张玉伟
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：中国综合性艾滋病研究项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 塞姆利基森林病毒翻译增强序列对HIV Gag DNA疫苗抗原表达和免疫原性的调节被引量：2
- 2005年
- 目的研究塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)衣壳蛋白5′翻译增强区对基于该病毒复制子的HIVGagDNA疫苗抗原表达水平和免疫原性的影响。方法将SFV衣壳蛋白(capsid,C蛋白)基因的5′端102bp翻译增强区插入到SFV复制子DNA疫苗载体pCMVRep的SFV亚基因启动子下游,得到DNA疫苗载体pCMVRepC。将删除ATG的HIV1gag基因插入pCMVRepC,使gag编码区与翻译增强区融合,得到DNA疫苗质粒pCMVRepCgag。同时,构建携带未融合翻译增强序列的DNA疫苗质粒pCMVRepgag。Westernblot检测翻译增强序列对Gag表达水平的影响。用上述两种DNA疫苗分别免疫BALBc雌性小鼠,ELISA检测Gag特异的抗体反应,ELISPOT和细胞内因子染色技术检测细胞免疫应答。结果衣壳蛋白5′翻译增强区增强了Gag表达水平,对体液免疫应答没有显著影响,但显著增强了特异性细胞免疫应答水平。结论SFVC蛋白翻译增强区能显著提高SFV复制子DNA疫苗的抗原表达和抗原特异性细胞免疫反应。
- 张玉伟周克民李鼎锋李海山范文玲徐建青孙茂盛刘勇邵一鸣
- 关键词：DNA疫苗抗原表达免疫原性GAG特异性细胞免疫应答翻译
- 体内电穿孔对报告基因表达和HIV Gag DNA疫苗诱导的免疫反应的影响被引量：5
- 2006年
- 目的研究体内电穿孔递送途径在小鼠模型中对于报告基因表达水平及HIV Gag DNA疫苗所诱导的免疫反应的影响。方法构建荧光素酶(luciferase)表达质粒p1．0-luc,将其通过直接肌肉注射、肌注后以双针电极进行电穿孔、肌注后以钳式电极进行电穿孔等3种不同方法注射小鼠,72h后取注射部位的肌肉测定luciferase的表达情况。同时构建携带密码子优化的HIV-1B′/C重组亚型CN54株gag基因的DNA疫苗质粒p1．0-gag,在10μg、100μg两个剂量水平上通过以上3种不同的方法免疫BALB/c雌性小鼠,ELISA方法检测Gag特异的抗体反应,ELISPOT方法和细胞内因子染色(jntracellular cytokine staining,ICS)技术检测细胞免疫应答。结果通过体内电穿孔可以使luciferase在小鼠肌肉中的表达水平显著提高,最大提高幅度达到66倍。Gag DNA疫苗免疫结果显示,电穿孔可以显著提高Gag特异的体液免疫应答,其中使用双针电极的效果要显著好于钳式电极,前者所诱导的抗体滴度比不使用电穿孔组提高可达28倍。但体内电穿孔对于Gag特异的细胞免疫应答并没有显著影响。结论体内电穿孔(尤其是使用双针电极)可以大幅度提高报告基因在体内的表达水平和DNA疫苗诱导的抗原特异性体液免疫应答。
- 李鼎锋张玉伟李海山范文玲孙茂盛刘勇邵一鸣
- 关键词：DNA疫苗基因表达
- 表达具有免疫激活功能的发夹RNA的DNA疫苗载体及其用途
- 本发明公开了一种用于提高DNA疫苗免疫原性的表达载体，该载体包含可操纵地连接于启动子的编码具有免疫激活功能的发夹RNA(hairpin RNA)的DNA序列。本发明还公开了一种重组质粒，其包含上述表达载体和编码抗原的外源...
- 邵一鸣李鼎锋刘勇张玉伟
- 文献传递
- 表达具有免疫激活功能的单链RNA的DNA疫苗载体及其用途
- 本发明公开了一种用于提高DNA疫苗免疫原性的表达载体，该载体包含可操纵地连接于启动子的编码具有免疫激活功能的单链RNA(ssRNA)的DNA序列。本发明还公开了一种重组质粒，其包含上述表达载体和插入所述表达载体中的编码抗...
- 邵一鸣张玉伟李鼎锋刘勇
- 文献传递
- 表达具有免疫激活功能的单链RNA的DNA疫苗载体及其用途
- 本发明公开了一种用于提高DNA疫苗免疫原性的表达载体，该载体包含可操纵地连接于启动子的编码具有免疫激活功能的单链RNA(ssRNA)的DNA序列。本发明还公开了一种重组质粒，其包含上述表达载体和插入所述表达载体中的编码抗...
- 邵一鸣张玉伟李鼎锋刘勇
- 文献传递
