公共文化服务平台

猪流感病毒NP基因重组复制缺陷型腺病毒的构建与表达被引量：1: 2010年; 以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆至质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Western blotting鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物学活性。重组腺病毒rAd-NP-EGFP经增殖、纯化后其TCID50可达1.26×1010/mL,为进一步研究该重组病毒的免疫原性奠定了基础。; 展小过乔传玲陈艳杨焕良孔维吴运谱辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒 NP基因重组腺病毒

单克隆抗体及其应用的研究进展被引量：8: 2009年; 1975年德国学者Kohler和英国学者Milstein发明了杂交瘤技术。他们成功地将骨髓瘤细胞和产生抗体的B淋巴细胞融合为杂交瘤细胞，这种合成的杂交瘤细胞稳定、有致瘤性、能产生抗体，其分泌的抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体，故称之为单克隆抗体（简称单抗）。自从鼠源单抗之后，; 孔维杨文辉; 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞杂交瘤技术骨髓瘤细胞抗原决定簇细胞克隆

抗H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备与鉴定: 采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)作为免疫原免疫6-8周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗H3N2亚型SIV的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的...; 孔维乔传玲陈艳杨焕良展小过辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒血凝素单克隆抗体间接免疫荧光试验; 文献传递

表达H3N2亚型猪流感病毒NP基因重组腺病毒的构建: 以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及E...; 展小过乔传玲陈艳杨焕良孔维吴运谱辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒 NP基因重组腺病毒; 文献传递

表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒对小鼠免疫原性的研究: 以含有SIV HA基因的重组质粒pMD18-H3HA为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增HA基因,将其亚克隆入质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有H3HA及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,...; 展小过乔传玲杨焕良陈艳孔维辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒 HA基因重组腺病毒小鼠免疫原性; 文献传递

抗H3N2亚型猪流感病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2010年; 采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)尿囊液作为免疫原免疫6～8周龄Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗SIV-H3N2的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2C5、2F10、3D3、4E8、5C7、5D12,用其制备的腹水ELISA效价可达1×106。通过抗体亚型测定,间接免疫荧光试验及免疫印迹试验分析鉴定,该7株单抗均为抗H3N2亚型SIV的特异性单克隆抗体,而且与其他亚型猪流感病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒和猪瘟病毒等均无交叉反应,为H3N2亚型SIV的鉴别诊断奠定了基础。; 孔维乔传玲陈艳杨焕良展小过辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒单克隆抗体 ELISA

抗H3亚型猪流感病毒血凝素单抗的制备及抗原捕捉ELISA方法的建立: 猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)引起的一种急性传染性呼吸道疾病,临床表现发病率高、死亡率低,导致猪群严重发病往往是由于继发感染了其它的一些...; 孔维; 关键词：猪流感病毒 H3亚型; 文献传递

抗H3N2亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体的制备与鉴定: 采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)作为免疫原免疫6～8周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用间接ELISA方法筛选分泌抗H3N2亚型SIV的阳性细胞株,经克隆获得7株亲和力较高的...; 孔维乔传玲陈艳杨焕良展小过辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒血凝素单克隆抗体; 文献传递

抗H3N2亚型猪流感病毒单克隆抗体的制备与鉴定: 采用纯化的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)尿囊液作为免疫原免疫6～8周龄Balb/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合，用间接ELISA方法筛选分泌抗SIV-H3N2的阳性细胞株，经克隆获得7株亲和力较...; 孔维乔传玲陈艳杨焕良展小过辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒单克隆抗体 ELISA方法; 文献传递

H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA诊断方法的建立: 为了检测H3N2亚型猪流感病毒，将一株H3亚型猪流感病毒特异性单克隆抗体(4E8)进行纯化，建立了以多抗作为包被抗体，单抗作为检测抗体的H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA方法。通过对反应条件的优化。确定多抗1：800倍...; 陈艳孔维乔传玲杨焕良辛晓光陈化兰; 关键词：猪流感病毒单克隆抗体病毒检测性能评价; 文献传递

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

孔维