葛飞娇
- 作品数：35 被引量：201H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金“首都临床特色应用研究”专项更多>>
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- 人MDM2基因真核表达载体的构建及其与p53的相互作用
- 2014年
- 目的:构建带Flag标签的MDM2真核表达载体,并检测MDM2与p53的相互作用。方法:从人乳腺文库中PCR扩增MDM2编码序列,将其插入pcDNA3.0-Flag载体,转染293T细胞后用Western印迹检测其在293T细胞中的表达,并通过免疫共沉淀实验检测MDM2与p53的相互作用。结果:双酶切和测序结果表明,Flag-MDM2真核表达载体构建成功,转染293T细胞后成功表达;免疫共沉淀实验证明Flag-MDM2与p53存在相互作用。结论:构建了带Flag标签的人MDM2真核表达载体,并检测了MDM2与p53之间的相互作用,为研究MDM2的功能奠定了基础。
- 叶晨阳徐建明林莉王岩葛飞娇赵传华李珊珊付亚莉李志强
- 关键词：MDM2P53克隆相互作用
- 血浆游离DNA的K—ras基因突变丰度与转移性结直肠癌患者疗效和预后的相关性被引量：7
- 2013年
- 目的探讨肽核酸钳制PCR（PNA-PCR）法和传统巢式PCR法检测血浆游离DNA中K—ras基因突变丰度与转移性结直肠癌患者疗效和预后的相关性。方法收集106例转移性结直肠癌患者外周血并提取血浆游离DNA，分别采用PNA-PCR法和传统巢式PCR法检测血浆游离DNA的K—ras基因状态。根据是否突变及突变丰度，将患者分为野生型组、低丰度突变组和高丰度突变组，分析K—ras基因突变丰度与患者疗效和预后的关系。结果106例患者肿瘤组织K—ras基因的突变率为40．6％，采用PNA—PCR法检测血浆游离DNA中K—ras基因的突变率为31．1％，显著高于传统巢式PCR法检测的K—ras基因的突变率（15．1％，P=0．006）。PNA—PCR法检测的血浆K-ras基因状态与肿瘤组织K—ras基因状态的检测一致率高达83．0％。野生型组（73例）、低丰度突变组（17例）和高丰度突变组（16例）患者的中位生存时间（OS）分别为23．5、17．3和13．9个月（P=0．002），其中各组一线单纯化疗者的中位无进展生存时间（PFS）分别为6．8、6．1和3．2个月（P=0．002），中位OS分别为23．0、15．5和13．9个月（P=0．036）。K—ras基因野生型患者一线接受西妥昔单抗联合化疗的有效率为75．0％，好于单纯化疗者（23．4％，P=0．058）；二线接受西妥昔单抗联合化疗的疾病控制率为100％，明显好于单纯化疗（35．7％，P〈0．001）。Cox多因素回归分析显示，PNA-PCR法检测血浆K—ras基因状态、ECOG评分、手术次数和首发转移部位均为影响转移性结直肠癌患者预后的独立因素。结论PNA—PCR法检测血浆游离DNA可替代肿瘤组织用于K-ras基因突变检测。血浆游离DNA的K—ms基因突变丰度是影响转移性结直肠癌患者预后的独立因素。
- 柏艳清刘晓静王岩葛飞娇赵传华付亚莉林莉徐建明
- 关键词：K-RAS基因预后
- 胸段食管鳞癌根治术后T3以上或淋巴结阳性患者接受辅助治疗的疗效分析
- 2015年
- 目的探讨胸段食管鳞癌R0切除术后p T3~4N0或p T1~4N1~3患者接受辅助治疗的临床疗效。方法回顾性分析2009年1月至2013年12月间收治的胸段食管鳞癌R0切除术后p T3~4N0或p T1~4N1~3患者接受术后辅助治疗的情况,共入组患者262例,根据术后辅助治疗情况分为单纯手术组（n=111）、辅助化疗组（n=91）和辅助放疗组（n=60）。采用Kaplan-Meier法计算生存率,Cox多因素回归法分析影响患者预后的独立因素。结果辅助放疗组和辅助化疗组患者的中位无病生存期（DFS）均优于单纯手术组（均P〈0.05）,但辅助放疗组与辅助化疗组间差异无统计学意义（P=0.664）。辅助放疗组和辅助化疗组患者的中位总生存期（OS）均优于单纯手术,差异均有统计学意义（均P〈0.05）,但辅助放疗组和辅助化疗组间差异无统计学意义（P=0.944）。对于p T3~4N0患者,辅助化疗组OS高于单纯手术组（P=0.042）;对于p T1~4N1~3患者,辅助放疗组及辅助化疗组OS均优于单纯手术组（均P〈0.05）,但辅助放疗组与辅助化疗组差异无统计学意义（P=0.310）。而对于局部浸润较深且淋巴结转移的p T3~4N0患者,辅助放疗组和辅助化疗组OS均优于单纯手术组（均P〈0.05）,且辅助放疗组也优于辅助化疗组（P=0.011）。Cox多因素回归分析显示,肿瘤部位、肿瘤浸润深度（p T）、病理淋巴结转移个数（p N）、肿瘤分析程度、术后治疗均为影响患者生存的独立预后因素（均P〈0.05）。结论对于p T1~4N1~3患者,术后辅助化疗或辅助放疗均可显著改善DFS和OS,其中p T3~4N1~3患者,辅助放疗获益更大。
- 姜玉勃王岩葛飞娇赵传华陈玉玲刘容锐林莉徐建明
- 关键词：鳞状细胞
- 不同方法检测K-Ras基因突变与转移性结直肠癌疗效及预后的关系被引量：2
- 2012年
- 目的探讨直接测序法和肽核酸钳制PCR(PNA-PCR)法检测K-Ras基因突变状态与转移性结直肠癌患者疗效及预后的相关性。方法收集110例转移性结直肠癌患者的石蜡包埋肿瘤组织,采用直接测序法和PNA-PCR法分别检测肿瘤组织的K-Ras基因第2外显子第12、13密码子的突变状态,并分析其与患者预后的关系。结果直接测序法检测到43例K-Ras基因突变,PNA-PCR法除了检测出这些突变之外,还在直接测序法检测的野生型中发现了10例突变。对K-Ras突变状态与患者的预后分析发现,直接测序法检测的K-Ras野生型及突变型患者的中位生存时间(OS)分别为20.5个月和15.6个月(P=0.067)。PNA-PCR法检测的野生型和突变型患者的中位OS分别为21.3个月和15.8个月(P=0.014)。两种方法检测的野生型与突变型的有效率和无病进展时间(PFS)差异均无统计学意义。按照这两种方法的检测结果分为3组,高突变组、低突变组和野生型组,仅高突变组与野生型组的OS差异有统计学意义(15.6个月vs.21.3个月,P=0.040)。Cox多因素分析显示,ECOG评分(HR=2.70,95%CI:1.39～5.25,P=0.003)和K-Ras丰度(HR=1.52,95%CI:1.52～2.19,P=0.026)与患者的预后相关。结论 K-Ras突变不是以伊立替康或奥沙利铂为主方案的疗效预测因子。PNA-PCR法检测的K-Ras突变状态与患者的预后有关。建议用PNA-PCR法确定野生型患者,而突变型患者则用直接测序法来确定。
- 刘晓静徐建明宋三泰葛飞娇林莉王岩刘烈军李珊珊刘建芝付亚莉姚凯
- 关键词：转移性结直肠癌K-RAS基因突变直接测序法预后
- 分子靶向药物给药模式对转移性结直肠癌患者生存的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨两种不同类型靶向药物在不同给药模式下对转移性结直肠癌(mCRC)患者生存的影响。方法回顾性分析135例接受过分子靶向治疗mCRC患者的临床病理特征、靶向治疗情况及随访资料,比较不同种类靶向药物及不同线数化疗联合靶向治疗对生存期(OS)的影响。结果全组中接受抗EGFR单抗者、接受贝伐珠单抗者及接受抗EGFR单抗+贝伐珠单抗者的中位OS依次为20.7、24.4和41.6个月,接受两种靶向药物者比仅接受一种靶向药物者的中位OS有明显延长(P<0.05);一线化疗未联合靶向治疗者的中位OS为30.8个月,与一线化疗联合靶向治疗者的21.5个月相比,差异无统计学意义(P>0.05);三线及以上联合靶向治疗者的中位OS为37.0个月,高于三线前均联合靶向治疗者的13.7个月,差异有统计学意义(P<0.05);接受过三种化疗药物(伊立替康、奥沙利铂、氟尿嘧啶)及贝伐珠单抗和抗EGFR单抗两种靶向药物的患者中,三线及以上使用靶向者的中位OS为50.6个月,与三线前使用靶向者的41.6个月比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论接受过两类靶向药物治疗的mCRC患者比仅接受一类靶向药物者可能获得更好生存获益。患者使用靶向药物的时机并非越早越好,肿瘤生物学行为较好的患者更适合先化疗后靶向的治疗模式。
- 李珊珊王岩葛飞娇林莉刘建芝徐建明
- 关键词：转移性结直肠癌
- 标准治疗失败的晚期结直肠癌患者采用重组抗肿瘤抗病毒蛋白注射液联合化疗的临床观察
- 2013年
- 目的探讨重组高效抗肿瘤抗病毒蛋白注射液(商品名:乐复能)联合常规化疗药物对在标准治疗失败的晚期转移性结直肠癌患者治疗的安全性和有效性。方法对13例经单药乐复能治疗后疾病进展但经研究判断存在获益的晚期结直肠癌患者,联合常规化疗药物治疗,观察用药后的近期疗效、生活质量和不良反应。结果可评价疗效的12例患者中,治疗2个周期以上获部分缓解(PR)2例,疾病稳定(SD)6例,疾病进展(PD)4例。3例生活质量(QOL)改善,6例QOL稳定,3例下降。主要不良反应为流感样症状、乏力、消化道反应和血液学毒性等,患者均可以耐受。结论乐复能联合常规化疗药物治疗晚期转移性结直肠癌有一定疗效且不良反应轻。
- 毛晓阳王岩林莉赵传华葛飞娇徐建明
- 关键词：结直肠肿瘤药物疗法
- 不同治疗模式对结直肠癌患者预后影响的回顾性分析被引量：4
- 2016年
- 目的探讨国内结直肠癌的临床治疗现状和对预后的影响。方法回顾性分析2006年1月至2012年7月间军事医学科学院附属医院收治的813例结直肠癌患者的临床资料,初诊无转移者499例,其中接受根治性手术484例,根据患者既往接受治疗的医院分为A级(省级和省级以上医院)和B级(地市级和地市级以下医院)。比较不同级别医院、不同治疗模式对结直肠癌患者预后的影响。结果 A级医院患者手术后中位无病生存期(DFS)和中位总生存期(OS)显著优于B级医院(P=0.01,P=0.05)。A级医院高危Ⅱ期和Ⅲ期患者接受辅助化疗比例显著高于B级医院(P=0.01)。A级医院患者辅助化疗的中位DFS和中位OS较B级医院明显延长(P<0.05,P=0.04)。254例接受根治手术的直肠癌患者中,有99例接受了围手术期放疗,Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期患者接受围手术期放疗比例分别为30.8%、25.5%和47.4%。338例术后复发转移的患者中,原发灶位于左半结肠患者的中位OS优于右半结肠者(P=0.05)。266例Ⅳ期患者中,接受根治性原发灶和转移灶切除手术患者的预后明显优于原发灶姑息性切除联合解救化疗、单纯解救化疗、仅接受局部治疗和未接受任何治疗的患者,差异有统计学意义(P=0.00)。结论不同级别医院在根治性手术和辅助化疗中存在较大差异,直接影响患者的预后。Ⅳ期患者应把握根治性原发灶和转移灶的切除机会,以获得长期生存。
- 崔莲刘容锐陈玉玲刘建芝刘烈军张允贾茹赵传华葛飞娇林莉王岩徐建明
- 关键词：结直肠肿瘤预后
- VEGFR-2、PDGFR-β和c-MET在肝细胞癌中的表达及预后分析被引量：6
- 2012年
- 目的探讨血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)、血小板衍生生长因子受体β(PDGFR-β)和c-MET在肝细胞癌(HCC)中表达的临床意义及对预后的影响。方法应用免疫组织化学法检测93例HCC组织中VEGFR-2、PDGFR-β和c-MET的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 VEGFR-2、PDGFR-β和c-MET在HCC组织中的高表达率分别为86.0%、19.4%和80.6%。VEGFR-2表达与性别、HBsAg状态、分化程度、肝硬化有关(P<0.05),PDGFR-β表达与AFP、肿瘤数目、肝硬化有关(P<0.05),c-MET表达与临床病理特征无关。Cox多因素回归分析显示,65例服用索拉非尼患者的无进展生存期(PFS)与年龄(P=0.047)有关,总生存期(OS)与HBsAg(P=0.037)、AFP(P=0.015)和肿瘤大小(P=0.003)有关;PDGFR-β表达水平与OS相关(P=0.046),c-MET与PFS相关(P=0.01)。结论 VEGFR-2在HCC合并肝硬化的患者中存在高表达,PDGFR-β高表达是HCC的预后不良指标,c-MET可能是HCC患者服用索拉非尼疗效的一个预测指标。
- 储节胜徐建明张博葛飞娇刘烈军赵传华王岩林莉付亚丽汪俊
- 关键词：肝细胞癌VEGFR-2PDGFR-ΒC-MET索拉非尼
- 转移性结直肠癌内科治疗进展被引量：1
- 2010年
- 结直肠癌是威胁人类健康的主要恶性肿瘤之一。近20年来,随着多学科综合水平的提高,使转移性结直肠癌的治疗效果取得了令人瞩目的进步,中位生存期已经从12个月延长至30个月[1]。可供选择的化疗药物也从上世纪的单药氟尿嘧啶发展到目前奥沙利铂、伊立替康、卡培他滨、替吉奥等。分子靶向药物在转移性结直肠癌的治疗发展也非常迅速,西妥昔单抗、贝伐单抗、帕尼单抗联合化疗进一步提高了疗效和延长生存。
- 徐建明葛飞娇
- 关键词：转移性结直肠癌FOLFOX靶向药物治疗联合化疗方案西妥昔单抗内科治疗
- 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂ZD1839与奥沙利铂联合对人肺癌A549细胞的作用被引量：1
- 2007年
- 背景与目的:ZD1839是一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶的小分子抑制剂,是目前肺癌分子靶向治疗中较为成熟的药物,因其单药临床有效率低,如何与化疗联合提高抗癌效应受到关注。本实验通过研究ZD1839联合奥沙利铂的不同给药方案对人肺腺癌细胞A549的杀伤作用,探讨两药联合的最佳模式。方法:以药物联合效应测定方法,评价ZD1839和奥沙利铂不同给药顺序对A549细胞的抑制作用,以流式细胞仪测定不同联合方案对A549细胞周期分布及凋亡率的影响。观察ZD1839、奥沙利铂不同给药方案作用时,裸鼠A549细胞移植瘤生长情况,测定肿瘤生长抑制率。结果:先奥沙利铂后ZD1839的序贯给药方案表现出明显的协同作用,药物联合指数为0.51±0.01;而先ZD1839后给予奥沙利铂时,药物联合指数为1.56±0.03,两药间为拮抗作用。先奥沙利铂后ZD1839组G2/M期细胞比例与其他组相比明显增加,达到37.9%(P<0.05),细胞凋亡率达到22.3%。体内实验表明,先奥沙利铂后ZD1839组抑瘤率最高,达到58.9%;而先奥沙利铂+ZD183924h后ZD183948h组的抑瘤率为52.4%,ZD1839后奥沙利铂组的抑瘤率为30.6%。结论:先奥沙利铂后ZD1839序贯给药对A549细胞增殖的抑制作用更强。
- 赵传华袁守军王岩葛飞娇罗卫东徐建明
- 关键词：A549细胞表皮生长因子受体ZD1839奥沙利铂抑瘤作用
