张佩
- 作品数：23 被引量：114H指数：6
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- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科学技术计划项目辽宁省教育科学规划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学电气工程更多>>
- 小干扰RNA表达质粒沉默DNp73对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响
- 目的：探讨靶向DNp73的小干扰RNA表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对其增殖和凋亡活性的影响。方法：构建DNp73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231；倒置荧光显微镜下观察转染细...
- 卢颖王阳张佩
- 关键词：MDA-MB-231基因沉默乳腺癌
- 盘锦地区急性呼吸道感染患儿人偏肺病毒的检测被引量：1
- 2013年
- 目的了解盘锦地区急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)住院儿童人偏肺病毒(humanmetapneumovirus,hMPV)的感染情况。方法采用套式PCR方法对盘锦市三家医院(辽宁省盘锦市辽河油田总医院、盘锦市妇婴医院、盘锦市第一医院)儿科因ALRTI入院的276名儿童鼻咽抽吸物进行检测。同时采用普通PCR方法检测冠状病毒NL63(human coronavirus NL63,HCoV-NL63)、鼻病毒(human rhinovirus,HRV),呼吸道合胞体病毒(respiratory syncytialvirus,RSV)的感染情况,明确有无协同混合感染。结果 276份样本中检测出hMPV阳性49份,阳性率为17.8%。hMPV阳性样本中检测到人HRV-C组病毒2份,RSV病毒9份,无HCoV-NL63病毒感染。遗传进化分析表明盘锦地区hMPV以A2亚型为优势株。结论 hMPV是盘锦地区急性下呼吸道感染入院儿童的重要呼吸道病毒病原之一。
- 吕晴孟庆学赵莉张新张佩
- 关键词：人偏肺病毒急性下呼吸道感染套式PCR
- 小干扰 RNA 表达质粒沉默△Np73 对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨靶向△Np73的小干扰RNA表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231对其增殖和凋亡活性的影响。方法:构建△Np73小干扰表达质粒,脂质体法转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231;荧光显微镜下观察转染细胞绿色荧光蛋白表达,计算转染效率;实时荧光定量PCR检测细胞转染质粒后△Np73和TAp73 mRNA的表达;共转染pcDNA3-HA/DNp73α表达质粒与△Np73小干扰质粒,Western blot检测细胞转染后△Np73和TAp73表达;CCK-8法检测转染质粒后细胞生长抑制率;caspase 3活性分光光度法检测转染质粒并应用阿霉素处理后细胞的凋亡水平。结果:成功构建并转染△Np73小干扰表达质粒,转染效率达60%。△Np73小干扰质粒转染细胞能有效抑制内源性△Np73 mRNA和外源性△Np73蛋白表达,对TAp73无显著抑制作用。经△Np73质粒干扰的细胞增殖活性显著下降,与空白对照组相比差异显著,阿霉素诱导△Np73质粒转染细胞凋亡水平增加,与阴性对照组相比有显著差异。结论:△Np73小干扰RNA表达质粒能显著降低MDA-MB-231细胞中△Np73 mRNA及蛋白的表达,抑制细胞生长增殖,增强其被阿霉素诱导的凋亡水平,表明靶向沉默△Np73可能为未来人乳腺癌的治疗提供了一个新的策略。
- 卢颖王阳段思王爽朱辰杰李淑华张佩
- 关键词：MDA-MB-231基因沉默乳腺癌
- 案例教学法在医学微生物学教学中的运用被引量：17
- 2010年
- 在医学微生物学教学中采用案例教学法,重点在于设计合理的案例,提出合适的问题以及对问题进行的讨论。该教学方法激发了学生的学习兴趣,也调动了教师的创造性思维,有利于培养学生分析问题和解决问题的能力。
- 张佩卢颖吴学敏
- 关键词：案例教学法医学微生物学教学
- 霍乱毒素B亚单位对树突状细胞成熟的影响被引量：3
- 2010年
- 背景:已有实验证明,霍乱毒素可诱导树突状细胞成熟。霍乱毒素B为霍乱毒素的无毒亚单位,是一种良好的免疫佐剂和输送抗原载体,其是否能促进树突状细胞成熟至今尚未得到证实。目的:观察树突状细胞2.4的表型和功能变化,初步探讨霍乱毒素B对树突状细胞成熟的影响。方法:通过细胞培养增殖树突状细胞2.4。将树突状细胞分成5组:空白对照组:不进行任何处理;霍乱毒素B0.1,1.0,10mg/L组:分别在培养液中加入相应霍乱毒素B;阳性对照组:培养液中加入脂多糖,终浓度1mg/L。每组设6复孔。采用流式细胞术检测培养不同时间树突状细胞2.4细胞表面CD80,CD86,MHC-Ⅱ类分子的表达,并行体外混合淋巴细胞反应,MTT法观察树突状细胞对同种T细胞的刺激能力。结果与结论:10mg/L霍乱毒素B显著增强树突状细胞表面分子(CD80,CD86和MHC-Ⅱ)的表达(P<0.01),并显著提高树突状细胞对T细胞的激活能力(P<0.01)。阳性对照组与空白组之间差异有显著性意义(P<0.01)。结果显示霍乱毒素B能增强树突状细胞的活化与成熟,对其免疫学功能起正性调节作用。
- 郭路生张佩伦恒忠严晓芳
- 关键词：脂多糖树突状细胞
- 重组质粒pcDNA-HA/ΔNp73α转染对人树突状细胞功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究转染pcDNA-HA/ΔNp73α重组质粒对树突状细胞(DC)功能的影响。方法采取健康人脐带血,分离单个核细胞,置入含有白介素4(IL-4)和粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)的RPMI 1640完全培养基中培养。在培养第5、7天时收获DC细胞,加入FITC-anti-CD1a、PE-anti-CD83抗体,采用流式细胞仪检测CD1a、CD83表达情况。将DC分为正常培养至成熟的DC组(空白对照组)、空载体pcDNA-HA转染的DC组(阴性对照组)、ΔNp73α重组质粒转染的DC组(实验组)。分别在转染24、48、72 h后采用荧光显微镜检测转染效率;转染48 h后收获并提取细胞总RNA,采用RT-PCR检测转染后各组ΔNp73αmRNA表达情况;采用Western blotting检测转染DC的ΔNp73α蛋白表达水平;在收获的各组DC细胞中分别加入PE-anti-主要组织相容性复合体(MHC-Ⅱ)、FITC-anti-CD40、PE-anti-CD80单克隆抗体,流式细胞仪检测CD40、CD80、MHC-Ⅱ表达情况;ELISA检测各组DC细胞白介素12(IL-12)分泌水平。结果 CD1a和CD83在培养第7天的表达水平均高于培养第5天(t=16.62、34.75,P<0.001)。DC于第7天诱导成熟。质粒转染DC后,24 h可见特异性绿色荧光蛋白表达,48 h荧光最强,转染效率为38.2%,在48 h后,绿色荧光的表达逐渐减少。实验组在670 bp处可见阳性条带,为ΔNp73αmRNA阳性表达,而空白对照组和阴性对照组未检测到ΔNp73αmRNA的表达。在实验组中检测到ΔNp73α蛋白的表达,而正常对照组和阴性对照组中未检测到ΔNp73α蛋白的表达。各组CD40、CD80、MHC-Ⅱ表达水平比较,差异有统计学意义(F=12.68、41.18、38.95,P<0.05);其中实验组CD40、CD80、MHC-Ⅱ表达水平均高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。各组IL-12表达水平比较,差异有统计学意义(F=37.43,P<0.001);其中实验组IL-12表达水平高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论从人脐带血中可成功分离DC;重组质粒pcDNA-HA/ΔNp73α转染DC促进其成熟,将有效提高DC的抗原提�
- 苗小青王阳李淑华艾丽梅张佩
- 关键词：重组质粒树突细胞转染
- 霍乱毒素无毒B亚单位(CTB)黏膜免疫佐剂的研究进展被引量：5
- 2009年
- 霍乱毒素(CT)具有很强的黏膜免疫佐剂活性,是当今研究热点之一,但CT的黏膜免疫佐剂效应机理尚未完全弄清。本文主要就霍乱毒素无毒B亚单位(CTB)的黏膜免疫佐剂作用进行综述。
- 严小芳张佩董硕
- 关键词：霍乱毒素霍乱毒素B亚单位黏膜佐剂
- 重组CTB对UC大鼠结肠组织IL-10及树突状细胞的影响
- 2008年
- 目的探讨重组霍乱毒素B亚单位对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织IL-10含量、DC数目的影响。方法SD大鼠随机分成四组,用三硝基苯磺酸灌肠法制备大鼠溃疡性结肠炎模型,第二天开始灌胃给药,连续治疗两周后取结肠黏膜组织测IL-10含量、DC数目以及观察大鼠结肠组织病理学变化。结果两个给药组能不同程度的升高溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜组织IL-10含量,减少结肠黏膜DC数目,与阳性对照组相比,重组霍乱毒素B亚单位组治疗更明显。结论重组霍乱毒素B亚单位能够显著减少结肠炎大鼠结肠组织减少DC数目及升高IL-10含量,对大鼠实验性结肠炎具有一定的缓解或是治疗作用。
- 董丹张佩张静
- 关键词：溃疡性结肠炎IL-10DC
- 砷剂对小鼠皮肤朗格汉斯细胞数量与功能的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察砷剂(As,As2O3)对小鼠皮肤朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)数量及功能的影响,以期探讨As外用治疗皮肤病的机理。方法制备C57BL/6小鼠表皮单细胞悬液,经不同浓度As处理,MTT法观察As对全表皮细胞数的影响,寻找适宜浓度。使用该浓度进一步处理细胞,观察As对表皮中LC的相对数量的影响。通过流式细胞仪观察As对表皮LC抗原摄取能力及成熟能力的影响。结果As处理48h后,全表皮细胞数量从2uM开始显著减低。2uM As处理后LC被分成MHCⅡhigh,MHCⅡlow两个亚群,并且MHCⅡhigh/MHCⅡlow亚群的比例呈降低趋势。进一步观察MHCⅡhigh细胞亚群,显示MHCⅡ表达增强,而Langerin显著降低,差异均有统计学意义。CD80+及CD86highLC细胞群比例显著降低,而CD86lowLC亚群显著升高。CD80+LC比率降低的同时伴随CD80的表达强度减弱,CD86low的LC中CD86的平均荧光强度显著增加。MHCⅡlowLC丧失抗原摄取能力,MHCⅡhighLC的抗原摄取能力也显著降低。结论 As影响LC在皮肤中的比例。2uM As通过影响LC表面MHCⅡ分子、核内Langrin分子的表达,影响LC的成熟能力及抗原摄取能力,进而影响LC相关皮肤免疫。
- 柳敏田晶王阳杨蕾芳张佩
- 关键词：砷剂朗格汉斯细胞角质形成细胞
- 负载MB49肿瘤细胞抗原的DC疫苗对膀胱癌的抑制效应及机制被引量：3
- 2010年
- 目的探讨负载MB49肿瘤细胞抗原的树突状细胞疫苗(DC疫苗)治疗膀胱癌的可行性及机制。方法采用反复冻融法提取MB49抗原并用其致敏DC2.4,制备DC疫苗。将24只膀胱癌荷瘤小鼠随机分为两组各12只。DC组皮下注射DC疫苗,对照组注射PBS。注射3周观察两组肿瘤体积变化,计算肿瘤抑制率;分离两组脾脏T淋巴细胞进行培养,MTT法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对MB49的杀伤率;ELISA法检测培养上清中IFN-γ水平。结果 DC组肿瘤抑制率及细胞杀伤率均明显高于对照组,P<0.01;IFN-γ水平亦明显高于对照组,P<0.01。结论以DC2.4为基础的DC疫苗体内具有抑制肿瘤细胞MB49增长的作用;其机制可能为激活T淋巴细胞。
- 伦恒忠郭路生张佩
- 关键词：树突状细胞膀胱肿瘤树突状细胞疫苗
