徐敏
- 作品数：13 被引量：26H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科委基金国家科技部专项基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 雉鸡结核病综合防制技术
- 程世鹏王克坚陈立志刘晓颖张洪英张洪涛徐敏李丹丽钱国成徐海峰
- 首先对雉鸡结核病进行了广泛的流行病学调查，确定了雉鸡结核病的流行规律。系统分离鉴定了雉鸡结核病的病原菌为禽型结核分枝杆菌。利用禽型结核分枝杆菌，应用菌体沉淀凝集、超生波裂解和菌体脂多糖提取等方法制备了特异血清学诊断抗原。...
- 关键词：
- 关键词：兽医学血清诊断免疫化学疫苗
- 弹性硬蛋白溶解试验鉴别反刍动物腐蹄病节瘤拟杆菌强毒株
- 1999年
- 根据腐蹄病节瘤拟杆菌毒力菌株具有溶解弹性硬蛋白的特性，利用弹性硬蛋白培养基建立了弹性硬蛋白溶解试验，以鉴别节瘤拟杆菌强毒株。试验表明，将不同毒力的菌株同时接种于弹性硬蛋白培养基，蛋白溶解带出现的时间和宽度都显著不同，强毒株大多在７ｄ内，少部分在７～１１ｄ内均出现一条明显的蛋白溶解带；而弱毒株在２１ｄ内基本上未见蛋白溶解带出现。
- 王克坚陈立志刘晓颖徐敏徐敏
- 关键词：腐蹄病节瘤拟杆菌
- 家兔病毒性出血症组织灭活苗免疫效果观察
- 1991年
- 应用山农88分离株免瘟毒接种健康家免,取其24～48小时死亡免的肝、脾、肾、心等实质脏器研制成组织灭活苗。试验表明,该苗安全有效,6个月以上仍具有可靠保护力,现场应用免疫效果良好。
- 王克坚程世鹏吴威张洪英钱国成徐敏许德生
- 关键词：家兔病毒性出血症
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达被引量：2
- 2002年
- 用 PCR从腐蹄病 C型节瘤拟杆菌扩增出具有免疫保护性抗原 0 .85 kb纤毛蛋白基因 (pili基因 ) ,并构建了该基因的表达载体。转化宿主细胞 PAK/2 pfs,在营养肉汤中进行 pili基因的表达。培养 18～ 2 4h后 ,收集培养液上清 ,加入 0 .1mol/L Mg Cl2 ,离心提取重组纤毛蛋白。用羊抗兔 C型节瘤拟杆菌抗血清与提取的纤毛蛋白进行对流免疫电泳试验 ,结果表达的重组纤毛蛋白有特异性 ;用 SDS- PAGE和 Western- blot证明表达的蛋白是 C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白。
- 苗利光王克坚陈立志刘晓颖徐敏刘艳环
- 关键词：腐蹄病基因克隆基因表达反刍动物
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 用 PCR技术从腐蹄病 C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体。提取 C型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行 PCR,扩增出 pili基因 ;将 pili基因克隆于 TE载体 ,TE-pili重组质粒 pili基因序列测定结果正确 ,用 Eco R 酶切 ,低熔点胶回收 pili基因片段 ,经 klenow补平后 ,用 T4DNA连接酶将其与中间载体p PLλ连接 ,将 pili基因克隆于 p PLλ载体 ,经Bam H 、Bam H +Hind 、Dral酶切鉴定 pili基因正向插入 p PLλ载体 ;扩增 p PLλ-pili重组质粒 ,用 Bam H 酶切出 2 .1 kb大小片段 ,回收后 ,与 PME2 90表达质粒连接 ,转化宿主细胞PAK/ 2 pfs中 ,对获得的重组质粒用 Bam H 酶切 ,出现 2 .1 kb大小的带 。
- 苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛
- 关键词：腐蹄病基因克隆
- 鹿源坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB)94抗原的免疫原性被引量：7
- 2002年
- 将坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94厌氧培养后 ,裂解制备抗原 ,在抗原悬液中加入等量福氏完全佐剂 ,配制成乳化抗原 ,以此分别接种 3组 9只家兔 ,并设立对照组。初次免疫后 7d进行第 2次免疫 ,每隔 1周采血 ,检测免疫兔血清中抗体滴度 ,2 8d后免疫兔分别用 2 m L 的 10 8个菌 /m L(2个 ML D)坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94感染 ,3只对照家兔同时感染相同剂量 ;逐日观察攻毒家兔的变化。结果 ,3只对照家兔于感染后的 12～ 2 1d死亡 ;而 9只免疫兔完全能抵抗毒力菌株的感染 ,6个月后仍存活。试验表明 ,坏死梭杆菌分离株 FN(AB) 94裂解抗原加佐剂后 ,具有良好的免疫原性。
- 王克坚刘晓颖陈立志苗立光徐敏张洪涛宁德吉
- 关键词：坏死梭杆菌毒力菌株免疫原性
- 致病性鹿源坏死梭杆菌分离鉴定被引量：12
- 2000年
- 应用厌氧培养技术 ,从患坏死杆菌病鹿的病变坏死组织和脓汁中分离出一种主要的病原菌 ;通过细菌形态学、染色反应、培养特性、生化试验、血清学反应等鉴定方法 ,确定该病原分离株为严格厌氧性坏死梭杆菌 ,分型鉴定为A、AB和B型 ;实验动物感染证明A和AB型坏死梭杆菌为致病性菌株。
- 王克坚张洪英陈立志刘晓颖程世鹏徐敏钱国成
- 关键词：坏死杆菌病坏死梭杆菌
- 雉鸡结核间接血凝试验研究
- 1990年
- 通过试验,首次将间接血凝试验应用于雉鸡结核的诊断。初步建立了用于雉鸡结核的间接血凝试验方法,其敏感性高于平板凝集试验,是一种较为快速、敏感的血清学检测方法。
- 王克坚钱国成程世鹏林伟孙福林吴玉环邹彩云张立新徐敏
- 关键词：雉鸡结核病血凝试验
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与序列分析
- 2002年
- 提取C型节瘤拟杆菌染色体DNA。用PCR技术从腐蹄病C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,将PCR产物pili基因克隆于TE载体 ,在含X - gal和IPTG的AmpLB平板上 ,挑选白色单一菌落进行质粒的筛选 ,用EcoR1酶切提取重组质粒 ,琼脂糖凝胶电泳 ,出现一条 0 .85kb的条带 ,从而筛选出TE - pili重组质粒。对 pili基因进行序列测定 ,结果与国外报道的 pili基因序列一致。
- 苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛
- 关键词：腐蹄病基因克隆反刍动物
- 应用PPA-ELISA检测雉鸡血清中抗结核抗体的研究
- 1991年
- 用建立的检测雉鸡血清中抗结核抗体的 PPA-ELISA法与平板凝集法同时检测216份雉鸡血清,阳性率分别为54.2%(117份)和43.1%(93份).证明 PPA-ELISA法对于雉鸡结核病诊断具有较高的敏感性和特异性.
- 王克坚钱国成程世鹏林伟张立新徐敏
- 关键词：雉鸡PPA-ELISA血清结核抗体
