姚学萍
- 作品数：186 被引量：656H指数：11
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 《动物检疫技术》课程教学改革的探索与体会被引量：1
- 2013年
- 注重学思结合,知行统一与因材施教,进行改革创新推动教育发展。本文从修订教学大纲、充实教学内容、改革教学方法手段和完善成绩考核体系几个方面分析总结了《动物检疫技术》课程教学改革探索的实践以及取得的教学效果,并对如何成功进行高等教育教学改革提出思考,认为教师的主导作用和无私奉献是进行教学改革、提高教学质量的重要因素。
- 杨泽晓王印姚学萍汪开毓徐志文朱玲
- 关键词：教学改革
- 靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量：7
- 2016年
- 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了常规多重PCR扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点,实现了对同一反应体系多种病原的同步检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对Tem–PCR的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述,旨在为Tem–PCR的研究和发展提供参考依据,为中国应对公共卫生危机提供新思路。
- 邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博
- 关键词：高通量生物技术公共卫生
- 两株GI.1型和GI.2型兔出血症病毒RdRp基因的克隆与分析
- 2023年
- 为了解兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)RdRp基因的遗传稳定性和变异规律,本研究分别克隆了RHDV SCH04株和RHDV2 SCCN03株的RdRp基因,然后对基因序列进行比对和系统发育分析,并通过编码蛋白质的理化性质、信号肽、跨膜区域、二级结构、三级结构、磷酸化和糖基化修饰位点的预测,对RdRp进行生物信息学分析。结果显示,两株RdRp基因序列全长均为1548 bp,编码516个氨基酸。GI.1型RHDV毒株间序列相似性为86.9%~99.9%,GI.2型RHDV毒株间为91.3%~99.9%。GI.1型和GI.2型RHDV毒株间序列相似性为84.3%~88.3%。SCH04株和SCCN03株分别属于GI.1a型和GI.2型RHDV,且SCH04株和SCCN03株的RdRp基因核苷酸序列相似性为84.95%,其编码蛋白存在17个氨基酸差异位点,氨基酸序列相似性为96.71%;二者均属于稳定蛋白,不存在信号肽和跨膜区域;其分子量、等电点、脂溶系数、平均亲水系数和不稳定系数等指标无显著差异。SCH04株RdRp的α螺旋和β转角比例比SCCN03株略高,分别为41.86%和4.26%,而SCCN03株RdRp的延伸链和无规则卷曲比例比SCH04株略高,分别为12.79%和43.41%;SCCN03株RdRp比SCH04株多4个磷酸化位点和1个N-糖基化位点。分析结果表明不同型间RHDV RdRp基因核苷酸变异率较高,GI.1 RHDV毒株间的变异范围大于GI.2 RHDV毒株。SCH04株和SCCN03株RHDV RdRp的氨基酸序列相似性高于核苷酸序列相似性,其二级结构和高级结构差异较小,遗传相对稳定。本研究为RHDV的遗传演变和生物合成等分子病原学研究提供了科学参考。
- 庞雪晴唐诗曾红梅赵位王印罗燕姚学萍任梅渗任永军杨泽晓
- 关键词：兔出血症病毒RDRP生物信息学分析
- 犬细小病毒病毒样颗粒研究进展被引量：4
- 2016年
- 犬细小病毒病毒样颗粒(VLPs)是利用表达系统体外表达犬细小病毒衣壳蛋白VP2后,自我组装而成,与天然病毒具有相似的形态和空间结构,其不含有病毒的遗传物质,且具有较好的安全性和免疫原性,能有效刺激机体产生良好的免疫反应。犬细小病毒病毒样颗粒在生物医药领域的应用主要集中于研发病毒样颗粒疫苗,而应用病毒样颗粒作为生物载体亦是目前的关注热点。此外,近年来利用不同表达系统表达犬细小病毒VP2蛋白后组装获得病毒样颗粒的报道层出不穷。基于此,论文综述了犬细小病毒病毒样颗粒的获得及其应用研究进展,以期为相关科研工作者提供参考。
- 王斌徐绮嫔郭慧琛曹随忠孙世琪姚学萍
- 关键词：犬细小病毒病毒样颗粒体外组装生物应用疫苗
- 鸭源鸡杆菌的分离鉴定及其全基因组序列分析被引量：2
- 2022年
- 【背景】鸭源鸡杆菌作为一种条件致病菌能引起家禽卵巢炎、输卵管炎和腹膜炎等疾病,严重威胁养殖业的发展。【目的】四川某养鸡场送检了一批疑似感染鸭源鸡杆菌的病死鸡,为探究其感染机制与防治方法,对该菌进行分离鉴定及全基因组测序分析。【方法】从病料中分离并纯化细菌,再依次进行生化试验、16S rRNA基因序列分析和药敏试验,同时通过全基因组测序对其进行物种分型与毒力、耐药等基因功能注释及遗传进化分析。【结果】该分离菌被鉴定为鸭源鸡杆菌,菌株命名为TS0001,药敏试验显示其仅对硝基呋喃类和少数β-内酰胺类药物敏感,对部分β-内酰胺类、氯霉素、部分氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类和磺胺类药物具有耐药性。全基因组序列长度为2626722 bp,蛋白质编码基因功能注释显示其有较强的自我加工修饰能力,全基因组注释到83个与毒力因子和耐药性相关的基因,包含4个前噬菌体区域。序列类型分析结果显示,该菌株为ST69型,而且管家基因联合建树表明其与墨西哥普通家鸡分离株7990一致性最高。【结论】本研究为鸭源鸡杆菌的感染机制与防治研究提供了参考,丰富了后续研究的分子生物学背景。
- 唐诗庞雪晴曾红梅王印罗燕姚学萍任梅渗杨泽晓
- 关键词：鸭源鸡杆菌全基因组序列分析耐药性
- 西部白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其耐药基因检测被引量：2
- 2020年
- 为探究某动物园西部白眉长臂猿死亡的可能原因,无菌采集病死白眉长臂猿肺脏组织进行细菌分离鉴定。通过分离纯化、培养特性观察、革兰染色镜检、生化试验以及16S rDNA克隆测定对分离菌株进行鉴定;进一步研究分离株的致病性、耐药性,并进行超广谱β-内酰胺酶耐药基因检测及测序分析。结果表明,分离得到1株革兰阴性小杆菌,命名为J181121,该分离菌的培养及生化特性符合支气管败血波氏杆菌,其16S rDNA基因序列与Genbank中支气管败血波氏杆菌(登录号:CP018761.1)的同源性为99%,对小鼠致病力强。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类抗生素耐药,PCR检测到超广谱β-内酰胺酶耐药基因bla-SHV。
- 姜睿姣张鹏飞王印姚学萍杨泽晓罗燕
- 关键词：白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌超广谱Β-内酰胺酶
- 猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及荚膜血清分型被引量：11
- 2016年
- 为了解各血清型的多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)在四川、重庆、云南的流行情况,对2013—2014年间四川、重庆、云南等地8个规模化养殖场的125份病死猪肺炎样品进行细菌分离,并用PCR方法对分离的多杀性巴氏杆菌进行鉴定及荚膜血清分型。结果表明:从有肺炎症状病死猪的肺脏样品中共分离出11株多杀性巴氏杆菌,其中有7株为A血清型(63.6%),3株为D血清型(27.3%),1株为F血清型(9.1%),没有发现B和E血清型。表明在该区域内,猪肺疫主要是由A型Pm感染引起。另外,此次还分离出了1株较少见的F型多杀性巴氏杆菌。该结果可为上述地区巴氏杆菌病的防治提供科学材料。
- 林星宇胡凌王印杨泽晓姚学萍肖璐任梅渗曾相杰
- 关键词：多杀性巴氏杆菌血清分型
- 乳头管灌注金黄色葡萄球菌对家兔血清中酶活性的影响被引量：7
- 2010年
- 检测和分析乳头管灌注金黄色葡萄球菌前后家兔血清酶活性的动态变化,筛选奶牛乳房炎早期诊断指标。18只健康的怀孕家兔于产后7 d经第4对乳腺乳头管灌注金黄色葡萄球菌建立乳房炎模型。在灌注前2 h与灌注后6、12、24、48、72 h分别采血测定血清中碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化物酶(LP)和髓过氧化物酶(MPO)的活性并同时采集乳腺组织观察病理学变化。结果显示,血清酶ALP、LDH和MPO活性在灌注后6～48 h时显著升高(P<0.05),LP活性在灌注后12～48 h时显著升高(P<0.05),4种酶活性均在灌注后24 h时达到峰值;LDH活性变化与不同时相之间的拟合度(R2=0.9704)均大于其他3种酶与不同时相之间的拟合度;LDH活性与乳腺组织损伤程度密切相关。研究结果提示,LDH可以作为乳房炎早期诊断候选指标进一步研究。
- 姚学萍杨德英杨洪森伍杰余树民曹随忠刘宗平
- 关键词：家兔乳房炎金黄色葡萄球菌血清酶
- 7种猪呼吸道综合征疾病病原多重PCR方法的建立被引量：8
- 2017年
- 为建立能够同时检测7种导致猪呼吸道综合症疾病病原的多重PCR方法,参考伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、副猪嗜血杆菌(HPS)、多杀性巴氏杆菌(PM)以及胸膜肺炎放线杆菌(APP)标准毒株序列,选择各病毒和细菌的保守序列分别设计7对特异性引物进行多重PCR。各项优化试验结果表明,当反应的退火温度为51℃,各条引物浓度均为0.8μmol/L时扩增的目的条带效果最佳;用敏感性试验检测该反应中各病毒的最小检出量分别为:1.01×10~2(PRV)、1.48×10~3(CSFV)、1.07×10~4(ASFV)、9.73×10~3(PRRSV)、1.82×10~3(HPS)、1.65×10~3(PM)和3.64×10~3(APP)copies/μL。在最优化的反应条件下进行特异性试验,结果未出现交叉反应,能检出对应病原的多种血清型,阴性对照均无非特异性扩增。该方法快捷、灵敏、特异性高,可为临床诊断与流行病学研究提供科学依据。
- 任梅渗冷依伊蒙正群张鹏飞杨泽晓姚学萍王印
- 关键词：呼吸道疾病多重PCR
- 副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立被引量：10
- 2019年
- 为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的Omp P2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法。该方法能够特异性地检测Hps和Pm,其对重组质粒标准品的最低检测浓度分别为5.60×10^2拷贝/μL、7.58×10^2拷贝/μL。双重与单一荧光定量PCR最低检测限相同,且均是常规PCR的100倍。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于2.5%。临床应用结果显示:该方法对阳性样品的检出率为53.57%,明显优于常规PCR和细菌分离鉴定。该方法能够用于两种疾病的同时检测和快速排查疾病。为两种疾病的防治提供有效检测工具。
- 姜睿姣周丽军邬旭龙张鹏飞罗梓丹肖璐王印姚学萍杨泽晓罗燕
- 关键词：副猪嗜血杆菌巴氏杆菌
