陈艳
- 作品数：80 被引量：201H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划哈尔滨市科技攻关计划项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 表达H5N1亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及其免疫原性被引量：5
- 2009年
- RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Fujian/1/2001(H5N1)株的HA基因,构建重组腺病毒穿梭质粒pDC315-H5 HA-EGFP。采用Ad-Max同源重组系统和共转染技术,构建了表达H5N1亚型猪流感病毒HA基因的复制缺陷型重组腺病毒(rAd-H5 HA-EGFP)。经目的基因PCR检测及序列测定,结果表明:HA基因已经正确地插入到腺病毒的基因组中;通过RT-PCR检测与Western blot分析,结果表明:HA基因能够进行正确转录,并且所表达的蛋白具有相应的生物学活性。子代重组腺病毒rAd-H5 HA-EGFP经增殖、纯化后感染性滴度可达2.26×1010TCID50mL-1。rAd-H5 HA-EGFP免疫BALB/c小鼠能够诱导特异性的HI抗体产生,有效阻止病毒在体内的复制。
- 吴运谱乔传玲杨焕良陈艳展小过辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒H5N1亚型HA基因重组腺病毒
- H9N2亚型猪流感病毒A/Swine/Shandong/1/02分离株的基因序列分析被引量：3
- 2007年
- 从有肺炎症状的病猪中分离到1株H9N2亚型猪流感病毒（SIV）A／Swine／Shandong／1／02，对其进行了全病毒基因序列分析。结果表明，该毒株8个基因片段的核苷酸序列均来自禽流感病毒（AIV），与我国目前家禽中流行的H9N2亚型AIV毒株具有很高的同源性，与A／Duck／Hong Kong／Y280／97（H9N2）的同源性为94．1％～98．9％，与A／Chicken／Beijing／1／94（H9N2）的同源性为94．5％～98．2％；推导的其血凝素（HA）裂解位点处的氨基酸序列为P—A-R—S-S-R，完全符合H9亚型AIV欧亚分支中的类A／Chicken／Beijing／1／94亚分支的特征；基因分析结果表明，该分离株的所有基因片段均来源于H9N2亚型AIV，它可直接感染猪，并导致发病，但它并未在猪体内发生重组。
- 杨焕良乔传玲陈艳辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒H9N2
- 一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究被引量：16
- 2012年
- 为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测定及同源性分析发现,8个基因片段均与2000年左右H1N1人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株是由2000年人源H1N1流感病毒A/Dunedin/2/2000(H1N1)进化而来。抗原性分析显示该株与甲型H1N1流感病毒和经典H1N1病毒株抗原性差异较大。对小鼠致病性试验表明该病毒株可以直接感染小鼠并导致小鼠轻微临床症状和组织病理学变化,但不致死小鼠,表现为低致病性。
- 唐续杨焕良鄢明华李秀丽陈艳孟沙沙尹航辛晓光步志高乔传玲陈化兰
- 关键词：猪流感病毒遗传演化分析抗原性分析
- H1N1亚型猪流感病毒HA基因的序列测定及原核表达
- 利用RT-PCR方法扩增出猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,然后克隆到PMD18-T载体上,并进行测序和构建其系统进化树.根据测出的HA序列设计出带酶切位点的一对引物,并以PMD1...
- 丁选亚乔传玲韩庆功杨焕良陈艳辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达基因序列
- 文献传递
- 猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用
- 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克...
- 陈艳乔传玲丁选亚杨焕良辛晓光韩庆功陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达
- 文献传递
- 欧亚类禽型H1N1猪流感病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种欧亚类禽型H1N1猪流感病毒荧光定量RT‑PCR检测试剂盒及其应用。本发明通过序列多重比对，针对欧亚类禽型H1N1猪流感病毒、甲型H1N1(2009)猪流感病毒、经典型H1N1猪流感病毒及人源H1N1猪流...
- 杨焕良陈艳陈化兰乔传玲
- 文献传递
- MDCK细胞分离猪流感病毒方法的建立
- 从来自全国4个省的432份样品中在犬肾传代细胞系(MDCK)成功分离并培养4株猪流感病毒.经HI试验检测为H1亚型猪流感病毒,传至4代血凝效价增高可达8log2.本试验首次在国内建立用MDCK细胞系分离猪流感病毒,为猪流...
- 陈艳乔传玲杨焕良许传田辛晓光
- 关键词：猪流感病毒病毒分离
- 文献传递
- H1N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/06分离鉴定和对猪致病性研究被引量：3
- 2009年
- 2006年5月从广东某大型猪场采集具有流感症状保育猪鼻拭子共98份,无菌常规处理猪鼻拭子后接种MDCK细胞,分离到4株流感病毒。用血凝抑制和PCR方法鉴定均为H1N2亚型。挑选其中一株A/Swine/Guangdong/1/06(H1N2),进行全基因组测序,并与GenBank中相关序列进行比较。核苷酸同源性分析表明:A/Swine/Guangdong/1/06(H1N2)与A/Swine/Guangxi/13/06不同基因之间同源性为96.6%～98.1%。以106EID50的剂量,将H1N2病毒鼻腔感染35日龄仔猪,结果表明H1N2亚型流感病毒可以感染猪上呼吸道,但不表现临床症状。本研究结果对于揭示H1N2亚型猪流感流行规律和病毒的致病机理具有一定的意义。
- 许传田樊树芳杨焕良乔传玲陈艳辛晓光陈化兰
- 一种检测A型猪流感病毒的RT-LAMP试剂盒及其用途
- 本发明公开了一种检测A型猪流感病毒的RT‑LAMP试剂盒及其用途。所述试剂盒主要由四条LAMP引物、LAMP反应液和阳性模板组成。实验证明，本发明试剂盒具有良好的特异性、灵敏度，扩增快速、高效，且结果判定简便。本发明的检...
- 杨焕良陈化兰陈艳乔传玲
- 文献传递
- 一株H1N1猪流感病毒的进化分析与分子特征被引量：5
- 2015年
- 【目的】了解猪流感病毒的分子流行病学,为动物流感的防控提供科学依据。【方法】将猪的鼻拭子接种鸡胚进行病毒分离,对血凝试验阳性的样品在SPF鸡胚上进一步纯化、增殖,采用RT-PCR对分离毒株的全基因组进行扩增,使用Applied Biosystems 3500x L Genetic Analyzer进行序列测定,利用DNASTAR软件对测序基因片段进行整个阅读框的核苷酸序列同源性比对分析,并用MEGA 6.0绘制遗传进化树及分析氨基酸位点。【结果】分离毒株A/swine/Zhejiang/245/2013(SW/ZJ/245/13)为H1N1亚型病毒,核苷酸的分析结果发现该分离毒株的8个基因片段均与中国近期分离的H1N1亚型流感病毒高度同源,属于类禽型猪H1N1的进化分支,没有出现不同基因型流感病毒片段之间的重组。分离株HA蛋白的裂解位点序列为IPSIQSR↓G,具有典型低致病力流感病毒的分子特征;HA蛋白5个抗原位点区域与其同源性最高毒株完全一致,表明抗原性未发生改变;HA蛋白受体结合位点中190 D以及225 E,表明SW/ZJ/245/13与SA-α-2,6-Gal受体有较强的结合能力,而SA-α-2,6-Gal受体普遍存在于哺乳动物宿主(猪和人)上呼吸道中;HA共有6个潜在糖基化位点,其中4个(N27、N40、N212和N291)位于HAl区,2个(N498和N557)位于HA2区;NA有7个潜在糖基化位点,其中4个(N50、N58、N63和N68)在链接区,其他3个(N88、N146和N235)在结构域;PB2蛋白具有271T、627E和701N的氨基酸组合;M2蛋白发生抗药位点S31N的突变。【结论】类禽型H1N1猪流感病毒的持续存在和不断变异,提示应加强猪流感的监测,为动物流感的防控提供重要的科学依据。
- 徐汇洋许榜丰陈艳隋金钰杨焕良尹航杨大为乔传玲陈化兰
- 关键词：猪流感病毒H1N1进化分析分子特征
