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路凡: 作品数：58 被引量：166H指数：8; 供职机构：第四军医大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金军队杰出人才基金陕西省社会发展科技攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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两种不同剪接形式的小鼠ERA的细胞内定位: era基因是在测定大肠杆菌基因组序列时,在编码RNaseIII的rnc基因下游发现的一个开放读框,它编码的Era蛋白属于一类新的G蛋白家族,在结构上N端为GTP结合区,C端含有可与RNA结合的KH结构域.era基因细胞周...; 纪宗玲陈苏民陈南春刘继中吴元明路凡; 文献传递

三氧化二锑诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的研究被引量：3: 2002年; 目的　研究锑剂三氧化二锑 (Sb2 O3 )对早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的诱导作用 ,以寻求早幼粒细胞白血病治疗的新方法。方法　采用细胞生长曲线、形态学及硝基四氮唑蓝 (NBT)还原试验 ,判定NB4细胞的生长、分化及功能。采用细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡。结果Sb2 O3 能诱导早幼粒白血病细胞凋亡 ,且具有时间、剂量依赖性。结论　Sb2 O3 能有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡 ,提示锑剂诱导细胞凋亡的疗法。; 于文强孙秉中柴玉波赵忠良刘雪松纪宗玲路凡陈苏民; 关键词：三氧化二锑急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡

生长因子及维甲酸对外胚间充质细胞中DLX_1、DLX_2基因的调控作用被引量：1: 2002年; 目的 :探讨EGF、FGF2 、BMP2 和维甲酸对外胚间充质细胞中DLX1、DLX2 基因的调控作用。方法 :采用斑点杂交方法 ,分析不同因子作用的外胚间充质细胞中DLX1、DLX2 基因的表达水平。结果 :FGF2 及10 -6和 10 -7维甲酸作用后的外胚间充质细胞中DLX1、DLX2 基因的表达水平增加 ,而EGF作用后无明显变化。BMP2 作用后的外胚间充质细胞DLX2 基因的表达水平为对照组的 2倍 ,但DLX1基因则无明显变化。结论 :FGF2 、BMP2 及维甲酸可以调控外胚间充质细胞中DLX1、DLX2 基因的表达 ,进一步参与细胞分化。; 富明陆怀秀路凡肖明振牛忠英郭红延; 关键词：维甲酸外胚间充质细胞斑点杂交

人骨形成蛋白3在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化及其诱骨活性检测被引量：6: 2002年; 为了在昆虫杆状病毒系统中表达人骨形成蛋白 3(humanbonemorphogeneticproteoin3,hBMP3) ,检测表达产物的诱骨活性 .将hBMP3全长cDNA 1416bp克隆入转移载体K8中 ,再与病毒DNA经脂质体包裹后转染昆虫细胞Sf9.重组病毒经蓝白筛选后 ,用PCR方法扩增目的基因片段进行初步鉴定 .收集重组病毒的转染上清 ,肝素亲和层析纯化目的蛋白 .SDS PAGE和Western印迹进一步鉴定此蛋白 .体外培养MC3T3 E1细胞 ,经目的蛋白刺激后 ,检测细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 .并将目的蛋白进行小鼠体内肌肉包埋实验 ,检测其异位诱骨活性 .结果显示 ,肝素亲和层析可以收集 1个高的洗脱峰 .SDS PAGE显示 ,非还原型样本为 32kD的二聚体蛋白带和少量 16kD单体蛋白带 ;还原型样本仅有相应大小的单体蛋白带 ,纯度达 80 % .Western印迹在相应位置呈阳性染色 .此蛋白刺激小鼠成纤维细胞 4 8h后 ,胞内ALP的活性增高 ,经rhBMP3作用后的细胞MTT染色减弱 .在小鼠股部肌肉内包埋蛋白样品 2～ 3周 ,组织学检测有成骨组织生成 .说明hBMP3在此套系统中获得了表达 .表达产物在体外可以刺激成骨细胞的分化 ,却抑制细胞的增殖 .; 朱帮福卢兹凡陈苏民蒲勤路凡陈南春; 关键词：杆状病毒纯化

TFR和VEGF基因双顺反子慢病毒感染骨髓内皮祖细胞的研究: 2012年; 目的:研究转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFR)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的双基因共表达慢病毒载体是否能介导目的基因在中华小型猪骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中的有效表达。方法:通过分子克隆技术构建双顺反子慢病毒表达载体pLenti-GFP-TIR;分离培养中华小型猪骨髓EPCs,用流式细胞仪(FCM)检测细胞表面抗原CD31和Flk-1的表达;并利用Lipofectin 2000将含目的基因的转移质粒与pRsv-REV、pMDlg-pRRE及pMD2G共转染293T细胞并进行慢病毒包装。72 h后,收集病毒上清,感染中华小型猪骨髓EPCs,并通过RT-PCR法检测TFR和VEGF基因的表达。结果:①成功地构建了双顺反子慢病毒表达载体pLenti-GFP-TIR;②FCM检测证实,分离的细胞为骨髓EPCs;包装好的慢病毒颗粒可成功地感染中华小型猪骨髓EPCs;③RT-PCR法检测表明,TFR和VEGF呈高水平的表达。结论:TFR和VEGF基因双顺反子慢病毒载体Lenti-GFP-TIR可有效地转移目的基因至中华小型猪骨髓EPCs中,并成功地表达目的基因,为进一步探讨移植细胞分子成像奠定了基础。; 魏梦绮程康宦怡袁远孙立军路凡郑敏文; 关键词：双顺反子转铁蛋白受体内皮祖细胞

医学研究生分子生物学实验教学的体会被引量：9: 2006年; 分子生物学实验技术既是分子生物学的重要组成部分，也是学科藉以发展所不可或缺的工具。对于分子生物学实验课的教学，通过教学实践，对于实验课教学内容的安排、教学形式的选择以及追求怎样的教学效果等问题提出了思考与看法。; 路凡傅海燕卢兹凡; 关键词：分子生物学教学效果医学研究生

人era的结构特点分析及其定点突变体的构建被引量：4: 2002年; 目的　构建最近克隆的人era基因的定点突变体。方法　利用数据库对era的结构特点进行分析 ,在此基础上用改良的重叠延伸法分别构建人EraN端和C端的定点突变体。结果　获得了分别针对人EraN端TGP结合结构域 (位于2 9 - 36氨基酸残基 )和C端具有RNA结合活性的KH结构域 (位于 2 97- 340氨基酸残基 )的定点突变体。; 纪宗玲陈苏民陈南春吴元明刘继中路凡张俊杰; 关键词：结构特点定点突变体 ERA基因基因突变

带绿色荧光蛋白标签的人era真核表达载体的构建及人Era对细胞形态和细胞周期的影响被引量：5: 2003年; 目的 :构建人era真核表达载体并初步研究这一人类新基因对体外培养细胞形态和细胞周期的作用。方法 :构建带绿色荧光蛋白 (EGFP)标签的人era真核表达载体 ,转染体外培养细胞NIH3T3,用荧光显微镜观测和流式细胞仪进行分析。结果 :无论EGFP融合于人Era的C端或N端 ,融合蛋白均表达于细胞浆接近核膜处 ,细胞形态无明显变化 ,细胞周期检测S期细胞所占百分数降低。结论 :人era可能参与细胞周期调控 ,为阐明人era的功能提供了资料。; 纪宗玲陈苏民刘断中吴元明张俊杰路凡朱帮福李毅; 关键词：基因表达细胞形态细胞周期绿色荧光蛋白 ERA基因