吴秋红
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阳春砂二酮辅酶A合成酶的基因克隆及序列分析被引量：1
- 2013年
- 目的对阳春砂姜黄素生物合成途径的关键酶二酮辅酶A合成酶（diketideCoAsynthase，DCS）基因的编码cDNA序列进行克隆，为研究阳春砂姜黄素生物合成与基因调控奠定基础。方法结合阳春砂的转录组注释，根据编码区序列设计引物，通过PCR方法克隆阳春砂DCS基因的编码区cDNA。结果PCR扩增了一个长1170bp的基因片段，该片段编码由389个氨基酸组成的DCS。同源性比对结果显示基因编码蛋白与姜黄的DCS具有氨基酸一致性达96％，与水仙等植物的查耳酮合酶（chalconesynthase，CHS）氨基酸一致性达66％-69％。进化树分析结果显示，与姜黄CurcumaeLongae具有较近的亲缘关系。结论首次从阳春砂中克隆DCS基因获得其编码区序列，为分析基因表达特性及其在姜黄素生物合成中的功能奠定基础。
- 杨恩泽高辉吴秋红王峰
- 关键词：阳春砂姜黄素
- 阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶的基因克隆与表达谱分析被引量：9
- 2015年
- 目的：为了了解阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶（PMK）的功能与表达特性，根据阳春砂的转录组注释设计引物，PCR 克隆阳春砂甲羟戊酸途径中的关键酶磷酸甲羟戊酸激酶基因的编码区 cDNA，使用生物信息学方法对其编码的蛋白进行相似性检索及同源序列比对，构建进化树，预测二级及三级结构并分析其功能，探索其各器官中的表达差异．结果：获得了全长1539 bp 的编码阳春砂 PMK 的 cDNA 序列，命名为 AvPMK （GenBank 登录号：KF569902），编码由512个氨基酸组成的磷酸甲羟戊酸激酶，该蛋白含有 GHMP 激酶超家族特异的 N －保守区域、C －保守区域和 ATP 结合位点 Gly-X-Gly-XX-Ala．AvPMK 与其他植物的 PMK 氨基酸相似性达61％～69％，进化树结果显示其与二穗短柄草（Brachypodium distachyon）等单子叶植物具有较近的亲缘关系．AvPMK 蛋白包含14个α-螺旋（Alpha helix），占37.1％；16个β链（Beta strand），占15.6％；32个无规则卷曲结构，占47.3％，无跨膜结构域，其3级结构含有一个催化反应的口袋状结构域．实时荧光定量 PCR 结果显示 AvPMK 基因在叶中表达量较高，茎、根中表达量相对较低．结论：首次从阳春砂仁中扩增磷酸甲羟戊酸激酶的基因片段，为分析其基因表达特性及其在砂仁萜类生物合成中的功能奠定基础．
- 杨恩泽陆颖锶吴秋红王峰
- 关键词：阳春砂萜类化合物基因克隆表达谱分析
- 一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用，属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段，将该片段连接到pET15b构建表达质粒pE...
- 王峰张自德黄璐圆吴秋红张光李秀英
- 文献传递
- 红树林植物杯萼海桑法呢基焦磷酸合酶的基因克隆及序列分析被引量：4
- 2013年
- 目的对杯萼海桑Sonneratia alba萜类化合物生物合成途径的关键酶法呢基焦磷酸合成酶(Farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)基因的编码cDNA序列进行克隆,为研究杯萼海桑萜类化合物生物合成与基因调控奠定基础。方法结合杯萼海桑根的转录组注释,根据编码区序列设计引物,通过PCR方法克隆杯萼海桑FPS(SaFPS)基因的编码区cDNA。结果PCR扩增了一个长1 029 bp的基因片段,该片段编码由342个氨基酸组成的SaFPS。同源性比对结果显示基因编码蛋白与甘草的FPS具有氨基酸一致性达86%。其具有异戊烯基转移酶的2个典型保守功能域。进化树分析结果显示,与甘草Glycyrrhiza uralensis、苜蓿Medicago truncatula、羽扇豆Lupinus albu具有较近的亲缘关系。实时荧光定量PCR结果显示SaFPS基因在花中表达量较高,果实、茎、叶中表达量相对较低。结论首次从红树林植物杯萼海桑中克隆FPS基因获得其编码区序列,SaFPS基因具有组织表达特异性。本研究为分析基因表达特性及其在生物合成中的功能奠定基础。
- 王峰吴秋红高辉张自德李秀英张光
- 关键词：基因克隆PCR
- 红树植物杯萼海桑SAMS基因的克隆与生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 红树植物杯萼海桑是最耐盐的红树植物之一。S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethionine synthetase,SAMS)是S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)生物合成途径的关键酶。SAMS作为一个逆境胁迫响应蛋白在植物的耐盐调控中发挥着极其重要的作用。本文结合杯萼海桑根的转录组注释,根据编码区序列设计引物,通过PCR克隆杯萼海桑SAMS基因的编码区cDNA,并对其进行生物信息分析,为研究杯萼海桑适应逆境的机制奠定理论基础。结果显示PCR扩增了一个长1 182 bp的基因片段,该片段编码由393个氨基酸组成的S-腺苷甲硫氨酸合成酶。同源性比对及进化树分析显示杯萼海桑的SAMS氨基酸序列进化上相对保守。本研究首次从红树林植物杯萼海桑中克隆S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,并获得其编码区序列,为进一步研究杯萼海桑应对逆境胁迫的分子生物学机制与胁迫相关基因调控网络奠定基础。
- 吴秋红张自德王峰
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆
- 重组人锰超氧化物歧化酶的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性被引量：1
- 2013年
- 目的探讨重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性。方法在37℃条件下,用模拟胃液(0.084 mol/L HCl,35 mmol/L NaCl,pH 2.0,4 000 U胃蛋白酶)处理rhMn-SOD不同时间,SDS-PAGE分析酶解效果;使用总SOD测定试剂盒检测rhMn-SOD在不同温度(25、37、45、55、65、75℃)下保存不同时间(10、20、30、40、50、60 min)、不同pH(4.0～10.0)、不同化合物(氯仿、甘油、DMSO、10%SDS、β-巯基乙醇、苯酚、30%H2O2)处理后及日光和紫外照射后的相对活力。结果 rhMn-SOD在模拟胃液中处理2 min即可完全酶解。在25～55℃范围内,rhMn-SOD具有较好的热稳定性,在65～75℃范围内,rhMn-SOD的热稳定性较差;在pH 6.0～8.0范围内,rhMn-SOD具有较好的稳定性;rhMn-SOD对甘油和氯仿不敏感,经DMSO、SDS处理后,活力大幅下降,经β-巯基乙醇、苯酚、30%H2O2处理后,基本失活;rhMn-SOD经日光和紫外照射3 h,活力基本不变。结论分析了rhMnSOD的胃蛋白酶酶解特性、热稳定性、pH稳定性、对不同化合物的敏感性以及光稳定性,为其广泛应用于化妆品、药品、食品添加剂等领域奠定了基础。
- 张自德张玉波吴秋红张光王峰
- 关键词：胃蛋白酶蛋白酶解稳定性酶活力
- 一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用，属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段，将该片段连接到pET15b构建表达质粒pE...
- 王峰张自德黄璐圆吴秋红张光李秀英
- 文献传递
