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刘威: 作品数：15 被引量：30H指数：3; 供职机构：第三军医大学更多>>; 发文基金：重庆市研究生教育教学改革研究项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>

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幽门螺旋杆菌丝氨酸蛋白酶(HtrA)的表达纯化及初步结晶研究: 幽门螺旋杆菌是一种革兰氏阴性细菌,主要寄居在人类的胃粘膜,是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。幽门螺旋杆菌感染导致疾病发生的毒力因子有很多种,而丝氨酸蛋白酶(HtrA)...; 刘东刘威; 文献传递

幽门螺旋杆菌丝氨酸蛋白酶的制备方法: 本发明公开了幽门螺旋杆菌丝氨酸蛋白酶的制备方法，具体是以SEQ ID No.3和SEQ ID No.4扩增SEQ ID No.2所示的核苷酸序列，然后将扩增产物经酶切后连入经同样酶切的pMAL-C质粒中，获得重组表达载体...; 刘东刘威吴玉章; 文献传递

融合蛋白MBP-Eppin、蛋白Eppin及其制备方法: 本发明涉及“融合蛋白MBP-Eppin、蛋白Eppin及其制备方法”，属于生物技术领域。本发明构建了一个表达载体，在MBP与目标蛋白之间设置有凝血酶酶切位点He-Glu-Gly-Arg，使得蛋白Eppin以MBP融合蛋白...; 何畏陈惠玲刘威刘东马博温彦; 文献传递

幽门螺杆菌黏附素HpaA重组蛋白的表达、纯化及晶体生长被引量：4: 2015年; 目的构建幽门螺杆菌黏附素Hpa A的原核表达载体,并用纯化的重组Hpa A蛋白进行晶体培养,为其三维结构解析、基于结构的Hpa A抗原表位分析和黏附拮抗剂研究奠定基础。方法用生物信息学方法分析Hpa A蛋白序列二级结构并预测跨膜区,利用PCR技术扩增幽门螺杆菌标准株NCTC 26695编码Hpa A蛋白的hp0797基因非跨膜区片段,构建重组质粒并p ET22b(+)-r Hpa A,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达重组蛋白,经Ni离子亲和层析、阴离子交换层析、凝胶过滤层析纯化蛋白并分析其聚集状态。用Hampton Research结晶试剂盒搜索结晶条件,并系统优化,在上海同步辐射光源进行衍射实验。结果成功构建了重组质粒p ET22b(+)-r Hpa A,并在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶性表达;重组Hpa A蛋白在溶液中以二聚体形式存在,SDS-PAGE分析单体相对分子质量约24 000,HPLC分析纯度达95%;培养出晶形较好的重组Hpa A蛋白单晶,大小约70μm×30μm×20μm,衍射分辨率2.03魡。结论利用经典的蛋白质表达、纯化技术和晶体培养技术,获得了衍射能力较强的重组Hpa A蛋白单晶,为其三维结构解析和基于结构的幽门螺杆菌疫苗研究提供了重要基础。; 郭玲章金勇刘东马博王书峰倪兵李海波刘威吴玉章; 关键词：幽门螺杆菌 HPA 纯化晶体生长

乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白及其制备方法和应用: 本发明公开了一种乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码基因序列如SEQ ID No.2所示；该融合蛋白携带有三种乙肝病毒抗原的四个超型表位，分别为HBsAg281-290、HBc...; 刘东刘威吴玉章; 文献传递

人Eppin蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：2: 2014年; 目的构建人类附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白原核表达质粒,诱导、表达与纯化后获得到可溶重组蛋白,并检测其免疫学活性。方法将目的基因克隆到表达载体pMALc,转化大肠杆菌表达菌株Rossetta2-OrigamiB(DE3),用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析柱及Superdex 200分子筛层析进行纯化后,使用Thrombin酶切,并对目标蛋白进行质谱及Western印迹鉴定。结果成功构建pMALc-Eppin重组质粒,诱导后在上清中检测到Mr57 000大小的可溶MBP-Eppin融合蛋白。目标蛋白纯化与酶切后仍可溶,SDS-PAGE分析显示重组Eppin蛋白相对分子质量约15 000。肽指纹图谱分析证实目标蛋白的序列与人Eppin蛋白吻合,Western印迹显示其具有抗原性。结论经过优化,Eppin蛋白可在原核系统中以可溶形式表达,为以后研究该蛋白的生物活性、避孕免疫机制及制备避孕疫苗奠定坚实的基础。; 陈惠玲刘东马博东亚君何畏刘威; 关键词：原核表达纯化

乙型肝炎广谱多价治疗性疫苗的制备: <正>乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)是严重危害人类健康的肝炎病毒之一,是重要的肝脏疾病致病因子。慢性感染患者主要表现为肝损伤,以及与脂肪变性和纤维化相关的代谢紊乱,长期感染的患者有发展成为肝硬...; 刘东刘威吴玉章; 文献传递

研究生蛋白质组学教学改革与实践被引量：3: 2013年; 蛋白质组学是一门交叉型前沿学科,其本身综合了生物学、医学、生物工程学、计算机及网络技术等多学科技术和方法。通过探讨研究生蛋白质组学传统教学方法和教学手段存在的问题,结合自身改革和实践经验,为进一步提高研究生蛋白质组学教学质量和人才培养水平提供经验借鉴。; 刘东刘威吴玉章; 关键词：蛋白质类教育改革蛋白质组学

乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白及其制备方法和应用: 本发明公开了一种乙肝病毒多表位与志贺毒素的融合蛋白，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码基因序列如SEQ ID No.2所示；该融合蛋白携带有三种乙肝病毒抗原的四个超型表位，分别为HBsAg281‑290、HBc...; 刘东刘威吴玉章; 文献传递

POPS教学法在医学免疫学教学中的实践被引量：11: 2013年; 医学免疫学是发展较快的一门前沿学科,传统的教学模式已经不能适应学科发展的需要。以病例为导向的问题解决方案(Patient-Oriented Problem Solving System,POPS)能有效调动学生的主观能动性,引起学生的学习兴趣,培养学生自主学习和团结协作的能力,激发学生的创新和科研思维能力,同时加强学生获取信息和信息交流的能力,能取得更好的教学质量和教学效果。另外,POPS教学法还能提高教师的自身素质和修养。; 刘东刘威吴玉章; 关键词：医学免疫学 POPS 教学法