张于
- 作品数：10 被引量：30H指数：4
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金四川省科技厅科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 牦牛SPAG11基因克隆与生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】克隆牦牛(Bos grunniens)精子相关抗原11(Sperm-Associated Antigen 11,SPAG11)基因,并了解其分子结构特征,为进一步研究牦牛SPAG11生物学功能奠定基础。【方法】从牦牛睾丸中提取总RNA,RTPCR扩增并克隆SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,测序后进行生物信息学分析。【结果】克隆出牦牛SPAG11基因3个亚型:SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E,序列大小分别是351,408和261bp,分别编码117,129和80个氨基酸,其中SPAG11 D和SPAG11E序列包含1个完整开放阅读框(ORF),SPAG11C序列包含部分ORF。牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E核苷酸序列与黄牛(Bos taurus)相应序列相似性最高,而与黄牛β-防御素1相似性较低(<50%)。3个蛋白亚型均具有β-防御素家族基本特性,生物信息学分析显示其均含有磷酸化位点。【结论】成功克隆牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,明确了其编码蛋白的分子结构特征。
- 徐绮嫔王寒李计尚周金伟张于沈留红余树民彭广能曹随忠
- 关键词：牦牛Β-防御素生物信息学
- 奶牛乳样和粪样中幽门螺杆菌PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2017年
- 【目的】建立一种特异、灵敏的牛源幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)检测方法,为家畜感染幽门螺杆菌的流行病学调查鉴定提供支持。【方法】分别选取Hp的16SrRNA、UreA、glmM为靶基因设计特异性引物,以H.pylori动物模型适应菌株SS1株为标准菌株建立PCR检测方法,并进行PCR条件优化,运用所建立的最优PCR方法检测临床奶牛乳样和粪样中Hp的分布情况。【结果】PCR特异性试验结果显示,仅Hp SS1株能扩增出特异性条带,而对照菌株金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌及蜡样芽孢杆菌均无扩增条带。PCR灵敏度试验结果显示,16SrRNA、UreA、glmM基因在乳样中的最低检出浓度分别为101,103和103CFU/mL,在粪样中的最低检出浓度分别为101,104和104 CFU/mL。应用该PCR方法对采集自规模化养殖场及散养的共计41头奶牛的乳样和粪样进行检测,成功检出Hp DNA,靶基因16SrRNA、UreA和glmM序列与NCBI上所发表的J166和ATCC43504菌株序列的同源性均达98%以上。【结论】成功建立了特异、灵敏的牛源Hp的PCR检测方法,可以应用于临床奶牛乳样和粪样中Hp的检测。
- 张于王寒文月玲江涛沈留红余树民曹随忠姚学萍
- 关键词：奶牛幽门螺杆菌RRNA基因
- 黄芩苷对LPS诱导的家兔乳腺炎的保护作用被引量：7
- 2016年
- 研究黄芩苷对LPS诱导的家兔乳腺炎性损伤的保护作用。分娩7～10 d的50只健康新西兰泌乳家兔随机分为LPS模型组（LPS,0.25 mg/kg·BW）、黄芩苷75 mg/kg·BW组、黄芩苷150 mg/kg·BW组、黄芩苷300 mg/kg·BW组和DEX组（0.5 mg/kg·BW）。通过乳头管灌注LPS,黄芩苷和DEX分别在灌注LPS前48、24、1 h和灌注后8、32、56 h耳缘静脉注射给药。灌注LPS前50 h、灌注后6、12、24、48 h和72 h测量家兔直肠温度,采集家兔耳缘静脉血;灌注LPS前50 h、灌注后12、24 h和72 h摘取乳腺组织。采集的样品进行下列检测：（1）制作病理组织学切片观察乳腺的病理组织学变化;（2）检测血清中LDH、ALP、MPO和NAG的活性变化;（3）ELISA检测血清中促炎细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α的含量。结果显示,与LPS模型组比较,注射黄芩苷各组：（1）乳腺组织的炎性损伤减轻;（2）血清中LDH、ALP、MPO和NAG活性降低,其中黄芩苷300 mg/kg·BW组抑制血清中酶活性升高效果最好;（3）血清中促炎细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α水平降低,其中在6 h时血清中TNF-α水平显著低于LPS模型组（P〈0.05）;72 h时,血清中IL-1水平显著低于LPS模型组（P〈0.05）。结果表明,黄芩苷能够有效减轻乳腺组织的炎性损伤,300 mg/kg·BW保护作用最好。
- 文月玲张于姚学萍沈留红余树民曹随忠
- 关键词：黄芩苷家兔脂多糖抗炎作用
- 牛、羊乳及其乳制品中幽门螺杆菌污染及检测技术研究进展被引量：5
- 2015年
- 近年来大量研究已经表明幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)可能是种食源性致病菌,而牛、羊乳是其最可能的感染源。食物中较难分离培养出Hp,而聚合酶链式反应相关技术灵敏度高,能检出样品中微量的Hp,可用于检测牛、羊乳中幽门螺杆菌的污染情况,但是与人类临床方面检测Hp技术的多样性、特异性与成熟性相比,食品中Hp快速而有效的检测方法及相关标准还相对缺乏。本文主要就近年来牛、羊乳及其乳制品中幽门螺杆菌污染及检测技术的研究进展进行综述,为进一步完善Hp传播途径与致病机制等研究提供一些参考。
- 张于江涛冉健文月玲沈留红余树民曹随忠姚学萍
- 关键词：幽门螺杆菌牛乳乳制品
- TLRs基因在牦牛雄性生殖器官中表达情况的检测被引量：7
- 2014年
- 为了解Toll样受体（TLRs）基因在牦牛生殖系统中的表达情况，应用半定量RT—PCR技术检测了TLRs基因mRNA在雄性牦牛生殖组织中的表达水平。结果显示，TLR1mRNA和TLR3～TLR9mRNA在睾丸、附睾、输精管和阴茎中均相对高表达；TLR2mRNA在睾丸、附睾头、附睾体和阴茎中相对高表达，在附睾尾和输精管中相对低表达；TLR10mRNA在睾丸、附睾头、附睾体和阴茎中相对低表达，在附睾尾和输精管中不表达。结果表明，TLRsmRNA在雄性牦牛生殖组织中均有不同程度的表达，提示它在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 曹随忠李计尚张于廖纯颖沈留红余树民姚学萍
- 关键词：牦牛
- 巨桉人工混交林土壤动物群落特征研究
- 桉树(Eucalyptus spp.)以其适应性强、生长迅速、生产力高等特征,已成为我国第三大优势人工林树种。但由于其大面积、单一树种经营也导致了生物多样性下降、地力衰退等一系列生态环境问题。营建人工混交林有利于改善人工...
- 张于
- 关键词：土壤动物群落结构功能群
- NOD1和NOD2基因在牦牛雄性生殖器官中的表达检测
- 2014年
- 为了解NOD1和NOD2基因在牦牛生殖系统中的表达情况,从脾脏组织总RNA中RT-PCR扩增牦牛NOD1和NOD2基因,半定量RT-PCR分析NOD1和NOD2 mRNA在牦牛雄性生殖组织的表达水平。结果显示,NOD1在脾脏、睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、输精管和阴茎中均相对低表达,而NOD2在脾脏、睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、输精管和阴茎中均相对高表达。结果表明,NOD1和NOD2在牦牛雄性生殖组织中广泛表达,提示其在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 余树民李计尚张于廖纯颖姚学萍沈留红曹随忠
- 关键词：牦牛NOD2基因
- SPAG11基因在雄性牦牛生殖器官中表达的检测被引量：4
- 2014年
- 为了检测精子相关抗原11(sperm-associated antigen 11,SPAG11)基因在雄性牦牛生殖器官中的表达谱并分析其组织表达特性,从牦牛附睾头总RNA中RT-PCR扩增SPAG11基因(SPAG11C、D、E、U、V和W),半定量RT-PCR分析SPAG11mRNA在牦牛生殖器官中的表达水平。采用合成的SPAG11E多肽制备牦牛SPAG11E多克隆抗体,免疫组织化学检测SPAG11E蛋白在睾丸和附睾中的表达及定位情况。结果显示,SPAG11C、U、V和W基因在睾丸和附睾相对低表达,而SPAG11D和E基因相对高表达;SPAG11C和U基因在输精管相对低表达,而SPAG11E相对高表达;除SPAG11D在卵巢相对低表达外,SPAG11基因在其他雌性生殖器官均不表达。免疫组织化学结果显示,SPAG11E蛋白在睾丸的精子细胞和附睾内壁精子头部表达。结果表明,SPAG11基因的表达具有组织特异性,提示它在牦牛睾丸和附睾中可能发挥重要的免疫功能和生殖功能。
- 余树民李计尚张于廖纯颖沈留红姚学萍曹随忠
- 关键词：牦牛睾丸附睾
- 奶牛乳腺成纤维细胞中Toll样受体与NOD样受体及其信号通路相关分子mRNA的检测被引量：4
- 2014年
- 先天性免疫应答中,由模式识别受体（pattern recognition receptor,PRR）识别病原微生物的病原体相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMP）,如脂多糖（liposachride,LPS）、肽聚糖（peptidoglycan,PGN）、脂磷壁酸（lipoteichoic acid）等。Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）是典型的PRR，主要分布于免疫细胞的细胞膜表面。
- 廖纯颖文月玲王寒江涛张于姚学萍沈留红余树民曹随忠
- 关键词：TOLL样受体NOD样受体免疫应答
- 奶牛乳样和粪样中幽门螺杆菌PCR检测方法的建立及初步应用
- 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)与上消化道及胃肠道外的多系统疾病相关，但至今其感染人的传染源和传播途径仍不明确。研究表明Hp可能是种食源性致病菌，而牛乳、羊乳是其中最可能的感染来源。目前，在幽门...
- 张于
- 关键词：奶牛幽门螺杆菌感染聚合酶链式反应乳样粪样
- 文献传递
