蓝兴国
- 作品数：55 被引量：121H指数：6
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金黑龙江省发展高新技术产业专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 克服白桦自交不亲和性的试剂及用法和应用
- 本发明属涉及一种克服白桦自交不亲和性的试剂及用法和应用，本发明涉及白桦育种技术领域，该方法主要以白桦雌花序为实验材料，在含有100μM‑500μM氯化二亚苯基碘(Diphenyleneiodonium chloride，...
- 蓝兴国曹泽龙孙梦平张景雲
- 抗人CA125单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光体系的建立
- 2014年
- 目的制备抗人糖抗原125（CA125）单克隆抗体（mAb），并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA125抗原免疫小鼠，通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及纯化获得mAb，鉴定其特异性、纯度、亚型及效价，并建立双抗体夹心ELISA。分别对包被缓冲液、包被浓度和加样模式进行优化和选择后，建立化学发光免疫分析法检测体系，并对其进行评估和血样的测定。结果获得3株抗人CA125的杂交瘤细胞株（30—1—4、31—1-5、43—1-6），不与CA199、CA50、CA724交叉，效价在1：10。以上，用30-1．4和31—1—5建立的化学发光免疫分析法经优化后，检测范围为0～1000U／mL，最低检测限为0．72U／mL，与罗氏试剂检测结果的相关系数大于0．90。结论成功制备了抗人CA125mAb，建立并优化了人CA125的化学发光免疫分析法检测体系，为CA125检测及卵巢癌的诊断奠定了基础。
- 冯玥蓝兴国张晓磊李玉花
- 关键词：CA125单克隆抗体夹心ELISA化学发光免疫分析法
- 植物天冬氨酸蛋白酶的结构与功能被引量：3
- 2018年
- 天冬氨酸蛋白酶是主要的蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶的结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶的结构,典型的植物天冬氨酸蛋白酶的加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。
- 高杉蓝兴国
- 关键词：天冬氨酸蛋白酶胁迫反应
- 羽衣甘蓝泛素结合酶ubc7基因分离、原核表达及纯化被引量：2
- 2013年
- 为分离羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S13-b S13-b)泛素结合酶7(ubc7)基因,探讨Ubc7重组蛋白的原核表达及纯化。利用CTAB的方法提取羽衣甘蓝柱头总RNA,通过RT-PCR的方法分离ubc7基因,将编码ubc7基因的cDNA序列亚克隆到pET-14b原核表达载体中,将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达,并通过Ni2+-NTA树脂进行亲和层析的方法纯化重组蛋白。结果表明,获得的Boubc7含有一个长度为501 bp的开放读码框,编码一个含有166个氨基酸残基的蛋白质。预测BoUbc7的相对分子质量约为18.7 kDa,理论等电点(pI)为5.35。利用IPTG诱导的细菌蛋白中,SDS-PAGE显示出在分子量大小23 kDa处有蛋白特异性的表达,这与预测的His6融合的BoUbc7蛋白分子量相符;利用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析纯化后,成功获得了BoUbc7融合蛋白。该试验分离了羽衣甘蓝ubc7基因,并通过原核表达系统获得了BoUbc7重组蛋白,为进一步分析其生物学功能奠定了基础。
- 蓝兴国李晓屿杨佳王艳红李玉花
- 关键词：羽衣甘蓝泛素结合酶原核表达
- 单克隆抗体在植物研究中的应用
- 2013年
- 单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具。随着分子生物学的发展,单克隆抗体在植物研究中发挥着越来越重要的作用。本文综述了单克隆抗体在蛋白表达、蛋白定位、蛋白相互作用、植物成分的定性与定量、植物成分纯化、植物病害检测、标签抗体等方面研究中的应用。
- 李晓屿李玉花蓝兴国
- 关键词：植物单克隆抗体蛋白表达蛋白定位蛋白质相互作用
- 内源小RNAs的生物合成及其在植物发育中的作用
- 2012年
- 在真核生物中,具有20-30个核苷酸的小RNAs能够在DNA或RNA水平上广泛调控复杂生理进程。介绍植物中3种主要内源小RNAs:microRNAs、trans-acting siRNAs和heterochromatic siRNAs的生物合成及其在植物发育中的作用。
- 刘震西蓝兴国康瑞霞李玉花
- 关键词：MICRORNASSIRNAS植物发育
- 一种克服白桦自交不亲和性的试剂及用法和应用
- 本发明属涉及一种克服白桦自交不亲和性的试剂及用法和应用，本发明涉及白桦育种技术领域，该方法将实验材料白桦雌花放在含有100μM‑1000μM N‑乙酰‑L‑半胱氨酸(N‑acetyl‑L‑cysteine，NAC；植物活...
- 蓝兴国曹泽龙
- 羽衣甘蓝ARC1蛋白的原核表达、纯化及泛素连接酶活性分析被引量：3
- 2013年
- ARC1是植物特有的一类含有U-box/ARM结构域的蛋白,在芸薹属植物自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号转导中起着正向调控因子的作用。将羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)BoARC1编码区的序列连接到原核表达载体pET-14b上,通过酶切鉴定和测序分析,构建pET-14bBoARC1表达质粒;将获得的阳性表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示,在分子量69 kD处有BoARC1蛋白特异性地诱导表达;利用Ni2+-NTA树脂通过亲和层析的方法获得BoARC1融合蛋白。在泛素激活酶(E1)、泛素结合酶UBC7(E2)和泛素体外泛素化反应后,通过免疫印迹的方法检测,显示出BoARC1融合蛋白能够将底物进行多泛素化修饰;当U-box中保守位点第323位Pro突变为Ala或其他泛素化组分缺少时,底物不能被泛素化修饰。
- 蓝兴国李晓屿杨佳李玉花
- 关键词：羽衣甘蓝自交不亲和性原核表达泛素连接酶
- 羽衣甘蓝不同组织及柱头发育实时荧光定量PCR内参基因的筛选被引量：10
- 2016年
- 以羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)S_(13-b)S_(13-b)自交不亲和系为试材,利用实时荧光定量PCR(qRTPCR)技术检测Actin、Cpi6、EF-1β、GAPDH、Tub-α3、Tub-α6、Ubc7候选内参基因在不同组织和5个不同发育时期柱头的表达情况,并运用ge Norm和Best Keeper软件统计分析候选内参基因的表达稳定性。在不同组织中,ge Norm软件统计分析的结果表明Tub-α6和EF-1β的表达较稳定;Best Keeper软件统计分析的结果表明Ubc7和Tub-α6的表达较稳定。在不同发育柱头中,ge Norm软件统计分析的结果表明Actin和Ubc7的表达较稳定;Best Keeper软件统计分析的结果表明EF-1β和Tub-α6的表达较稳定。以筛选到的内参基因Tub-α6和Actin,分别分析羽衣甘蓝柱头S-位点糖蛋白基因(SLG)在不同组织和不同发育时期柱头的表达水平,结果显示出SLG主要在柱头中表达,而且SLG在柱头发育成熟时期表达量达到最高。
- 李晗李治龙李晓屿李玉花蓝兴国
- 关键词：羽衣甘蓝实时荧光定量PCR内参基因SLG
- 羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S13b单倍型的鉴定
- 采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝“赤兔”和“白波”栽培品种的自交后代中,经过三年的自交选育得到一个自交不亲和系4.1.1和一个自交亲和系3.2.3。我们针对于芸苔属植物中F1代杂交种的生产及其对自交...
- 蓝兴国谢莉楠于晓敏李玉花
- 关键词：羽衣甘蓝选育技术基因测序
