邢爱英
- 作品数：121 被引量：321H指数：10
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 结核分枝杆菌复苏因子D基因在真核细胞中的表达
- 2011年
- 目的构建结核分枝杆菌复苏因子D基因（RpfD）真核表达载体，为结核分枝杆菌复苏因子DNA疫苗的研究奠定基础。方法PCR扩增复苏因子D基因片段，克隆至PcDNA3．1（-）载体中，重组质粒测序正确后，转染至CHO细胞中。通过G418筛选，RT-PCR检测克隆基因mRNA在真核细胞的表达，Western blot检测目的蛋白的表达。结果构建了PcDNA—RpfD表达载体，RT—PCR证实构建的载体能在CHO细胞中表达RpfD基因mRNA，Western blot证实转染了载体的CHO能表达RpfD蛋白质。结论PcDNA—RpfD真核表达载体在转染细胞CHO中能表达RpfD蛋白质。
- 邢爱英刘忠泉贾红彦杜博平古淑香张宗德
- 关键词：真核表达
- 对氨水杨酸钠耐药与结核分枝杆菌胸苷酸合成酶基因突变的研究被引量：4
- 2007年
- 目的检测结核分枝杆菌临床分离株对氨水杨酸钠(PAS)耐药和胸苷酸合成酶(thyA)基因突变的关系,探讨结核分枝杆菌 PAS 耐药的分子机制。方法 95株结核分枝杆菌临床分离株中的51株 PAS 敏感株和44株 PAS 耐药株的 PAS 耐药相关基因 thyA 基因进行 PCR 扩增,扩增产物纯化后进行序列测定,与结核分枝杆菌标准株 H_(37)Rv 的野生型 thyA 基因序列进行比对,判断这些临床分离株 thyA 基因有无突变。结果 51株 PAS 敏感株 thyA 基因未检出突变,44株 PAS 耐药株中有16个临床分离株的 thyA 基因检测到突变,突变检出率为36.4%(16/44)。突变类型包括置换、颠换、插入、缺失,均为单碱基改变或单碱基缺失,其中2株为 thyA 基因2个位点联合突变。结论结核分枝杆菌 thyA 基因突变是其产生 PAS 耐药的重要原因之一。结核分枝杆菌胸苷酸合成酶是PAS 作用的重要靶位。
- 张宗德赵雁林李自慧贾红艳刘宇红陈曦刘忠泉杜博平邢爱英马玙
- 关键词：胸苷酸合酶抗药性
- 结核分枝杆菌对氨基水杨酸耐药相关基因的筛选及鉴定
- 2012年
- 目的筛选二线抗结核药物对氨基水杨酸（para-aminosalicylic acid，PAS）耐药相关基因。方法构建H37Rv转座子文库，筛选对氨基水杨酸耐药克隆，随机引物PCR扩增转座子插入突变基因。在PAS耐药菌株中鉴定耐药相关基因的突变情况。结果构建了较完整的H37Rv转座子文库，并筛选出201个PAS耐药克隆，经测序找到4个可能的PAS耐药相关基因。papA1基因检测到一个无义突变。结论酰基转移酶基因papA1可能为PAS耐药相关基因。
- 郑晓静杜博平贾红彦侯继增杨超高汉青杜凤娇邢爱英李自慧曹廷明张宗德李琦
- 关键词：耐药对氨基水杨酸基因
- 结核分枝杆菌Rpf-DNA疫苗对Mtb感染小鼠免疫保护作用的研究
- 2012年
- 目的评价Mtb复苏因子DNA疫苗（resuscitation-promoting factor DNA, Rpf-DNA）对Mtb感染宿主的免疫保护作用。方法构建复苏因子D（Rpf D—DNA）和复苏因子E（Rpf E-DNA）质粒疫苗，180只BALB／c小鼠（4周龄）分为6组，每组30只，分别用空质粒、Rpf D-DNA质粒、Rpf E-DNA质粒、BCG、生理盐水免疫，H37Rv标准株气溶胶感染。检测血清复苏因子（Rpf）抗体、IFN—γ；Rpf D、E刺激淋巴细胞后进行淋巴细胞增殖、细胞杀伤实验；检测细胞上清IFN-γ、IL-12、IL-2；对肺组织进行病理学检测和细菌负荷（CFU）计数。结果（1）疫苗免疫组血清RpfD、RpfE抗体水平：RpfD组0．32±0．1，RpfE组0．39±0．1，BCG组0．02±0．01，空质粒组0．01±0．0，生理盐水组0．09±0．04，空白对照组0．03±0．01，RpfD组与RpfE组抗体水平与BCG组、空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有显著统计学意义，F值分别为RpfD：45．6，43．2，45．1，45．7；RpfE：51．6，53．6，51．0，52．2：P值均〈0．01。血清IFN-γ：RpfD组（43．9±24．8）pg／ml，RpfE组（45．9±21．0）pg／ml，BCG组（21．0±11．0）pg／ml，空质粒组（7．9±4．9）pg／ml，生理盐水组（4．7±2．1）pg／ml，空白对照组（5．8±4．7）pg/ml，RpfD、RpfE质粒组与BCG组比较差异有统计学意义（F值分别为RDfD：10．2；RpfE：12.4；P值均〈0．05），与空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有显著统计学意义，F值分别为RpfD：15．6，17．8，17．3；RpfE：17．5，21．1，20．7P值均（0．01。（2）淋巴细胞增殖实验CCK-8：RpfD组176．0±4．2，RpfE组183．0±4．3，BCG组101．0±1．1，空质粒组100．0±6．8，生理盐水组104．0±8．4，空白对照组116．0±2．2，RDfD、RpfE质粒组与BCG组、空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有统计学意义，F值分别为RpfD：9．5，10．1，10．0，9．0；RpfE：11．2，12
- 邢爱英刘忠泉刘洋贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜凤娇杜博平古淑香张宗德
- 关键词：细菌蛋白质类细胞因子类
- 不同抗原酶联免疫斑点检测技术对结核性胸膜炎辅助诊断价值的比较
- 2011年
- 目的探索结核分枝杆菌不同抗原的酶联免疫斑点检测技术（ELISPOT），对结核性胸膜炎的辅助诊断价值。方法分离55例结核性胸膜炎患者和43例恶性胸腔积液患者的胸腔积液单个核细胞，经5个蛋白抗原：ESAT-6、CFP-10、ESAT-6／CFP-10融合蛋白（E／C）、Rv3873和Rv3879c共同孵育，进行ELISPOT试验，检测经抗原刺激后分泌IFN—γ的效应T淋巴细胞（即斑点形成细胞，SFC）的数量，用中位数（四分位间距）表示。结果结核性胸膜炎组ESAT-6-ELISPOT、E／C—ELISPOT、CFP-10-ELISPOT、Rv3873-ELISPOT和Rv3879c—ELISPOT每孔的SFC分别为27（13-65），26（12-52），34（18-79），26（8～50）和11（1～24），均显著高于恶性胸腔积液组的1（0～2），2（0～4），2（1～4），3（1～6）和1（0～3），均有P〈0.01。5个抗原中E／C的敏感度最高92．7％，ESAT．6和Rv3879c的特异度最高93．O％，ESAT-6的诊断准确性最高。结论ESAT-6联合新抗原Rv3879c的ELISPOT能够辅助诊断结核性胸膜炎，但其特异度易受MTB潜伏感染的影响。
- 杜凤娇陈曦刘菲刘洋曹廷明刘忠泉贾红彦邢爱英杜博平古淑香马玙张宗德
- 关键词：胸腔积液
- 结核分枝杆菌RV3121基因的的原核表达及其抗原性分析
- 目的 前期相关研究表明结核分枝杆菌(M.tb) RV3121基因具有较好的特异性,本研究将构建其原核表达载体并获得其重组蛋白,并研究其抗原性,探讨其作为新型结核病特异性标志物的可行性.方法 用PCR方法扩增M.tb RV...
- 曹廷明贾红彦邢爱英杜凤娇刘忠泉李自慧郑晓静潘丽萍吕玲娜马玙张宗德
- 关键词：结核分枝杆菌抗原免疫原性
- 甘露糖结合凝集素基因多态性与肺结核易感性关系的研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究甘露糖结合凝集素基因(MBL2)多态性与肺结核易感性的关系。方法采用PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对112例肺结核患者和120例健康对照DNA样本中MBL2-221位点和外显子区54号位点进行基因分型。结果肺结核病人和健康对照-221各基因位点之间有显著性差异(P<0.05)。在MBL2 6个单倍体型中,YA/YA基因型在肺结核病人和健康对照的比例分别为35.7%和49.2%,两者差异有统计学意义(P=0.038,OR值:0.57),XA/XA基因型则分别9.8%和1.7%(P=0.007,OR值:6.42),两者有显著性差异。肺结核病人-221位点和外显子区54号位点基因多态性除在不同年龄之间,初治与复治之间有显著性差异(P<0.05)外,其余临床特征与各位点基因多态性无关(P>0.05)。结论 YA/YA单倍体型可能是一种保护基因型,MBL基因多态性可能与肺结核易感性有关,并与肺结核病人复发等相关。
- 刘洋郭艳玲孙琦邢爱英傅瑜
- 关键词：甘露糖结合凝集素多态性结核易感性
- 结核分枝杆菌对氨基水杨酸耐药相关基因的筛选及鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的筛选二线抗结核药物对氨基水杨酸(para-aminosalicylic acid,PAS)的耐药相关基因。方法构建H37Rv转座子文库,筛选PAS耐药克隆,随机引物PCR扩增转座子插入突变基因。在PAS耐药菌株中鉴定耐药相关基因的突变情况。结果构建了较完整的H37Rv转座子文库,并筛选出201个PAS耐药克隆,经测序找到4个可能的PAS耐药相关基因,分别是Rv1534、pknF、ndh、papA1。papA1基因检测到一个无义突变,为papA1基因339位C→T点突变。结论酰基转移酶基因papA1可能为PAS耐药相关基因。
- 郑晓静杜博平贾红彦侯继增杨超高汉青杜凤娇邢爱英李自慧曹廷明张宗德李琦
- 关键词：结核分枝杆菌耐药对氨基水杨酸基因
- 结核分枝杆菌Rpf-DNA疫苗对感染小鼠免疫保护作用的研究
- 目的:评价结核分枝杆菌复苏因子DNA疫苗(Rpf-DNA)对结核分枝杆菌感染宿主的免疫保护作用。方法:分别构建Rpf D-DNA质粒疫苗和RpfE-DNA质粒疫苗。将BALB/C小鼠分为6组,每组30只,分别用空质粒、R...
- 邢爱英刘忠泉刘洋贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜凤娇杜博平古淑香张宗德
- 关键词：DNA疫苗结核分枝杆菌
- 文献传递
- 结核分枝杆菌Rv0808基因的克隆、表达、纯化及抗原性研究
- 2012年
- 目的克隆、表达和纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)体内诱导基因Rv0808,并制备多克隆抗体,研究其编码蛋白的抗原性,了解诊断应用价值。方法高保真PCR扩增Rv0808基因,克隆入表达载体pET-30a(+)后转化大肠杆菌BL21(DE3),测序正确的克隆用IPTG诱导表达。用镍柱纯化重组蛋白,然后用纯化蛋白免疫新西兰白兔,制备和纯化多克隆抗体。将重组蛋白分别与多克隆抗体和结核病患者血清进行Western blot鉴定,并尝试用多克隆抗体进行免疫组化染色检测巨噬细胞中M.tb。结果成功构建了pET-30a(+):Rv0808重组表达载体。经过重组蛋白的可溶性表达及纯化后,SDS-PAGE结果显示在66kD处有一单一蛋白条带。将此蛋白免疫新西兰白兔后获得了效价为6400的多克隆抗体。重组蛋白与多克隆抗体可以发生免疫反应,但却不能检测出结核患者血清中的相应抗体。用此多克隆抗体也无法检测出巨噬细胞中的M.tb。结论结核分枝杆菌Rv0808编码蛋白具有良好的免疫反应性和免疫原性,但可能对于结核病的诊断价值较小。
- 李自慧杜博平贾红彦古淑香邢爱英周立娟曹廷明郑晓静刘忠泉杜凤娇张宗德
- 关键词：结核分枝杆菌抗原
