沈虹
- 作品数：6 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 兔输卵管蛋白具有组织特异性而没有种属特异性被引量：3
- 1996年
- 哺乳动物输卵管为配子的最终成熟、配子的运输、受精及早期胚胎发育提供了一个独特的、适宜的环境。可以推测：输卵管粘膜上皮细胞分泌的某些蛋白参与了这些过程。有证据表明：输卵管粘膜上皮细胞分泌因子与克服发育阻断作用的现象“相关”。而且，这些因子在功能上无种属专一性。我们则进一步发现：输卵管因子能克服早期胚胎发育阻断。通过纯化兔输卵管上皮细胞分泌蛋白，制备针对各种不同蛋白组份的多抗血清。进行抗体封闭实验。结果表明：抗６４ｋＤ输卵管蛋白（ＤＰＦ－１）多抗血清能完全阻断体外早期胚胎的正常发育，阻断率达１００％。另外，鼠ＤＰＦ－１抗血清的用量与小鼠早期胚胎体外发育阻断率呈一定的剂量效应关系。Ｉｎｖｉｖｏ抗生育实验，即通过主动免疫雌性小鼠，亦证实ＤＰＦ－１具有克服早期胚胎发育阻断的作用。凡经免疫的雌性小鼠，怀孕后检查发现，近半数的早期胚胎发育均遭阻断，这就进一步表明了ＤＰＦ－１在克服早期胚胎发育阻断并实现由母型向合子型调控过渡过程中的作用。为了深入研究ＤＰＦ－１的理化特性和生物学行为，本文对ＤＰＦ－１进行了初步纯化，并制备了ＤＰＦ－１单抗。选择健康、性成熟、雌性新西兰白兔经自然发情、交配后，１７小时处死。取出输卵管上皮细胞、?
- 沈虹刘传聚顾正吕吉宁成国祥左嘉客
- 关键词：母兔组织特异性
- 母型mRNAs及其功能被引量：1
- 1996年
- 早期的胚胎发育是受母型基因调控(Mat-crnal regulation)的,有关的发育信息按母型mRNAs形式被早期胚胎继承下来,并由这些mRNAs衍生的蛋白质调控发育过程,直至合子型基因被活化,过渡为合子型调控(Zygoticregulation,Paternal regulation)。所以母型信息的存在形式和功能。
- 沈虹李逸平左嘉客
- 关键词：RNA信使RNA
- 兔输卵管因子DPF-1的cDNA克隆及鉴定被引量：5
- 1996年
- 以兔输卵管上皮细胞的polyA^+RNA为模板反转录合成cDNA,并构建了重组cDNA文库。库容量为2×10~6pfu/ml,重组体与非重组体比例为1000:1。以制备的豚鼠抗兔DPF-1(64 kDa)多克隆抗体克隆筛选到4个免疫阳性重组体(DPF-1.1、DPF-1.2、DPF-1.3和DPF-1.4),并被纯化。表位选择结果显示:DPF-1.1、DPF-1.2和DPF-1.3选择吸附的抗体可识别DPF-1和分子量为44 kDa的蛋白质。DPF-1.1、DPF-1.2和DPF-1.3经EcoRⅠ-NotⅠ双酶切后,得到的插入片段的长度分别为0.8 kb,1.2 kb,1.2 kb;纯化后亚克隆进p^(Bluescript)KS质粒,构建成重组质粒p^(DPF-1.1)、p^(DPF-1.2)和p^(DPF-1.3)。杂交结果表明,这些重组质粒可交叉杂交,说明它们拥有共同的核酸序列。点和Northern印迹分析结果显示,编码DPF-1的基因仅在输卵管组织中表达,具明显的组织专一性,且polyA+RNA的长度约为2.1 kb。本研究为揭示DPF-1的分子结构、功能及表达调控的机制奠定了基础。同时亦可望最终证实DPF-1的确切生物学作用。
- 刘传聚沈虹顾正吕吉宁成国祥左嘉客
- 关键词：CDNA
- 克服早胚发育阻断的兔输卵管因子“DPF-1”的初步研究被引量：12
- 1996年
- 兔64 kDa输卵管蛋白(DPF-1)具克服小鼠早胚发育阻断的作用。进一步分析的结果表明DPF-1的等电点介于7.2-8.1;其合成与分泌对雌激素或孕激素无明显依赖性,能穿越透明带,紧密附着在早胚细胞膜周围。借助于Western blotting分析法,发现DPF-1的分布具组织专一性,仅存在于输卵管,而新西兰白兔子宫、卵巢、肝脏、心脏、肺、脾脏、骨骼肌、小肠和脑等组织中皆未发现;在所检测的小鼠和金黄田鼠输卵管中,也显示出DPF-1相关分子,小鼠的为71 kDa和32 kDa输卵管蛋白,金黄田鼠的为68 kDa和49 kDa输卵管蛋白。值得注意的是,以DPF-1主动免疫的雌性小鼠,经交配,输卵管中的44.8%早胚发育遭阻断,提示DPF-1在克服早胚发育阻断并实现由母型向合子型基因调控过渡的过程中可能起决定性作用。
- 沈虹刘传聚顾正吕吉宁成国祥左嘉客
- 关键词：胚发育
- 推进早期胚胎发育正常调控过渡的输卵管细胞因子的初步研究被引量：15
- 1997年
- 本研究对兔输卵管上皮细胞（ＲＯＥＣ）分泌蛋白（ＲＯＰｓ）的特征及功能作了初步研究和分析。ＲＯＲｓ分子量介于１３５—４４ｋＤ，可分为３组，其中第２、３组为酸性糖蛋白。经糖苷酶消化，第３组ＲＯＰｓ显著地降解为分子量接近３０ｋＤ的蛋白。利用制备的抗总ＲＯＰｓ多抗（Ａｒｏｐ－Ｔ）以及针对不同分子量ＲＯＰ的抗血清（Ａｒｏｐ－Ⅰ、Ａｒｏｐ－Ⅱ和Ａｒｏｐ－Ⅲ），分别进行功能分析发现，Ａｒｏｐ－Ｔ和Ａｒｏｐ－Ⅰ能使受精卵发育完全阻断；Ａｒｏｐ－Ⅱ阻断受精卵发育的百分率为７５％；Ａｒｏｐ－Ⅲ无特异性地阻断受精卵发育的作用。结合我们已报道的研究结果，推测ＲＯＰ－６８和ＲＯＰ－５５就是具备启动早期胚胎合子型基因开放、实现正常发育调控过渡功能的输卵管细胞因子。
- 李逸平沈虹顾正左嘉客
- 关键词：胚胎发育
- λgtlSfi-Not作载体构建兔输卵管上皮细胞表达型cDNA文库
- 1997年
- λｇｔｌＳｆｉ┐Ｎｏｔ作载体构建兔输卵管上皮细胞表达型ｃＤＮＡ文库刘传聚沈虹顾正吕吉宁左嘉客（中国科学院上海细胞生物学研究所，上海２０００３１）兔输卵管上皮细胞合成并分泌的某些蛋白组份具克服小鼠早胚发育阻断的功能〔１，２〕．利用“功能缺失”分析从...
- 刘传聚沈虹顾正吕吉宁左嘉客
- 关键词：输卵管上皮细胞CDNA文库
