患者，鲍曼不动杆菌的分离率逐年上升。由于自然界中鲍曼不动杆菌的广泛存在及其复杂的耐药机制，导致部分医院鲍曼不动杆菌院内感染的流行，给临床治疗带来极大困难。目前对7种具有抗假单胞菌作用的抗生素（包括青霉素类、头孢菌素、单环类抗生素、氟喹诺酮、氨基糖苷类、碳青霉烯类和粘菌素）中5种耐药者定义为多重耐药（multi-drug resistant，MDR）。
- 陈慧红戴冬玲沈波余素飞傅鹰漆爱民何小帆
- 关键词：多重耐药鲍曼不动杆菌头孢菌素类抗生素免疫力低下氨基糖苷类碳青霉烯类
- 人巨细胞病毒UL123基因全长及其外显子4的克隆与表达被引量：2
- 2006年
- 【目的】克隆人巨细胞病毒（HCMV）UL123基因cDNA全长（iel）及其外显子4（iel-exon4），构建原核表达重组质粒，诱导立即早期蛋白1（IE1）及其C-端86-491氨基酸（IE1-C86-491）表达，并鉴定表达产物。【方法】分别用RT-PCR和PCR法将iel和iel-exon 4从感染了HCMV的人胚肺成纤维细胞（HEL）中扩增出来，再分别克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端，转化大肠杆菌，经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子，在低温和低IPTG浓度下诱导重组子表达可溶性重组融合蛋白rIE1／intein2和rIE1-C86-491／intein2，用SDS-PAGE和Western Blotting对表达产物进行鉴定。【结果】经PCR、限制性酶切和测序鉴定重组质粒pTWIN1／iel和pTWIN1／iel-exon4构建成功，sDS-PAGE和Western Blotting分析表明融合蛋白在大肠杆菌中表达。【结论】成功克隆并表达了iel和iel-exon4。
- 文兰陈利玉邬国军傅鹰罗罗敏华赵俊琴
- 关键词：基因表达
- 5′-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷标记人巨细胞病毒感染SD大鼠脑组织神经元模型的建立
- 2008年
- 目的用5′-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记的人巨细胞病毒（HCMV）进行脑内定位注射，建立SD大鼠脑组织感染模型；研究大鼠脑组织海马部位神经元对HCMV的容许性及HCMV在其内的感染特点。方法运用BrdU标记HCMV基因组，并测定病毒滴度。将21只SD大鼠随机分为病毒感染组（n=18）及对照组（n=3），病毒感染组根据感染时间分为感染24、48及96h组。每个感染时间组再分为2μl及4μl两个剂量组，每个剂量组包括3只动物，均以脑内注射途径将BrdU标记的HCMV直接注入大脑海马部位；对照组大鼠注射不含病毒的细胞培养上清液（4μl）。感染大鼠术后分笼饲养，于各感染时间点处理大鼠取脑组织，冰冻切片；对海马周围部位脑组织分别运用抗BrdU及抗微管相关蛋白2（MAP-2）抗体进行免疫荧光双标染色检测标记病毒；抗pp65抗体免疫组化染色及Nissil复染检测病毒蛋白pp65。结果病毒感染后24h，两个剂量组均未在神经元内检测到标记病毒及pp65。病毒感染后48h和96h，两个剂量组在海马部位神经元中均检测到了标记病毒阳性荧光及pp65的阳性着色；而且2μl组的受感染神经元细胞数较4μl组少，但同一剂量组在48h和96h受感染神经元细胞数未见明显变化。结论成功建立了BrdU标记HCMV感染SD大鼠啮组织的模型。大鼠脑组织海马部位神经元是HCMV的半容许细胞，HCMV在其内仅表现为潜伏性感染。
- 傅鹰沈波陈利玉
- 关键词：巨细胞病毒PP65蛋白
- CXCL10基因对乳腺癌细胞株MCF-7肿瘤相关基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的构建CXCL10-pcDNA3．1（＋）重组质粒及稳定转染乳腺癌细胞系MCF-7细胞株，探讨CXCL10对MCF-7细胞株肿瘤相关基因表达的影响。方法从1干扰素（IFN-1）刺激的人外周血单个核细胞中克隆CXCL10基因，构建CXCL10-pcDNA3．1（＋）重组质粒，用CXCL10-pcDNA3．1（＋）和对照质粒pcDNA3．1（＋）分别以脂质体转染MCF-7细胞株，经G418筛选后获得稳定转染细胞株，以逆转录（RT）-PCR鉴定CXCL10基因表达，免疫印迹（WB）及ELISA鉴定CXCL10蛋白表达及分泌。以琼脂克隆形成实验分别计算实验组[转染CXCL10-pcDNA3．1（＋）的MCF-7细胞株]、对照组[pcDNA3．1（＋）的MCF-7细胞株]及未转染组（未转染的MCF-7细胞株）的细胞增殖活性；RT—PCR鉴定肿瘤相关基因基质金属蛋白酶9（MMP9）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）及信号转导和转录激活因子3（STAT3）在各细胞株中的表达。结果重组质粒CXCL10-pcDNA3．1（＋）及质粒pcDNA3．1（＋）稳定转染MCF-7细胞株构建成功；克隆形成率在实验组、对照组及未转染组分别为78．2％、79．9％及87．8％，3组间比较差异无统计学意义（χ2=3．8，P〉0．05）；实验组细胞能高效表达CXCL10mRNA，3组间比较差异有统计学意义（F=50．5，P〈0．01）；ELISA结果显示细胞培养上清液中CXCL10的表达量3组间比较，差异有统计学意义（F=54．8，P〈0．01）；MMP9基因转录水平在实验组、对照组及未转染组分别为0．067±0．003、0．103±0．007及0．085±0．026，均很低，且组间差异无统计学意义（F=4．2，P〉0．05）；VEGF在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0．183±0．003、0．787±0．019及0．789±0．011，3组间比较差异有统计学意义（F=2232，P〈0．01）；STAT3在实验组、对照组及未转染组灰度值分别为0．573±0．016、0．707±0．008及0．711±0．013，3组间比较差异有统计学意义（F=115，P〈0�
- 沈波傅鹰徐巍余素飞朱敏孟哲峰
- 关键词：乳腺肿瘤趋化因子CXCL10基因表达
- BrdU标记的人巨细胞病毒感染HEL细胞的方法学研究
- 2006年
- 目的以标记在人巨细胞病毒(HCMV)DNA上的BrdU为示踪剂,研究病毒在受染HEL细胞中的移动过程;同时结合病毒蛋白pp65的表达探讨病毒复制、增殖的过程。方法以BrdU标记的HCMV(MOI=4)感染HEL细胞,分别选取感染后2h、4h、6h、24h及48h 5个时间点的细胞,用抗BrdU单克隆抗体,研究病毒核酸的胞内定位;同时用抗HCMV蛋白pp65的单克隆抗体检测此蛋白的表达及分布。结果免疫细胞荧光染色结果提示:在感染5个时间点,病毒DNA依次位于胞质、胞核及同时位于胞核和胞质;蛋白pp65的表达及分布规律为:胞内无表达、胞核分布、胞核与胞质同时分布及巨细胞和融合细胞内分布。结论以BrdU为标记物标记双链DNA病毒核酸不仅为研究HCMV．的胞内移动提供了良好的模型,同时也为其他病毒的研究提供了良好的工具;本实验结合HCMV蛋白pp65的表达和分布直观地反应了HCMV感染HEL细胞并在其中复制、增殖的过程。
- 傅鹰陈利玉罗敏华李建华杨滔
- 关键词：人巨细胞病毒BRDUHEL细胞PP65
- 先天性CMV感染致中枢神经系统畸形发育机制被引量：9
- 2006年
- 胎儿中枢神经系统(central nervous system,CNS)是人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)先天性感染的主要靶器官。胚胎期CMV感染常常导致严重CNS畸形的发生,其前提条件是CNS中的神经前体(干)细胞、神经元及神经胶质细胞对CMV普遍易感。发育期CNS感染CMV具有以下特点:⑴神经系统细胞对CMV的容纳性在CNS的不同发育阶段有所不同;⑵受累的细胞数随着发育的进展而增多;⑶CNS不同部位的细胞对CMV的敏感性存在明显的差异;⑷感染发生时细胞所处细胞周期的时相也与感染严重程度密切相关。CMV感染能诱导宿主细胞特异性的染色体折断,影响Homeobox基因(胚胎发育的主控基因)的表达,进而阻断细胞周期(G1期滞留)、诱导细胞凋亡,导致CNS细胞数量减少与迁徙异常,最终导致C N S发育畸形。
- 傅鹰陈利玉罗敏华
- 关键词：巨细胞病毒先天性感染中枢神经系统
- 台州地区708株嗜麦芽寡养单胞菌耐药性变迁研究被引量：5
- 2008年
- 目的了解708株嗜麦芽寡养单胞菌构成比及耐药性的变迁,探讨引起耐药性变迁的危险因素、指导临床合理使用抗生素。方法对台州医院2003年至2007年嗜麦芽寡养单胞菌数据进行回顾性研究,统计分析该菌在标本来源构成比、不同科室阳性标本构成比及抗生素耐药率等方面的变迁。结果近5年来,嗜麦芽寡养单胞菌的分离率以痰标本中最高(83.6%);科室分布2003年至2005年间以脑外科及ICU最高,此后血液肿瘤内科跃居第一;该菌对抗生素的耐药性呈普遍上升趋势。结论注意空气消毒是减少嗜麦芽寡养单胞菌通过呼吸道传播的有效措施;ICU、脑外科及血液肿瘤内科仍需加强护理等措施。避免抗生素的不正当使用及外部设备的长期使用,有利于避免耐药菌的产生,有效控制院感。
- 梁鹰余素飞傅鹰
- 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌构成比耐药性变迁
- 脑膜败血黄杆菌耐药性分析及金属β内酰胺酶基因型研究
- 脑膜败血黄杆菌(Chryseobacterium meningosepticum)属于非发酵革兰阴性杆菌,常引起免疫力下降患者的各种感染。近年来,该菌的多重耐药株的不断出现引起人们的广泛重视。研究显示,脑膜炎败血黄杆菌通...
- 余素飞何小帆陈慧红傅鹰陈东钟倩怡王丹丹
- 文献传递
