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抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立被引量：5: 2014年; 目的获得抗人CA15-3单克隆抗体（mAb），建立CAl5-3双抗体夹心化学发光检测体系。方法人CAl5-3糖抗原免疫小鼠后，通过细胞融合，筛选到阳性杂交瘤细胞。杂交瘤细胞扩大培养后，纯化获得抗CAl5-3的mAb。对抗体进行纯度、效价、表位和亚型的鉴定并建立双抗体夹心检测CAl5—3化学发光体系，对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性与特异性评估。结果获得5株阳性信号较强的杂交瘤细胞（分别为#3-1-3、#5-2-2、#11-2-2、#12—1—3和#16-1-3）。其分泌的抗体效价均大于10qg／mL，轻链均为K链，重链#3—1-3为IgG2a、#5-2-2与#12-1-3为IgG2b、#11-2-2与#16—1-3为IgG3。双抗体夹心体系在（0。300）U／mL范围内线性关系良好，其准确度的回收率为97．45％；最低检测限为0．59U／mL；线性相关系数为0．9978；低高值的变异系数（cy）均小于10％；与肿瘤标志物AFP、CEA、CAS0、CAl9-9和CA72-4均不交叉。结论成功制备了抗人CAl5-3mAb，建立了双抗体夹心检测CAl5-3化学发光体系。; 曹领改蓝兴国魏德强李玉花; 关键词：肿瘤标志物单克隆抗体化学发光免疫分析

抗人CA19-9单克隆抗体的制备和鉴定及化学发光检测体系的建立被引量：3: 2014年; 目的制备抗人糖抗原19-9（CA19-9）单克隆抗体（mAb）,建立双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。方法 CA19-9免疫小鼠后,通过细胞融合技术,获得抗CA19-9的mAb。鉴定其抗体的纯度、效价、特异性和配对,建立双抗体夹心化学发光体系。在包被缓冲液、包被浓度及加样模式上优化化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性评估以及血清样本的检测。结果获得4株名称为#1-1、#2-1、#3-1和#4-1的mAb。抗体效价均大于10^-8,与CA125、CA15-3、CA72-4均无交叉反应。其中#3-1 mAb与#2-1-HRP建立的双抗体夹心体系经优化后,其检测范围为0~1 000 U/mL;最低检测限为2.0 U/mL;线性相关系数为0.9999。与罗氏试剂检测结果对比,Kappa系数大于0.75;相关系数大于0.9。结论成功制备了抗人CA19-9 mAb,建立了双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。; 蓝兴国曹领改魏德强赵洪梅李玉花; 关键词：CA19-9 单克隆抗体酶联免疫吸附分析化学发光免疫分析

乳腺癌肿瘤标志物CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及其临床应用研究: 在中国乳腺癌已成为威胁女性健康的头号杀手。早诊、早查、早干预是降低乳腺肿瘤发病率,降低死亡率的关键。最方便快速的方法就是检验血清中乳腺癌相关标志物。由于乳腺癌患者血清中CA15-3含量及阳性表达率显著高于良性组织,而且与...; 曹领改; 关键词：乳腺癌 CA15-3 单克隆抗体酶联免疫吸附分析化学发光免疫分析; 文献传递

抗人游离前列腺特异性抗原(f-PSA)单克隆抗体的制备及应用被引量：3: 2018年; 目的建立产生抗人游离前列腺特异抗原单克隆抗体(f-PSA m Ab)的细胞株,获得抗体后建立抗人f-PSA化学发光免疫分析法(CLIA)并进行应用。方法采用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗f-PSA m Ab的细胞株,将细胞株用转瓶扩大培养并将上清液采用亲和纯化法获得抗体,ELISA测定抗体效价、特异性及表位,表面等离子共振法测抗体亲和力;建立双抗体夹心CLIA,采用标准曲线定量法对该体系进行分析性能评估,同时对426例临床血清样本进行检测[其中130例的总PSA水平在(4～10) ng/mL,为"诊断灰区"],评价该试剂与罗氏试剂的检测一致性。结果获得抗人f-PSA m Ab的杂交瘤细胞株(f-10-1、f-14-1)。用f-10-1和f-14-1建立的CLIA的检测范围为(0. 1～30) ng/mL,灵敏度为0. 05 ng/mL,检测结果的相对偏差均在±5%内,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及结合态PSA(c-PSA)无交叉反应,该试剂与罗氏试剂相关系数达到0. 99,灰区样本阳性符合率、阴性符合率、总符合率均高于90%。结论成功制备了抗人f-PSA m Ab,建立了特异性定量检测人f-PSA的双抗体夹心CLIA。; 张兰兰曹领改魏德强; 关键词：单克隆抗体

DNA去甲基化机制的研究进展被引量：5: 2012年; DNA甲基化作为动植物体内一种重要的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组的稳定性等方面发挥重要的生物学作用。固有DNA甲基化水平和模式的变化会导致生物的表型异常甚至死亡。而5-甲基胞嘧啶的水平和模式是由DNA甲基化和去甲基化共同决定的。DNA去甲基化可以分为主动去甲基化与被动去甲基化,而基因组甲基化模式的形成主要依赖于主动去甲基化。本文综述了生物体内DNA主动去甲基化五种潜在机制:DNA转葡糖基酶参与的碱基切除修复途径、脱氨酶参与的碱基切除修复途径、核苷酸切除修复途径、氧化作用去甲基化与水解作用去甲基化。; 曹领改张旸蓝兴国李玉花; 关键词：碱基切除修复核苷酸切除修复

糖苷酶的筛选、组合及固定化生产稀有人参皂苷Rh2的研究: 稀有人参皂苷Rh2具有抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤侵袭转移、抗炎症和提高免疫力等药用价值。它是人参皂苷生物合成途径的中间产物，不会在人参中积累，含量较少，从而阻碍了其在医药和功能食品中的应用。本研究从人参内生真菌中克隆并表...; 曹领改; 关键词：中药化学生物合成; 文献传递

抗人妊娠相关血浆蛋白A单抗的制备、鉴定及化学发光和胶体金检测体系的建立被引量：1: 2020年; 目的:构建抗人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)单抗细胞株,成功筛选配对抗体后建立PAPP-A双抗体夹心化学发光(CLIA)及免疫胶体金(ICG)检测方法。方法:采用杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗PAPP-A单抗的细胞株,将细胞株扩大培养并亲和纯化上清液获得抗体,测定抗体纯度、效价、特异性、表位,建立双抗体夹心CLIA及胶体金体系,并对各体系进行灵敏度、特异性等分析性能评估。结果:获得抗人PAPP-A的杂交瘤细胞株(#13-2-2、#20-1-1、#21-1-1、#44-1-1和#53-2-1)。其分泌的抗体效价均大于10-8 g/ml。化学发光体系在0~10000 ng/ml范围内线性关系良好,其准确度的回收率为107.2%;灵敏度为9.56 ng/ml;线性相关系数为0.9966;低高值的变异系数(CV)均小于10%;胶体金体系灵敏度不小于50 ng/ml。两种检测方法与人甲胎蛋白(AFP)、人泌乳素(PRL)、人胎盘催乳素(hPL)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)均不存在交叉。结论:本研究成功制备了抗人PAPP-A单抗,建立了检测PAPP-A化学发光及免疫胶体金体系。该体系为PAPP-A的定量检测和产前诊断等临床应用提供了基础。; 张兰兰于洋曹领改魏德强; 关键词：化学发光法免疫胶体金

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