刘晓颖
- 作品数：93 被引量：126H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组绵羊白细胞介素2基因的分泌性表达及表达产物的提取
- 2002年
- 将构建的绵羊白细胞介素2基因表达菌株(PMPOIL2)接种在营养肉汤培养基上,培养20h,分别收集菌体及上清液。菌体超声裂解;上清液中的蛋白质分别用MgCl2、(NH4)2SO4、NaCl沉积。用抗Pilin-IL2血清检测菌体裂解物及上清沉淀物,结果上清沉淀物中有凝集抗原,而菌体中没有,并且(NH4)2SO4沉积的效果最好。
- 刘艳环苗利光陈立志刘晓颖张洪涛
- 关键词：绵羊分泌性表达
- 致病性坏死梭杆菌溶胶原蛋白提取与毒性分析
- 2013年
- 为验证坏死梭杆菌的溶胶原活性以及溶胶原蛋白在细菌感染宿主早期的可能作用,本研究利用超声波破碎处理、离子交换层析和凝胶过滤技术,从坏死梭杆菌国内流行株(AB株)的菌体分离获得一种具有溶解牛Ⅱ型胶原蛋白能力的溶胶原活性蛋白(CP)。CP的相对分子量约为50 ku,CP的胶原酶活力为20.3 U/mL。将其腹腔接种小鼠,纯化的CP可诱导小鼠出现皮下坏死病灶,肝、脾脏肿大等症状;组织病理学分析表明CP导致小鼠肝细胞出现大面积坏死,并形成肉芽肿病症;另外,CP对小鼠肝细胞(NCTC 1469)表现出细胞毒性作用,出现多种超微结构变化特征,但小鼠巨噬细胞(Ana-1)对CP的敏感性相对较弱。研究结果表明,本研究分离获得的CP的生物学特性与已报道的坏死梭杆菌毒力因子的生物学特性截然不同,推测CP可能是一种新型毒力因子,可能在细菌感染宿主早期入侵宿主过程中发挥重要作用。
- 冯二凯王燕刘晓颖陈立志徐晶王秀东冯卓
- 关键词：坏死梭杆菌毒力因子细胞毒性
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达被引量：2
- 2002年
- 用 PCR从腐蹄病 C型节瘤拟杆菌扩增出具有免疫保护性抗原 0 .85 kb纤毛蛋白基因 (pili基因 ) ,并构建了该基因的表达载体。转化宿主细胞 PAK/2 pfs,在营养肉汤中进行 pili基因的表达。培养 18～ 2 4h后 ,收集培养液上清 ,加入 0 .1mol/L Mg Cl2 ,离心提取重组纤毛蛋白。用羊抗兔 C型节瘤拟杆菌抗血清与提取的纤毛蛋白进行对流免疫电泳试验 ,结果表达的重组纤毛蛋白有特异性 ;用 SDS- PAGE和 Western- blot证明表达的蛋白是 C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白。
- 苗利光王克坚陈立志刘晓颖徐敏刘艳环
- 关键词：腐蹄病基因克隆基因表达反刍动物
- 鸵鸟新城疫免疫程序介绍被引量：1
- 2004年
- 刘晓颖
- 关键词：鸵鸟新城疫免疫程序症状
- 鹿布氏杆菌病的常用检测方法
- 2012年
- 鹿布氏杆菌病是由布氏杆菌（Brucella）引起的一类人兽共患的急、慢性传染病，在我国某些养鹿场中时有发生。大多数鹿感染布氏杆菌病后没有明显的临床表现，很难通过流行病学和临床症状进行确诊。目前对于鹿病的诊断多采用血清学及病原学检测方法，消除鹿布氏杆菌病最有效的方法是准确的诊断后，大规模地屠宰病鹿并进行无害化处理，从而有效地切断传染源。
- 刘晓颖程世鹏冯二凯陈立志
- 关键词：布氏杆菌病养鹿场慢性传染病人兽共患临床症状
- 貉缺硒病的防治
- 2005年
- 刘晓颖姜成李沐森
- 关键词：缺硒病临床症状病理变化
- 坏死梭杆菌斑马鱼模型建立与LD_(50)的测定被引量：1
- 2012年
- 建立斑马鱼人工感染坏死梭杆菌动物模型。牛源坏死梭杆菌FN(AB)株以3×1010cfu/mL、3×109cfu/mL、3×108cfu/mL、3×107cfu/mL不同菌量,腹腔接种斑马鱼,定时观察斑马鱼的发病和死亡情况,建立动物感染模型。FN(AB)对斑马鱼的半数致死量(LD50)为1.06×106cfu/尾;感染发病鱼呈现出侧游、腹水、注射部位出血红肿等症状,肝脏、肾脏、肠道出现明显的病理学变化。斑马鱼可作为坏死梭杆菌致病性研究的动物模型。
- 曹阅陈立志刘晓颖冯二凯汪孙杰徐晶冯卓
- 关键词：坏死梭杆菌斑马鱼动物模型半数致死量
- 腐蹄病C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因的克隆与表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 用 PCR技术从腐蹄病 C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原 0 .85kb纤毛蛋白基因 ( pili基因 ) ,利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体。提取 C型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行 PCR,扩增出 pili基因 ;将 pili基因克隆于 TE载体 ,TE-pili重组质粒 pili基因序列测定结果正确 ,用 Eco R 酶切 ,低熔点胶回收 pili基因片段 ,经 klenow补平后 ,用 T4DNA连接酶将其与中间载体p PLλ连接 ,将 pili基因克隆于 p PLλ载体 ,经Bam H 、Bam H +Hind 、Dral酶切鉴定 pili基因正向插入 p PLλ载体 ;扩增 p PLλ-pili重组质粒 ,用 Bam H 酶切出 2 .1 kb大小片段 ,回收后 ,与 PME2 90表达质粒连接 ,转化宿主细胞PAK/ 2 pfs中 ,对获得的重组质粒用 Bam H 酶切 ,出现 2 .1 kb大小的带 。
- 苗利光王克坚刘艳环陈立志刘晓颖徐敏张洪涛
- 关键词：腐蹄病基因克隆
- 坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段的原核表达及抗血清制备
- 2008年
- 本研究以国内分离的牛源坏死梭杆菌F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增BSBSE片段,克隆到pMD18-T载体上,鉴定并测序正确后,构建pET32a-BSBSE表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导、SDS-PAGE检测重组蛋白表达、Western blot检测重组蛋白反应原性。以该重组蛋白免疫兔制备抗血清,经间接ELISA检测抗血清效价。结果表明,PCR扩增得到1100bp的BSBSE片段,以此片段构建了pET32a-BSBSE表达质粒,经诱导后获得了目的蛋白表达,以Western blot检测该重组蛋白证明为本研究的目的蛋白,并且与抗体具有反应原性。以间接ELISA检测该重组蛋白免疫兔制备的抗血清效价达105。研究结果将为坏死梭杆菌毒力因子(lkt)的深入研究奠定了物质基础。
- 张秀华陈立志赵利芳刘晓颖路伟
- 关键词：坏死梭杆菌
- 一种水貂用福利玩具
- 本实用新型涉及一种水貂用福利玩具，包括：玩具框架，所述玩具框架上部设有供水貂穿行的网托结构；所述网托结构为矩形筒形状；所述玩具框架顶端四个角上均设有垂直的玩具支架，在所述玩具支架的顶端设有挂钩机构；所述玩具框架底部左右两...
- 张海华李光玉王士勇刘晓颖南韦肖张铁涛钟伟常忠娟王卓
- 文献传递
