左嘉客
- 作品数：58 被引量：177H指数：7
- 供职机构：上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 母型mRNA的定位和翻译机制
- 1997年
- 在卵或早期胚胎细胞内,有些RNA,包括mRNA,呈定位分布,其分布因RNA种类而异。定位分布的RNA一般具备如下生理功能:决定子细胞的命运,或阻止子细胞被纳入其它命运的轨道,或为子细胞建立、维持某特定的极性功能所需,或仅仅参与某特定结构的组成,显示一定的结构功能。
- 沈虹左嘉客
- 关键词：MRNA
- 细胞周期和卵母细胞成熟调控机制研究的新进展被引量：3
- 1992年
- 随着分子生物学和细胞生物学的飞速发 展,人们从单纯追求生物大分子的化学和物理 结构的研究,逐步转移到在分子水平上洞察和 认识生命活动的基本规律,自然也就包括了细 胞周期的调控问题。 自从细胞的分裂图象第一次在显微镜下被 观察到之后,关于细胞周期以及它与分化和发 育等的关系,就一直引起细胞生物学家和发育 生物学家的注意。按形态。
- 陈寒柏左嘉客
- 关键词：细胞周期卵母细胞
- 兔输卵管蛋白具有组织特异性而没有种属特异性被引量：3
- 1996年
- 哺乳动物输卵管为配子的最终成熟、配子的运输、受精及早期胚胎发育提供了一个独特的、适宜的环境。可以推测：输卵管粘膜上皮细胞分泌的某些蛋白参与了这些过程。有证据表明：输卵管粘膜上皮细胞分泌因子与克服发育阻断作用的现象“相关”。而且，这些因子在功能上无种属专一性。我们则进一步发现：输卵管因子能克服早期胚胎发育阻断。通过纯化兔输卵管上皮细胞分泌蛋白，制备针对各种不同蛋白组份的多抗血清。进行抗体封闭实验。结果表明：抗６４ｋＤ输卵管蛋白（ＤＰＦ－１）多抗血清能完全阻断体外早期胚胎的正常发育，阻断率达１００％。另外，鼠ＤＰＦ－１抗血清的用量与小鼠早期胚胎体外发育阻断率呈一定的剂量效应关系。Ｉｎｖｉｖｏ抗生育实验，即通过主动免疫雌性小鼠，亦证实ＤＰＦ－１具有克服早期胚胎发育阻断的作用。凡经免疫的雌性小鼠，怀孕后检查发现，近半数的早期胚胎发育均遭阻断，这就进一步表明了ＤＰＦ－１在克服早期胚胎发育阻断并实现由母型向合子型调控过渡过程中的作用。为了深入研究ＤＰＦ－１的理化特性和生物学行为，本文对ＤＰＦ－１进行了初步纯化，并制备了ＤＰＦ－１单抗。选择健康、性成熟、雌性新西兰白兔经自然发情、交配后，１７小时处死。取出输卵管上皮细胞、?
- 沈虹刘传聚顾正吕吉宁成国祥左嘉客
- 关键词：母兔组织特异性
- 蟾蜍泛素羧基末端水解酶(tUCH)以不依赖其UCH活性的方式参与卵母细胞成熟调控被引量：5
- 2003年
- 本实验室已报道中华大蟾蜍卵母细胞的p28蛋白具泛素羧基末端水解酶活性,称作tUCH,它和哺乳类中发现的UCH L1的氨基酸序列具高度同源性,二级结构同源性比较发现,二者可能具类似的功能。本文实验表明:未成熟卵母细胞和成熟卵母细胞的可溶性蛋白中均含有tUCH,约占提取物中蛋白质总量的2%。根据测定所得到的GST-tUCH和GST-UCH L1对底物Ub-AMC的酶动力学参数,说明卵母细胞中tUCH可能与小鼠UCH L1有类似的生物学功能;anti-tUCH单抗可以与原核细胞表达的tUCH和显性失活突变类型tUCH C(90)S特异结合,但不识别小鼠的UCH L1。Anti-tUCH单抗能够和tUCH结合但不能封闭它的UCH活性。当anti-tUCH单抗注入卵母细胞内,则孕酮诱导的生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)过程受到抑制,足见tUCH参与GVHD调节并不依赖其UCH活性。
- 孙兆贵孔维华颜山顾正左嘉客
- 关键词：卵母细胞成熟中华大蟾蜍孕酮
- 用同源重组法构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库的探索被引量：1
- 2007年
- 目的探索卵巢成熟及明确早胚发育过程中,构建小鼠卵母细胞cDNA文库筛选所涉及的相互作用蛋白。方法利用SMART技术,构建酵母双杂交筛选卵母细胞中与输卵管蛋白相互作用的靶分子成分为目的,构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库。采用Stratagene RNA prepkit抽提500枚卵母细胞总RNA,应用线性化载体pGADT7-Rec在体构建小鼠卵母细胞cDNA酵母双杂交文库。结果文库的滴度为3.7×106,重组片段大小主要集中在0.6-0.9kb,重组率为60%。结论所构建的小鼠卵母细胞cDNA文库可用于酵母双杂交筛选。
- 沈煜申宗候左嘉客
- 关键词：酵母双杂交CDNA文库同源重组小鼠卵母细胞
- 孕酮诱发蟾蜍卵母细胞成熟作用部位的探讨被引量：1
- 1984年
- 冬眠蟾蜍长足卵母胞胞,经手工剥除其卵巢膜、滤泡膜、透明带和质膜,包埋在琼脂块里,孕酮作用3小时(18±1℃)后,该细胞质团块中出现促成熟活性物质(MPF);将含有此MPF的微量卵质(约50毫微升),注入未经激素处理的卵球,能诱发后者恢复减数分裂,胚泡破裂,排出第一极体,正常抵达第二次成熟分裂中期。如果在去除上述卵外和卵表膜层结构的同时,剔除其细胞核(胚泡),然后包裹在琼脂中,经孕酮处理3小时左右,照样能够诱发产生促成熟活性物质;微量细胞质的转移,照样能使未经激素处理的受体卵正常成熟。随着供体卵质块与孕酮接触时间的延长,其诱发受体卵成熟的百分率逐渐增高。孕酮处理后9小时的供体卵质块,几乎全部能使受体卵正常成熟。上述结果表明,在本实验处理的条件下,孕酮诱发中华大蟾蜍卵母细胞形成促成熟活性物质的过程,既不依赖于卵表透明带与质膜,也不依赖于细胞核,而是细胞质自身活动的结果;显然,孕酮诱发蟾蜍卵母细胞成熟的初始作用部位是在细胞质。
- 左嘉客朱光徐国江王幽兰
- 泛素羧基末端水解酶L1参与性成熟前小鼠卵母细胞的选择性剔除(英文)被引量：6
- 2009年
- 异常卵母细胞的凋亡是性成熟前小鼠卵巢中具有缺陷的卵母细胞剔除的必要途径。泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1,UCH-L1)参与构成的泛素依赖性蛋白降解系统通过降解特定蛋白调节细胞凋亡,而UCH-L1依赖性的细胞凋亡对于睾丸的生精作用是必要的。本文利用免疫组化技术考察了性成熟前小鼠卵巢中不同发育阶段的卵泡数目的变化和UCH-L1在卵母细胞中的表达情况,结果显示卵巢中卵泡总数在出生后第21至28天显著减少;而UCH-L1蛋白在形态上出现异常的卵母细胞中表达显著增强,可能以某种程度与Jab1和p27Kip1蛋白关联。免疫荧光共定位显示UCH-L1在形态异常的卵母细胞中密度较高,而Jab1出现平行性的变化。免疫亲和分析显示卵巢中UCH-L1和Jab1发生作用。以上结果提示,UCH-L1在小鼠性成熟前的发育过程中异常卵母细胞的剔除方面具有重要作用,其作用可能以与Jab1和p27Kip1蛋白相关联的方式发生。
- 顾艳琼陈秋菊顾正石燕姚余卫王健孙兆贵左嘉客
- 关键词：P27KIP1JAB1卵母细胞
- 实验动物卵泡同步发育和卵母细胞离体适当成熟技术
- 孙兆贵倪丽菊颜桂军左嘉客顾正陈秋菊石燕顾艳琼姚余卫
- 哺乳动物性成熟之前，卵泡发育经历次级卵泡后，形成窦卵泡。在这一过程中，大量的卵泡通过凋亡导致的闭锁而被剔除。到性成熟时，卵泡的数目大大减少。性成熟之前，卵泡的发育过程中卵母细胞的体积变化不是很明显。3-4周龄的小鼠或大鼠...
- 关键词：
- 关键词：卵泡卵母细胞离体实验动物
- 中华大蟾蜍“高温卵”cDNA文库的构建
- 2001年
- 以长足但不具成熟潜能的中华大蟾蜍“高温卵”为材料 ,提取总RNA和mRNA ,以NotI/OligodT18为引物 ,经反转录合成第 1链cDNA ;再以DNAPolymeraseI合成第 2链 .所得到的cDNA加装衔接头后定向克隆到λ ExCell载体上 ,构建cDNA文库 .结果显示 ,平均每个“高温卵”中总RNA的含量为 5.66μg ,polyA+RNA含量约为 63 .96ng ,构建的cDNA文库的丰度为 8.93×1 0 - 5 pfu/ μgcDNA .随机挑选的 2个重组噬菌体经NotI、EcoRI双酶切后 ,均能酶切出外源片段 ,说明我们已成功地构建了中华大蟾蜍“高温卵”
- 孔维华顾正潘勇左嘉客
- 关键词：中华大蟾蜍CDNA文库
- 腺病毒E4启动子结合蛋白-4(E4BP4)基因在小鼠胚胎着床期间子宫组织中的表达被引量：2
- 2006年
- 腺病毒E4启动子结合蛋白-4(E4BP4)是哺乳动物细胞核内的一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)型转录因子,参与调控细胞的存活和增殖。前期研究表明,它在孕第5天的小鼠着床位点有明显的高表达。本文分别应用Northem blot、in situ杂交、Western blot和免疫组织化学技术,对E4BP4基因在小鼠妊娠初始期子宫、着床期胚胎着床位点和非着床位点的表达情况进行了研究。观察发现：在小鼠妊娠初始期,E4BP4基因在子宫组织中的表达逐步上调；至胚胎着床期间,其在胚胎着床位点的表达水平进一步提高,并明显高于非着床位点；该基因的表达不依赖于胚胎,人工蜕膜化可诱导其表达：E4BP4 mRNA和E4BP4蛋白分子都主要分布于子宫腔周围的基质细胞和蜕膜细胞。上述结果提示E4BP4基因可能通过促进着床位点基质细胞的增殖和抑制蜕膜细胞的凋亡而参与胚胎着床过程的调控。
- 王健黄哲平杨增明沈维雄左嘉客申庆祥
- 关键词：小鼠子宫胚胎着床
