张蕾
- 作品数：16 被引量：23H指数：3
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队“十一五”科技攻关课题国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 抗羊布鲁菌OMP22蛋白的单克隆抗体的制备
- 目的：表达并纯化羊布鲁菌OMP22蛋白,制备其单克隆抗体(mAb).方法：采用GST亲和层析纯化的方法纯化OMP22蛋白.用灭活的羊布鲁菌M5株免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,用纯化的OMP22蛋白EL...
- 张蕾张亮李璞媛李凯于澜吴兴安张芳琳徐志凯
- 汉坦病毒感染早期IRF-7及RANTES表达的影响
- 2012年
- 目的检测汉坦病毒感染人淋巴细胞后人正常T细胞表达分泌调节活化因子(RNATES)和干扰素调节因子-7(IFR-7)表达情况,并为深入探讨可能其致病机制奠定基础。方法本研究用汉滩病毒感染人淋巴细胞系LLC,取感染后不同时间点的细胞提取总RNA,半定量RT-PCR检测感染细胞中IFR-7及RANTES mRNA的变化情况。结果在汉滩病毒感染人淋巴细胞早期,可诱导IRF-7和RNATES基因的转录,并随着感染时间的延长表达持续上调。结论汉坦病毒可以感染人淋巴细胞,并在感染早期持续上调RNATES和IRF-7表达,对深入研究汉坦病毒的致病机制有重要意义,也为寻找HFRS的治疗药物靶位奠定基础。
- 白文涛于澜张亮刘勇张蕾闫岩吴兴安徐志凯张芳琳
- 关键词：汉滩病毒RANTESRT-PCR
- 几种布鲁菌抗原的免疫学特性研究
- 布鲁菌/(Brucella/)是布鲁菌病/(Brucellosis/)的病原体。现已发现布鲁菌有7个生物种:羊布鲁菌/(B.melitensis/)、牛布鲁菌/(B.abortus/)、猪布鲁菌/(B. suis/)、犬...
- 张蕾
- 关键词：布鲁菌外膜蛋白重组DNA细胞免疫免疫学特性
- 文献传递
- HSV-1 gC糖蛋白真核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建单纯疱疹病毒1型(HSV-1)囊膜糖蛋白C(gC)哺乳动物表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,实现其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达。方法:利用基因重组技术构建同时克隆有gC-1基因和中国仓鼠二氢叶酸还原(DHFR-L22R)基因的真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R,按LipofectamineTM2000说明书转染野生型CHO-K1细胞,在G418和氨甲喋呤(MTX)双筛选压力下筛选稳定表达细胞株,Slot blot方法测定重组蛋白的表达,并用His-Ni琼脂糖填料进行目的蛋白纯化,纯化后West-ern blot检测。结果:成功构建了真核表达载体pCI-mCMV-gC-1-IRES-DHFR-L22R。经过两轮筛选获得稳定表达HSV-1型gC基因的细胞系,Western blot成功检测到目的蛋白。结论:HSV-1 gC在CHO-K1细胞中成功表达,并具有良好的特异性结合活性,为进一步的实验研究和临床应用提供了基础。
- 党引利阎岩张晓晓李璞媛于澜张蕾张芳琳徐志凯吴兴安
- 关键词：HSVGCDHFR真核表达CHO
- 军校大学新生和毕业生心理健康状况评估被引量：5
- 2010年
- 目的比较军校新生与毕业生的心理健康状况,为准确评估大学生的心理健康水平提供科学的理论依据。方法使用DXC-6型多项群体心理测评仪,对某军校803名新生和663名毕业生进行数字搜索测验和卡特尔16种个性因素测验。结果 1新生与毕业生能力测验结果比较发现,毕业生结果较好(得分≥9分者占11.6%),新生结果较差(得分≥9分者占2.6%);2新生与毕业生16PF的大部分因子存在显著差异,其中新生在C(7.4±1.7/5.9±1.8)、E(7.0±1.6/6.6±1.6)、G(6.6±1.7/5.4±1.6)、Y1(7.4±1.6/6.1±1.5)等因子得分显著高于毕业生,L(3.0±1.7/3.8±1.7)、O(3.5±1.6/4.5±1.6)、Q4(4.4±1.6/5.7±1.7)、X1(3.5±1.5/4.8±1.4)等因子得分显著低于毕业生(P<0.05或P<0.01)。结论动机导致新生和毕业生在心理健康水平方面都存在着一定差异。
- 史波唐国春张蕾王涛王骞胡文东
- 关键词：军校大学生
- 人整合素β_3亚基毕赤酵母表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目前研究表明整合素β3亚基是多种病毒的细胞表面受体,然而整合素β3亚基与不同病毒受体结合蛋白VAP相互作用的分子机制还不完全清楚。为此,设计引物,采用RT-PCR方法扩增人β3亚基包膜外区约2.1kb片段,克隆入毕赤酵母表达载体pPIC3.5K中。双酶切鉴定挑取阳性克隆pPIC3.5K-β3,测序证实目的基因序列正确。将pPIC3.5K-β3转化毕赤酵母工程菌GS115,在浓度为3.0mg/mL的G418选择培养基上,筛选出含有多拷贝目的基因的阳性菌株,PCR可扩增出约2.1kb的目的条带。阳性菌株经1%甲醇诱导表达,Western-blot可在酵母菌体中检测到约80kDa的目的蛋白条带。上述结果表明,成功构建了人整合素β3亚基毕赤酵母表达载体,筛选获得多拷贝阳性菌株并成功表达,为进一步研究人整合素β3在病毒感染中的作用及其单克隆抗体的制备奠定基础。
- 牛舜张芳琳李璞媛胡刚刘艳丽吴兴安张蕾白文涛
- 关键词：整合素
- 数字搜索能力测验与卡特尔16种个性因素测验的相关研究被引量：5
- 2010年
- 目的研究如何准确鉴定军校毕业生的心理健康水平。方法使用DXC-6型多项群体心理测评仪,对某军校663名应届本科毕业生进行数字搜索测验和卡特尔16种个性因素测验(16PF)。结果毕业生数字搜索测验结果呈负偏态分布,且该测验得分与人格特质中B(r=0.17)、C(r=0.11)、G(r=0.10)、Y1(r=0.09)、Y2(r=0.13)、Y4(r=0.15)因子显著正相关,与L(r=-0.10)、Q4(r=-0.08)、X1(r=-0.11)因子呈显著负相关(P<0.05);16PF答题时间受到个性的影响,其中C(r=-0.16)、N(r=0.10)、O(r=0.13)、Q1(r=-0.12)因子对答题时间影响最大(P<0.01);对数字搜索测验结果进行分组,低分组16PF答题时间比高分组长。结论对军校毕业生进行心理鉴定时加入数字搜索测验可提高准确率。
- 张蕾胡文东罗二平耿艳马进
- 羊布鲁菌BCSP31蛋白表达纯化及其单克隆抗体的制备
- 2009年
- 目的:表达并纯化羊布鲁菌BCSP31蛋白,制备其单克隆抗体(mAb).方法:采用GST亲和层析纯化的方法纯化BCSP31蛋白.用纯化的BCSP31蛋白免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,ELISA间接法筛选阳性克隆,3次克隆化后建立杂交瘤细胞系.采用小鼠腹腔接种杂交瘤细胞制备腹水,正辛酸-硫酸铵法纯化mAb.采用Western Blot和ELISA等方法鉴定mAb特性.结果:GST-BCSP31融合蛋白在25℃诱导时为可溶性表达,经亲和层析纯化,获得BCSP31纯化蛋白0.5 g/L;Western Blot检测结果显示所获蛋白可与兔抗布鲁菌阳性血清特异性反应.获得2株mAb,分别命名为1F1,1E5.结论:BCSP31蛋白的纯化及其mAb的制备为布鲁菌病的诊断与防治奠定了一定的物质基础.
- 张蕾白文涛张芳琳吴兴安史梦远王海涛徐志凯
- 关键词：蛋白纯化单克隆抗体
- 含汉滩病毒囊膜糖蛋白的重组假病毒免疫小鼠可诱导产生免疫保护作用
- 汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)主要引起肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS),其囊膜糖蛋白(GP)可刺激机体产生中和抗体,对感染动物和人体...
- 于澜张亮张蕾王芳刘梓谕张芳琳徐志凯
- 羊布鲁菌外膜蛋白omp2b的克隆,原核表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 研究羊布鲁菌外膜蛋白omp2b基因的克隆,原核表达,以及纯化。根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白omp2b蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为1 130 bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-omp2b。在大肠埃希菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化。用Western-blot分析方法鉴定纯化蛋白。结果成功构建了pGEX-4T-1-omp2b原核表达载体并在大肠埃希菌中表达了omp2b基因,纯化后所获得的蛋白与目的蛋白大小一致且与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应,说明其为布鲁菌omp2b蛋白。本研究成功构建了pGEX-4T-1-omp2b原核表达载体,并且在大肠埃希菌中进行表达,纯化的omp2b蛋白具有良好的免疫原性。
- 张蕾张亮于澜白文涛应旗康李凯程林峰叶伟吴兴安徐志凯张芳琳
- 关键词：克隆纯化
