巫玮
- 作品数：11 被引量：39H指数：2
- 供职机构：广东食品药品职业学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 利用体内噬菌体展示技术筛选及鉴定肺癌特异性结合肽被引量：2
- 2010年
- 目的利用体内噬菌体展示技术筛选并鉴定与肺癌特异性结合的多肽。方法用肺癌细胞A549接种裸鼠复制荷瘤动物模型,将随机肽库尾静脉注入裸鼠体内,循环15 min后取肿瘤组织中结合的噬菌体,如此进行3轮体内筛选后挑取噬菌体克隆,ELISA初步鉴定噬菌体克隆对肺癌细胞的亲和力、特异性。将阳性噬菌体克隆扩增、测序获得外源多肽氨基酸序列,化学方法合成多肽,鉴定多肽对肺癌细胞和组织的亲和力、特异性。结果ELISA结果显示,随机挑选的20个噬菌体单克隆中,1个对A549具有很强亲和力。测序获得多肽,命名为zp2。化学合成多肽zp2。竞争抑制、细胞免疫荧光和组织免疫荧光实验结果表明多肽zp2与肺癌细胞A549及肺癌组织特异性结合。结论利用体内噬菌体展示技术筛选出与肺癌细胞A549特异性结合的多肽,为肺癌诊断及治疗药物的研制奠定基础。
- 潘琴石磊潘雪刁冯冰虹巫玮王素军王桂香王来友金桂芳臧林泉
- 关键词：A549噬菌体随机肽库特异性结合肽
- 肺癌细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的筛选能与肺癌细胞特异性结合的多肽并初步鉴定其亲和力和特异性。方法用人肺癌细胞A549使裸鼠致瘤,尾静脉注射肽库。取荷瘤鼠的肿瘤组织,用体内噬菌体展示技术进行筛选;经过3轮体内筛选,获得在肿瘤组织中富集的噬菌体;利用ELISA和细胞免疫化学DAB染色法初步鉴定各克隆亲和力、特异性;对阳性克隆行DNA测序,利用生物信息学对此多肽进行分析、比对。结果随机挑选的10个单克隆中,8个均对A549细胞具有较高亲和力,其中3号克隆亲和力最高,其可特异性结合肺癌细胞A549和NCI-H1299,且对A549的亲和力强于NCI-H1299。DNA测序结果显示该序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性。结论筛选出了能与肺癌细胞特异性结合的多肽。
- 潘琴石磊潘雪刁巫玮金桂芳臧林泉
- 关键词：肺癌细胞特异性结合肽
- N-软脂酰基壳聚糖的制备及其改善靛玉红水溶性的药动学研究被引量：2
- 2009年
- 目的制备N-软脂酰基壳聚糖(PLCS)纳米胶束,改善难溶性药物靛玉红的溶解性与生物利用度。方法首先使用溶胀的壳聚糖与软脂酸酐在二甲基亚砜溶剂中反应合成水溶性的PLCS,通过IR和1H-NMR表征PLCS的结构;然后用其负载靛玉红,以激光散射和透射电镜检测载药纳米胶束的物理特征,用HPLC法测定其包封率。最后进行载药纳米胶束腹腔注射给药后在大鼠体内的药动学实验,与靛玉红混悬剂对照。结果合成得到的PLCS能很好地负载并增溶靛玉红,载药率可达10%左右。药动学研究表明,用PLCS载靛玉红后较靛玉红混悬剂的AUC提高了2.21倍,显著提高了靛玉红在大鼠体内的生物利用度。结论PLCS可作为提高难溶性药物靛玉红生物利用度的有效载体,进而可能改善靛玉红治疗白血病的疗效。
- 王来友蒋刚彪方羽生巫玮臧林泉曾明华
- 关键词：靛玉红纳米胶束药动学
- 龙眼果核中没食子酸的体外美白作用及机制探索被引量：2
- 2015年
- 目的：观察从龙眼果核中提取分离的没食子酸对小鼠黑色素瘤B16细胞的作用及对其黑色素合成的影响,探索其作用机制。方法：体外培养小鼠黑色素瘤B16细胞,利用不同质量浓度没食子酸处理一定时间,采用四甲基唑氮蓝（MTT）法观察其对细胞增殖的影响,测定细胞内黑色素的含量变化,观察没食子酸对黑色素合成的影响;通过形态学观察,Hoechst33342染色法及逆转录聚合酶链式反应判断药物抑制细胞的作用方式以及对细胞中酪氨酸酶表达变化的影响,研究其减少黑色素分泌的作用机制。结果：当没食子酸质量浓度1~64 mg·L-1时,药物对B16细胞抑制作用变化明显,药物作用24,48,72 h时的半抑制浓度分别为32.29,22.47,18.68 mg·L-1。没食子酸能明显减少B16细胞中黑色素的含量,在一定范围内,与药物作用的质量浓度及作用时间呈正相关;其对B16细胞的抑制作用及黑色素分泌的影响在不同质量浓度下通过不同方式起作用,在较低质量浓度（≤16 mg·L-1）时,药物通过凋亡的方式起抑制作用,在较高质量浓度（〉16 mg·L-1）时,其通过直接杀伤的方式起抑制作用;在没食子酸质量浓度≤32 mg·L-1时,能明显减少B16细胞中酪氨酸酶的表达。结论：没食子酸对B16细胞具有明显的抑制作用,并可降低细胞中黑色素的含量。没食子酸对B16细胞中酪氨酸酶表达具有明显抑制作用。
- 黄海潮郑公铭张小红聂阳巫玮
- 关键词：没食子酸龙眼分子机制半抑制浓度
- 噬菌体随机肽库淘选肺癌细胞NCI-H1299特异性结合多肽被引量：7
- 2009年
- 目的利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础。方法以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性。结果经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为PhageZS6。细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS6对NCI-H1299具有高亲和力。结论利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
- 石磊潘雪刁王军业潘琴巫玮金桂芳房思练侯炳忠何兴祥臧林泉
- 关键词：噬菌体肽库多肽肺癌
- 原代神经元及PC12细胞用于药物体外急性毒性评价的实验研究被引量：2
- 2009年
- 【目的】研究原代神经元及PC12细胞用以评价药物或化合物的急性毒性，以判断是否可以替代动物实验，为建立稳定的体外高通量筛选化合物和药物的急性毒性评价体系奠定基础。【方法】原代分离培养大鼠皮质神经元，传代培养大鼠类神经元细胞——PC12细胞，取17种药物和化合物，分别稀释不同浓度，与上述两种细胞分别孵育24h，与空白对照组比较，以MTT法检测药物／化合物对细胞的抑制率，据此量效曲线计算出IC50，与大鼠口服LD50进行相关性分析。【结果】体外神经元的IC50与体内LD50相关性为：R^2=0．7253，PC12细胞毒性检测结果的IC50与动物体内急性毒性LD50相关性为：R^2=0．6441，二者均有明显相关性。【结论】利用体外分离培养的原代神经元以及PC12细胞，在短时间（24h）内可以评价药物或化合物的急性毒性，并可以预测化合物对人及动物的毒性，基本可以替代或减少动物实验。
- 巫玮周捷潘雪刁潘琴石磊臧林泉
- 关键词：细胞毒性免疫神经元PC12细胞
- 噬菌体肽库与NCI-H1299细胞筛选肺癌特异性结合多肽ZS-9的初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的:利用噬菌体肽库与肺癌NCI-H1299细胞筛选出肺癌特异性结合的多肽,研究其亲和力和特异性。方法:以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,与噬菌体随机十二肽库进行三轮筛选,挑取单克隆扩增并测序,进行生物信息学分析、比对;利用ELISA、细胞免疫化学、组织免疫化学方法测定多肽的亲和力和特异性。结果:经过三轮减性筛选发现,随机挑选的9个单克隆中,其中1个对NCI-H1299和A549均具有较高亲和力,将其命名为ZS-9,测序结果为CAT AAT AAG CAT CTT CCG TCT ACG CAG CCT CTT GCG,根据测序结果推导出ZS-9的氨基酸序列HNKHLPSTQPLA,生物信息学分析表明ZS-9的氨基酸序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性,表明我们筛选到一种新的肺癌相关抗原的配体。结论:利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞NCI-H1299和A549具有较高亲和力的多肽ZS-9,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础。
- 王军业石磊戴淑琴潘琴巫玮臧林泉戎铁华
- 关键词：噬菌体肽库
- 利用RNAi沉默KIAA0280后对缺氧诱导大鼠神经元凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的利用RNA干扰（RNAi）技术，观察脑缺血相关新蛋白KIAA0280被特异性沉默后对正常神经元和缺氧诱导神经元凋亡的影响。方法取新生大鼠培养至5-7d的神经元，经由密闭容器引起缺氧诱导神经元凋亡模型。采用RNAi技术封闭KIAA0280的表达，观察该基因被封闭后对正常神经元的生长以及缺氧诱导神经元凋亡的作用和影响。结果脂质体转染KIAA0280基因特异性siRNA 12、24h后对正常细胞生长具有一定的影响；在此基础上缺氧4、8h，发现RNAi组的神经元对缺氧诱导的神经元凋亡比对照组对缺氧更加敏感，更易受损伤。结论KIAA0280对正常神经元具有一定的作用，并且对缺氧诱导凋亡神经元具有一定的保护作用。
- 黄海潮潘雪刁金桂芳巫玮潘琴石磊臧林泉
- 关键词：RNAI缺氧神经元凋亡
- 人参皂苷Rb_3对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用被引量：17
- 2008年
- 目的探讨3种人参皂苷Rb3对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用。方法将48只大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、人参皂苷Rb320、40、80 mg/kg组和阳性对照药血栓通注射液(XST)组;采用插线法使大脑中动脉闭塞(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血模型,于造模24 h后进行行为学评分,测定脑组织含水量以及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,计算脑梗死面积百分比,并进行组织病理学检查。结果人参皂苷Rb340、80 mg/kg能明显缓解脑缺血大鼠的行为学症状,减轻其脑水肿程度,降低血清中MDA含量,升高SOD含量,并能减少其脑梗死面积,减轻组织病理学损伤。结论人参皂苷Rb3对大鼠局灶性脑缺血损伤有较明显的保护作用。
- 胡瑜陈浩凡臧林泉巫玮
- 关键词：脑缺血人参皂苷RB3
- 布南色林对H_2O_2引起的PC12细胞损伤的神经保护作用研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨布南色林对H_2O_2引起的大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用。方法取对数生长期PC12细胞,接种于96孔板,每孔加入终浓度为分别为0、5、10、20、40、80及160μmol·L^(-1)的布南色林,观察不同浓度布南色林对PC12细胞增殖的影响。另取细胞,分为空白细胞对照(C)组,H_2O_2处理(H)组,布南色林-H_2O_2处理(B)组,阳性对照(维生素E-H_2O_2处理,E)组)。MTT法检测各组细胞的活性变化。用TUNEL法检测各组细胞凋亡情况;倒置显微镜直接观察法以及Hoechst33258染色法观察氧化损伤细胞的形态变化;生化法测定各组细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量的改变。结果合适浓度的布南色林(0~20μmol·L^(-1))能促进PC12细胞的生长。与C组比较,H组的细胞活性下降,凋亡指数增加(P<0.05);细胞碎片增多,细胞损伤明显;细胞内的SOD活性减低,MDA水平增高(P<0.05)。与H组比较,B组的细胞活性增强,凋亡指数下降(P<0.05);细胞形态部分恢复;细胞内的SOD活性增强,MDA含量降低(P<0.05)。结论布南色林对H_2O_2引起的神经损伤有保护作用。
- 黄海潮巫玮张小红聂阳刘经亮周捷
- 关键词：PC12细胞神经保护超氧化物歧化酶丙二醛
