辛晓光
- 作品数：75 被引量：582H指数：14
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划哈尔滨市科技攻关计划项目黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪流感病毒NP基因重组复制缺陷型腺病毒的构建与表达被引量：1
- 2010年
- 以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆至质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Western blotting鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物学活性。重组腺病毒rAd-NP-EGFP经增殖、纯化后其TCID50可达1.26×1010/mL,为进一步研究该重组病毒的免疫原性奠定了基础。
- 展小过乔传玲陈艳杨焕良孔维吴运谱辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒NP基因重组腺病毒
- 猪流感抗体间接ELISA诊断方法的建立
- 猪流感(SI)即猪流行性感冒,是由正粘病毒科A型流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。猪感染流感病毒后,一般表现为突然发生、迅速传播,一般不引起死亡并可快速康复,更多见与其它疫病并发或继发感染使病情复杂化、严重化,导致猪的...
- 陈艳辛晓光杨焕良李婷李海燕乔传玲陈化兰
- 文献传递
- 蒲草垫料水浸出物、醇浸出物、醚浸出物的急性毒性试验及小鼠饥饿试验研究被引量：3
- 1997年
- 小鼠在正常状况下仅有撕咬垫料行为，在饥饿状态下少量嚼食薄草垫料，但不引起小鼠中毒。急性毒性试验表明，蒲草的水浸出物，醇浸出物，醚浸出物的ＬＤ５０分别大于蒲草２２．４、１５．７、１９．６ｇ／ｋｇ体重，灌胃后小鼠行为、反应正常，无中毒症状。４日后处死剖检结果，脏器亦无病变。大鼠经皮肤涂抹浸出物（每次剂量分别相当于蒲草７６．０、５３．３、６６．７ｍｇ／ｃｍ２，重复３次）后，无全身中毒症状，涂抹部位无临床上肉眼可见病变。兔滴眼试验（每次剂量分别相当于蒲草１２８．５、９０．２、１１２．７ｍｇ／ｋｇ体重，重复３次）证明，眼无临床上肉眼可见病变。大鼠经口及兔经皮试验亦得到相同结果。说明蒲草垫料的三种浸出物对动物无毒害作用。
- 陈洪岩宋小华辛晓光南锡张永江
- 关键词：小鼠垫料
- 鸭、鹅、猪H5、H7亚型和A型流感病毒通用型抗体检测力法的研究
- 李海燕王君伟杨焕良马波陈艳乔传玲辛晓光陈化兰
- 以杆状病毒为表达载体，表达了禽流感病毒的核蛋白基因，与流感病毒核蛋白具有相同的生物活性。重组病毒表达产物与流感病毒抗血清作免疫琼脂双向扩散试验，均出现明显清晰的沉淀线，与全病毒琼扩抗原出的沉淀线完全吻合。用重组杆状病毒的...
- 关键词：
- 关键词：流感病毒抗体检测
- 猪流感抗体间接ELISA诊断方法的建立
- 猪流感病毒(SIV)感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯SIV,纯化的 SIV经NP-40处理并反复冻融,作为SI间接ELISA抗原,建立了间接ELISA诊断方法．对29份HI检测 SI为阴性血清的...
- 陈艳辛晓光杨焕良李婷李海燕乔传玲陈化兰
- 文献传递
- H3N2亚型猪流感病毒核蛋白基因的优化表达及抗原性分析被引量：1
- 2010年
- 根据已获得的猪流感病毒(SIV)分离株A/Swine/Guangdong/9/05(H3N2)NP基因的核苷酸序列设计合成了1对带有特定酶切位点的引物,经RT-PCR扩增NP基因,将其克隆到pMD19-Simple-T载体,鉴定并测序正确后,构建pET32a-NP表达质粒,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为73ku,在25℃条件下主要以可溶性形式存在。将重组NP蛋白纯化后进行Western-blotting和间接免疫荧光试验,结果显示,表达蛋白可分别与H1N1、H3N2及H9N2亚型SIV阳性血清发生特异性反应,表明该蛋白具有良好的反应原性和交叉反应性;用纯化的重组NP蛋白免疫小鼠制备的多克隆血清也可与H1N1、H3N2及H9N2亚型SIV发生特异性反应,进一步证实所表达的重组NP蛋白具有良好的免疫原性。
- 郭利敏乔传玲陈艳杨焕良张健辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒核蛋白基因原核表达抗原性
- 我国猪流感研究最新概况被引量：8
- 2003年
- 猪流感(Swine Influenza,SI)是由正粘病毒科猪流感病毒(SIV)引起的一种急性、高度接触传染性的猪呼吸道疾病,临床以突发、咳嗽、呼吸困难、发热、衰竭、迅速康复或死亡为特征.该病呈地方性流行,可发生于各年龄和各品种猪,发病率高达100%.
- 李海燕辛晓光杨焕良陈化兰于康震
- 关键词：猪流感
- H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA诊断方法的建立
- 为了检测H3N2亚型猪流感病毒，将一株H3亚型猪流感病毒特异性单克隆抗体(4E8)进行纯化，建立了以多抗作为包被抗体，单抗作为检测抗体的H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA方法。通过对反应条件的优化。确定多抗1：800倍...
- 陈艳孔维乔传玲杨焕良辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒单克隆抗体病毒检测性能评价
- 文献传递
- 猪源H9N2亚型流感病毒HA基因的序列测定及真核表达被引量：1
- 2007年
- 利用RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Zhejiang/7/2004(H9N2)(SW/ZhJ7/04)HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGS上,经酶切分析、PCR鉴定和测序验证,得到重组表达质粒pCAGGS-HA,之后将其转染293T细胞,48h后收集转染细胞样品,进行SDS-PAGE分析,结果显示HA蛋白获得了表达。经Western blot检测,结果表明pCAGGS-HA能够在体外瞬时表达具有免疫学活性的HA蛋白,通过免疫小鼠,对其免疫效果进行了初步研究。
- 韩庆功乔传玲杨焕良陈艳辛晓光丁选亚陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因真核表达
- 表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒对小鼠免疫原性的研究
- 以含有SIV HA基因的重组质粒pMD18-H3HA为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增HA基因,将其亚克隆入质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有H3HA及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,...
- 展小过乔传玲杨焕良陈艳孔维辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因重组腺病毒小鼠免疫原性
- 文献传递
