张兰兰 作品数:11 被引量:19 H指数:3 供职机构: 东北林业大学 更多>> 发文基金: 国家重点实验室开放基金 中央高校基本科研业务费专项资金 国家林业局科技项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 政治法律 生物学 更多>>
野鸟源H6N2亚型和H11N9亚型AIV分离株的基因特征及遗传进化分析 禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)在野生鸟类中分布广泛,特别是野生水禽被认为是禽流感病毒的天然储库,因此,野生鸟类在禽流感传播过程中具有不容忽视的作用。本研究分别将分离于黑龙江省三江国家级... 张兰兰关键词:基因特征 遗传进化分析 基因重组 文献传递 禽流感H11N9亚型病毒东方白鹳分离株的基因特征 被引量:1 2010年 根据已知禽流感病毒(AIV)的8个基因序列设计合成12对特异引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,分别成功扩增出分离于东方白鹳(Ciconia boyciana)的1株H11N9亚型禽流感病毒的全基因序列,将其分别克隆到pMD18-T载体后进行序列测定。同时将8个基因片段与GenBank发表的相应序列进行比较,绘制各基因的进化树。结果表明:所克隆到的8个片段均包含相应病毒基因的完整开放阅读框架,长度分别为2280、2274、2151、1692、1497、1413、759、838bp核苷酸,分别编码759、757、716、563、498、470、252/97、230/121个氨基酸。该毒株HA有7个潜在糖基化位点;在HA裂解位点序列为PAIASR↓GLFG,无连续的多个碱性氨基酸插入,具有典型的低致病性禽流感病毒特征。根据该毒株与参考毒株的序列比较分析结果推测,该分离株可能是不同亚型禽流感病毒通过互相基因交换所形成的基因重组体。 张兰兰 柴洪亮 曾祥伟 张进 郭亮 华育平关键词:禽流感病毒 野禽源AIV PB1-F2基因的遗传进化及部分氨基酸位点组成分析 被引量:1 2011年 在完成14株野禽源AIV PB1-F2基因克隆、测序的基础上,对其进行了同源性、遗传进化关系及氨基酸编码特征的比较分析。结果发现,H5N1亚型高致病性毒株A/lesser_kestrel/Harbin/194/2007(H5N1)PB1-F2的第37,48,50位氨基酸分别为精氨酸、脯氨酸、甘氨酸,与其他13个低致病性毒株均不相同(其分别为谷氨酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸)。为探讨这一现象,从NCBI Influenza Virus Resource中选取1 061个AIV毒株的PB1-F2基因序列进一步展开分析,结果表明:在第37,48,50位氨基酸位点上,97香港H5N1、其他H5N1及其他亚型AIV在此3个位点上氨基酸的构成存在着较为明显的差异,而且还呈现出了一定的规律和特点;并且研究还发现在此3个位点上,H9N2亚型毒株也表现出了较强的时间和空间分布特征。针对PB1-F2基因的遗传进化关系分析表明,H5N1及香港系毒株较其他AIV存在较远的遗传距离。随机的突变和重组似乎不足以解释这种差异及遗传距离形成的原因,其生物学意义有待于进一步探讨。 张进 李雁冰 柴洪亮 张兰兰 华育平关键词:遗传进化 氨基酸组成 浅析我国森林立法的现状及其完善 对国内外森林立法的历史进行了简要回顾:对我国森林立法现状及不足作了简明扼要的评析,强调了完善森林立法的重要意义.并对我国森林立法的完善提出了几点建议. 张兰兰关键词:依法治林 生态环境 文献传递 抗人游离前列腺特异性抗原(f-PSA)单克隆抗体的制备及应用 被引量:3 2018年 目的建立产生抗人游离前列腺特异抗原单克隆抗体(f-PSA m Ab)的细胞株,获得抗体后建立抗人f-PSA化学发光免疫分析法(CLIA)并进行应用。方法采用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗f-PSA m Ab的细胞株,将细胞株用转瓶扩大培养并将上清液采用亲和纯化法获得抗体,ELISA测定抗体效价、特异性及表位,表面等离子共振法测抗体亲和力;建立双抗体夹心CLIA,采用标准曲线定量法对该体系进行分析性能评估,同时对426例临床血清样本进行检测[其中130例的总PSA水平在(4~10) ng/mL,为"诊断灰区"],评价该试剂与罗氏试剂的检测一致性。结果获得抗人f-PSA m Ab的杂交瘤细胞株(f-10-1、f-14-1)。用f-10-1和f-14-1建立的CLIA的检测范围为(0. 1~30) ng/mL,灵敏度为0. 05 ng/mL,检测结果的相对偏差均在±5%内,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及结合态PSA(c-PSA)无交叉反应,该试剂与罗氏试剂相关系数达到0. 99,灰区样本阳性符合率、阴性符合率、总符合率均高于90%。结论成功制备了抗人f-PSA m Ab,建立了特异性定量检测人f-PSA的双抗体夹心CLIA。 张兰兰 曹领改 魏德强关键词:单克隆抗体 人的AKT1启动子及其mRNA的3’-UTR区域中G-四链体结构的鉴定和功能研究 富含鸟嘌呤(G-rich)的DNA和RNA能够折叠形成一种特殊的结构,G-四链体(G-quadruplex)。该结构广泛存在于人类的基因组中,能够调节包括DNA复制、端粒维持、基因表达与调控以及遗传稳定性在内的多个生物学... 张兰兰关键词:MRNA 文献传递 中国野生动物狩猎立法研究 狩猎是伴随人类进化的一种传统活动,是最原始的利用野生动物的方式。狩猎发展到今天,已作为体育和旅游项目的一种,兼具了娱乐、健身、促进经济发展等多重意义。世界上许多国家都有狩猎方面的单独立法,而我国作为世界上拥有野生动物种类... 张兰兰关键词:野生动物 文献传递 野鸭源H3N8亚型禽流感病毒NS基因的分子克隆及序列分析 被引量:5 2009年 根据GeneBank上已发表的H3N8亚型禽流感的非结构蛋白基因(NS)序列,设计了一对特异性引物,成功地从A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)中克隆到NS基因序列,该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白。与其他H3N8亚型的NS基因进行了同源性比较,核苷酸同源性为65.5%~98.3%,推导的氨基酸序列同源性为65.4%~97.8%。NS基因遗传进化树形成两个分支,该分离株处于等位基因B组。另外,此毒株NS基因在263~277位没有发生15个碱基的缺失。A/mallard/SanJiang/167/2006(H3N8)株149位为丙氨酸,其不能感染哺乳动物。 郭亮 柴洪亮 张兰兰 张进 侯志军 孙颖 魏韬 华育平关键词:野鸭 禽流感 NS基因 A/Grganey/SanJiang/160/2006(H5N2)分离株HA基因克隆及序列分析 2009年 应用RT-PCR方法,对从一只野生白眉鸭(Anasquer quedula)中分离出的禽流感病毒分离株A/Gr-ganey/SanJiang/160/2006(H5N2)的HA基因进行了序列的克隆和测定。测序结果显示,克隆的HA基因全长为1731bp,共编码565个氨基酸。核苷酸和氨基酸的最大同源性比较结果表明,该毒株的HA基因与其它31株H5N2亚型禽流感病毒HA基因的同源性为71.0%~98.2%,氨基酸序列同源性为84.0%~98.2%;遗传进化关系表明,该毒株属于欧亚群系。通过血凝素裂解位点的氨基酸序列分析可知,该毒株的HA切割位点上未见到典型的高致病力毒株H5、H7所具有的一系列碱性氨基酸,符合低致病力禽流感毒株的分子特征。 刘熠楠 李晓冰 柴洪亮 张兰兰 张进 华育平关键词:H5N2亚型 禽流感病毒 HA基因 抗人妊娠相关血浆蛋白A单抗的制备、鉴定及化学发光和胶体金检测体系的建立 被引量:1 2020年 目的:构建抗人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)单抗细胞株,成功筛选配对抗体后建立PAPP-A双抗体夹心化学发光(CLIA)及免疫胶体金(ICG)检测方法。方法:采用杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗PAPP-A单抗的细胞株,将细胞株扩大培养并亲和纯化上清液获得抗体,测定抗体纯度、效价、特异性、表位,建立双抗体夹心CLIA及胶体金体系,并对各体系进行灵敏度、特异性等分析性能评估。结果:获得抗人PAPP-A的杂交瘤细胞株(#13-2-2、#20-1-1、#21-1-1、#44-1-1和#53-2-1)。其分泌的抗体效价均大于10-8 g/ml。化学发光体系在0~10000 ng/ml范围内线性关系良好,其准确度的回收率为107.2%;灵敏度为9.56 ng/ml;线性相关系数为0.9966;低高值的变异系数(CV)均小于10%;胶体金体系灵敏度不小于50 ng/ml。两种检测方法与人甲胎蛋白(AFP)、人泌乳素(PRL)、人胎盘催乳素(hPL)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)均不存在交叉。结论:本研究成功制备了抗人PAPP-A单抗,建立了检测PAPP-A化学发光及免疫胶体金体系。该体系为PAPP-A的定量检测和产前诊断等临床应用提供了基础。 张兰兰 于洋 曹领改 魏德强关键词:化学发光法 免疫胶体金