张晓梅
- 作品数：30 被引量：211H指数：8
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- 含甘油脱水酶激活因子编码基因的产1,3-丙二醇新型重组菌的构建被引量：4
- 2007年
- 利用PCR技术扩增来源于弗氏柠檬杆菌(Citrobacter freundii)的甘油脱水酶编码基因dhaB以及甘油脱水酶激活因子编码基因dhaGdhaF,将其与1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的编码基因yqhD串联在温控表达载体pHsh上,构建重组菌E.coliJM109(pHsh-dhaB-dhaG-dhaF-yqhD)。SDS-PAGE分析显示,融合表达产物的分子量同核酸序列测定的推导值相符。与未串联甘油脱水酶激活因子编码基因的重组菌E.coliJM109(pHsh-dhaB-yqhD)相比,1,3-丙二醇的产量提高了28%。
- 张晓梅诸葛健
- 关键词：重组大肠杆菌1,3-丙二醇
- 大豆降胆固醇活性肽的初步分离纯化被引量：30
- 2006年
- 研究了大豆降胆固醇活性肽的初步分离纯化,用Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白得到的酶水解物经过大孔吸附树脂脱盐,并用不同浓度的乙醇以疏水性大小洗脱,得出浓度为75%的乙醇洗脱物具有最高的降胆固醇活性,将此洗脱物再经过SephadexG15凝胶过滤色谱进行分子量分级,得到了部分纯化的大豆降胆固醇肽,其最高降胆固醇活性肽是分子量大多在1000以下的小肽,抑制率为81.26%。
- 张晓梅钟芳麻建国
- 关键词：大豆蛋白活性肽
- 固定化重组大肠杆菌产1,3-丙二醇发酵条件的研究被引量：3
- 2007年
- 利用海藻酸钙将重组大肠杆菌JM109(pHsh-dhaB-dhaG-dhaF-yqhD)固定化,并对影响重组菌固定化细胞发酵的营养因子进行研究。实验结果表明,该重组菌固定化细胞发酵的适宜培养基组成为:甘油80 g/L、酵母膏5.0 g/L、VB120.05 g/L以及KH2PO47.5 g/L;在此培养条件下,1,3-丙二醇产量、转化率及生产能力分别可达61.5 g/L、76.8%和2.57 g(L.h),与游离细胞相比,重组菌固定化细胞对底物甘油和产物1,3-丙二醇的耐受力明显提高,且1,3-丙二醇产量明显提高。
- 张晓梅诸葛健
- 关键词：1,3-丙二醇固定化细胞重组大肠杆菌
- Gibberella intermedia WX12产特异性糖苷酶的发酵工艺优化被引量：3
- 2016年
- 赤霉菌(Gibberella intermedia WX12)糖苷酶能将黄姜薯蓣皂苷转化为薯蓣皂苷元。先后采用单因素实验和正交实验对G.intermedia WX12发酵产糖苷酶的培养基组分和发酵工艺进行了优化。确定最佳发酵工艺条件为:葡萄糖5 g/L,酵母粉25 g/L,NaCl 1.16 g/L,KH_2PO42.72 g/L,MgSO_20.3 g/L,培养基初始pH 6.0,接种量为体积分数8%。G.intermedia WX12在上述条件下,于220 r/min、30℃摇床培养96 h,糖苷酶活性达到28.1 U/m L,较优化前提高4倍。在此基础上利用粗酶液对黄姜薯蓣皂苷进行转化,50℃条件下转化12 h后,薯蓣皂苷元转化率可达到60%。
- 杨南南李会吴燕张晓梅许正宏史劲松
- 关键词：薯蓣皂苷元糖苷酶赤霉菌
- 具有ACE抑制活性的大豆肽的RP-HPLC分离和结构鉴定被引量：20
- 2006年
- 在优化RP-HPLC洗脱条件的基础上,对经大孔吸附树脂DA201-C、凝胶过滤色谱Sephadex G-15分离得到的ACE抑制活性大豆肽组分进行进一步的纯化。在分离得到的11个组分中,峰9的ACE抑制活性最高,在0.2mg/mL的浓度下,其ACE抑制率达到96.92%。分析型RP-HPLC纯化组分9得到三个组分,其中组分9-Ⅰ具有最高的ACE抑制活性,为98.46%,其含量约占组分9的50%以上。经过LC-MS序列分析,降血压组分9-Ⅰ的分子质量为772.4,有三种可能的结构VISTGAEP、VLSTGAEP和ANSAGTVGP。
- 钟芳张晓梅麻建国
- 关键词：大豆蛋白ACE抑制活性分离纯化
- 融合蛋白GGHN端延长类似物的克隆表达、纯化及活性研究被引量：1
- 2013年
- GGH是人胰高血糖素样肽-1与人血清白蛋白融合蛋白(GLP-1A2G)2-HSA的简称,为研究N端添加丙氨酸的修饰对其活性的影响,通过基因工程方法成功构建表达该类似物的工程菌,并纯化得到终产物,完成了初步体外活性检测。首先运用PCR技术扩增出融合蛋白GGH类似物的基因片段,以pPIC9K为表达质粒构建了重组表达质粒,将双酶切和测序验证正确的重组质粒电转至分泌型菌株毕赤酵母GS115,然后经过MD平板筛选获得转化子,利用甲醇诱导表达72 h,SDS-PAGE检测上清产物与未修饰的GGH对比,得到阳性转化子。融合蛋白经过发酵液8 000 r/min离心10 min,0.45μm的微孔滤膜微滤,采用截留分子量为10 kD的超滤膜超滤20倍,再依次经过Blue Sepharose 6 Fast Flow、Phenyl Sepharose Fast Flow、Q Sepharose Fast Flow、Sephadex G-25层析柱。在RINm5f细胞上测cAMP的生成,通过与阳性对照的标准曲线对比发现,A-GGH活性比GGH提高10倍,表现出较好的体外活性。
- 冯均尚窦文芳张晓梅许泓瑜史劲松许正宏
- 关键词：类似物毕赤酵母纯化活性
- 编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与高效表达被引量：7
- 2006年
- 利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16 kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到温控表达载体pHsh,得到重组载体pHsh-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达。SDS-PAGE分析显示:融合表达产物的相对分子质量均为43 000,同核酸序列测定所推导的值相符。对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:42℃诱导4 h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到100 IU/mg,而对照菌株的酶活力仅为0.5IU/mg。
- 张晓梅唐雪明诸葛斌沈微饶志明方慧英诸葛健
- 关键词：克隆基因
- 乙醇提取樟芝菌粉三萜类化合物的动力学研究被引量：13
- 2009年
- 以Fick扩散第二定律为基础,建立樟芝菌粉三萜提取过程的动力学方程,并由此推算出提取的速率常数、活化能、相对萃余率、半衰期,以及内扩散系数等动力学函数值。结果表明:所得提取模型能较好地描述樟芝菌粉三萜类化合物提取的动态过程。樟芝菌粉三萜类化合物提取过程的动力学符合一级动力学方程,为内扩散控制动力学。本研究可为樟芝三萜类化合物提取的工艺设计及操作条件的选择提供有价值的理论依据。
- 陆震鸣陶文沂许泓瑜敖宗华张晓梅许正宏
- 关键词：樟芝液体发酵三萜动力学
- 高压均质法提取云芝胞内糖肽被引量：3
- 2017年
- 采用高压均质法提取云芝(Coriolus versicolor)胞内糖肽,与热水法进行比较。结果表明:高压均质提取的云芝胞内糖肽得率是热水提取的2倍,为(20.2±0.6)%;采用高压均质法提取的组分5相对百分含量最高,为48.07%;扫描电镜下观察发现,与热水提取相比,高压均质提取时云芝菌丝体破碎程度比较高。
- 陈露陆震鸣龚劲松耿燕徐国华张晓梅史劲松许正宏
- 关键词：云芝糖肽高压均质热水提取高效液相色谱
- 原生质体诱变提高亚麻刺盘孢ST对底物DHEA的耐受性和转化率被引量：1
- 2014年
- 采用原生质体诱变技术选育出一株耐高浓度底物去氢表雄酮(DHEA)的高产亚麻刺盘孢菌株(Colletotrichum lini)ST-0317,并研究了其转化特性。以C.lini ST为出发菌株,考察了其原生质体制备与再生的最适条件,随后对其原生质体进行等离子诱变,最终选育得到优势突变株ST-0317。该菌株在底物耐受性提高的同时也具有良好的遗传稳定性,在DHEA投料浓度高达10g/L的条件下,产物7α,15α-diOH-DHEA摩尔得率可达36.9%,比出发菌株提高了50%。
- 李恒吴燕魏利莎李会张晓梅史劲松许正宏
- 关键词：原生质体去氢表雄酮
