潘雪刁 作品数:75 被引量:234 H指数:10 供职机构: 广东药科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
肺癌细胞特异性结合肽的体内筛选及初步鉴定 被引量:2 2008年 目的筛选能与肺癌细胞特异性结合的多肽并初步鉴定其亲和力和特异性。方法用人肺癌细胞A549使裸鼠致瘤,尾静脉注射肽库。取荷瘤鼠的肿瘤组织,用体内噬菌体展示技术进行筛选;经过3轮体内筛选,获得在肿瘤组织中富集的噬菌体;利用ELISA和细胞免疫化学DAB染色法初步鉴定各克隆亲和力、特异性;对阳性克隆行DNA测序,利用生物信息学对此多肽进行分析、比对。结果随机挑选的10个单克隆中,8个均对A549细胞具有较高亲和力,其中3号克隆亲和力最高,其可特异性结合肺癌细胞A549和NCI-H1299,且对A549的亲和力强于NCI-H1299。DNA测序结果显示该序列与美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank DNA序列数据库和Swiss-Prot蛋白数据库中的已知基因和蛋白无同源性。结论筛选出了能与肺癌细胞特异性结合的多肽。 潘琴 石磊 潘雪刁 巫玮 金桂芳 臧林泉关键词:肺癌细胞 特异性结合肽 羊藿巴戟口服液对去势大鼠雌二醇的影响及机制 被引量:1 2013年 目的观察羊藿巴戟口服液对去势大鼠血清雌二醇水平的影响,初步探讨其补肾滋阴作用。方法 48只雌性SD大鼠进行腹腔假手术或切除双侧卵巢,随机分为假手术组、模型对照组、己烯雌酚阳性对照组(2.25×10^(-5)g·kg^(-1))、羊藿巴戟口服液低剂量组(1.0 g·kg^(-1))、中剂量组(3.0 g·kg^(-1))和高剂量组(6.0 g·kg^(-1)),连续给药15 d后,采用HPLC法检测血清雌二醇水平,并解剖称取肾上腺和子宫质量,计算脏器系数。结果与模型对照组比较,羊藿巴戟口服液呈剂量依赖性地增加去势大鼠肾上腺和子宫的脏器系数(P<0.05,P<0.01);羊藿巴戟口服液高剂量组大鼠血清雌二醇水平升高(P<0.05)。结论羊藿巴戟口服液具有一定的补肾滋阴作用。 潘雪刁 蔡帆 徐铮弟 张海涛 臧林泉 张建华关键词:淫羊藿 巴戟天 雌二醇 去势大鼠 肺癌血清中特异性结合多肽的筛选 被引量:1 2010年 目的以肺癌血清从噬菌体展示肽库中筛选出能够用于血清学筛查和肺癌病理分型的多肽。方法利用M13噬菌体随机12肽展示肽库对24例临床确诊肺癌患者的血清和24例体检者的血清进行4轮吸附-洗脱的筛选。挑取筛选后的噬菌体单克隆,皆以血清和细胞株进行试验,选出特异性及确诊率较高的单克隆。目标单克隆通过DNA测序确定其所表达的多肽序列,进而人工合成带FITC标记的多肽,以肺癌细胞、正常肺细胞和肺癌组织切片进行荧光成像检测。结果随机挑取30个经过4轮筛选的噬菌体单克隆,通过血清和细胞株的试验,筛选出6个特异性和确诊率较高的单克隆,其中单克隆ZZ-8肺癌血清确诊率达到41.6%,且鳞癌的比例较高。ZZ-8经DNA测序分析,确定其表达的多肽序列为:APTPSTQMNLLP。FITC标记的多肽在细胞和组织切片的荧光成像检测中,均显示良好的特异性。结论人工合成的多肽ZZ-8能够为研发肺癌诊断试剂奠定基础。 周捷 臧林泉 冯文彬 潘雪刁 王军业 郭桐 王秀芳 田亮 刘海洋关键词:噬菌体展示肽库 肺癌血清 芹菜素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及机制研究 被引量:10 2016年 目的探讨芹菜素对胃癌细胞SGC-7901增殖及葡萄糖摄取的影响及其可能的内在机制。方法采用MTT法检测不同剂量不同作用时间芹菜素对SGC-7901细胞增殖的影响;采用葡萄糖检测试剂盒检测芹菜素对SGC-7901细胞葡萄糖摄取量的影响;蛋白免疫印迹实验检测芹菜素作用SGC-7901细胞后,葡萄糖转运体1(GLUT1)和己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)表达水平的影响。结果芹菜素对胃癌细胞SGC-7901具有增殖抑制作用,并具有一定的剂量和时间依赖性,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);芹菜素干预后的SGC-7901细胞的葡萄糖摄取量明显减少,芹菜素10μmol/L和20μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);一定剂量的芹菜素能下调SGC-7901细胞中GLUT1、HKⅡ蛋白的表达水平,具有一定的时间和剂量依赖性。结论芹菜素能抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖和葡萄糖摄取的作用,其机制可能与调控GLUT1、HKⅡ蛋白表达水平有关,为临床胃癌的诊断和治疗提供了一定的理论基础。 刘欢 杨周萍 金桂芳 王桂香 潘雪刁关键词:芹菜素 人胃癌SGC-7901细胞 细胞增殖 葡萄糖摄取 基于特异性结合多肽ZS-1的肺癌新肿瘤标志物的筛选 被引量:3 2010年 目的:利用本实验室已获得的与肺癌特异性结合的十二肽ZS-1(EHMALTYPFRPP)从人类肺癌cDNA文库中筛选出肺癌相关标志物,并进行初步确认,为肺癌的临床早期诊断和靶向治疗奠定基础。方法:本实验以ZS-1为探针,通过将偶联生物素的多肽ZS-1固化在亲和素处理的酶标板,筛选人类肺癌cDNA噬菌体展示文库,经过三轮减性筛选后,挑取与ZS-1特异性结合的噬菌体单克隆、扩增、纯化,再通过PCR技术扩增、产物纯化后,进行DNA测序,测序结果经过生物信息学分析,随后采用组织芯片技术对相关生物大分子进行了检测。结果:通过生物信息学分析首次发现与ZS-1结合的肺癌细胞膜受体蛋白为KIAA1199,随后以KIAA199抗体检测人肺癌组织芯片证实,KIAA1199的阳性检出率为32.8%。结论:从人类肺癌cDNA噬菌体展示文库中筛选出潜在的肺癌肿瘤标志物KIAA1199,为肺癌的早期诊治奠定基础。 王素军 潘雪刁 臧林泉 王桂香 石磊 谢海棠关键词:CDNA文库 肺癌 肿瘤标志物 精脒对SW620细胞增殖及糖酵解的影响 被引量:2 2016年 目的探讨精脒对人结肠癌SW620细胞增殖及糖酵解的影响。方法以SW620细胞为研究对象,用0.625~2.5μmo L/L精脒(SPD)作用于细胞,细胞密度以104个/m L接种于96孔培养板,分别培养24 h后,MTT法检测细胞增殖情况;同时,取6孔板培养24 h的细胞上清液,用试剂盒检测SW620细胞葡萄糖消耗及乳酸水平;细胞密度以1.2×10~5个/m L接种于6孔培养板中,培养24 h后加入不同浓度SPD,继续培养24 h后,Western blot检测缺氧诱导因子(HIF-1)、乳酸脱氢酶(LDHA)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的变化。结果与对照组比较,精脒各浓度组均能促进SW620细胞的增殖(P〈0.01),且促进作用呈剂量依赖性;精脒各浓度组作用后SW620细胞内葡萄糖的消耗及乳酸含量明显增多(P〈0.01),呈剂量依赖性;与对照组比较,LDHA、HIF-1及GLUT1蛋白表达水平随着精脒浓度的升高而增加(P〈0.01),且呈剂量依赖性。结论精脒具有促进人结肠癌SW620细胞增殖及糖酵解的作用。 张芬 吴燕燕 臧林泉 潘雪刁 王桂香关键词:精脒 SW620细胞 细胞增殖 糖酵解 喘可治口服液抗过敏作用的实验研究 2013年 [目的]研究喘可治口服液的抗过敏作用。[方法]观察不同剂量喘可治口服液对磷酸组胺所致豚鼠皮肤过敏反应的影响,计算过敏反应的致痒阈值。用2,4-二硝基氯苯(2,4-DNCB )对昆明小鼠皮肤致敏和诱发制成迟发型超敏反应模型。将小鼠随机分为5组,即模型对照组、阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,连续灌胃10 d ,d9对小鼠右耳激发过敏。观察记录激发后各组小鼠左右耳耳郭肿胀度、肿胀率、抑制率、胸腺指数及脾脏指数。利用卵白蛋白做抗原,百日咳疫苗做佐剂,制取大鼠抗过敏血清。同种雄性大鼠随机分为5组,即模型对照组、阳性对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。将抗血清皮内注射于各组大鼠背部皮肤,利用抗原攻击,同时尾静脉注射1%伊文思蓝溶液,剪下带蓝斑皮肤于丙酮-生理盐水(7∶3)溶液,检测吸光度值。[结果]高剂量能明显提高组胺所致豚鼠致痒阈值,与模型对照组相比阈值差异有显著性。与模型对照组比较,高、中、低三剂量组小鼠耳郭的肿胀度、肿胀率、抑制率以及胸腺指数和脾脏指数均有所下降。高剂量组、中剂量组均能明显地抑制同种大鼠的被动皮肤过敏反应。[结论]喘可治口服液具有一定抗过敏及抗迟发型超敏反应作用,其中高剂量组作用较显著。 王红珊 巫玮 廖瑞斌 汪园 徐铮弟 潘雪刁 蔡帆 张建华关键词:哮喘 药物疗法 过敏反应 药学类院校研究生培养机制的改革 被引量:1 2011年 在认真分析药学类研究生培养机制和模式所存在问题的基础上,提出较为详细的对策。在入学录取制度改革、培养学制改革、理论课学习模式改革以及奖励激励机制的建立等方面作了较为深入的探讨。 臧林泉 潘雪刁 高君森 刘太胜关键词:研究生教育 培养机制改革 药学教育 灯盏乙素纳米混悬液的制备及其表征 2017年 目的:制备灯盏乙素纳米混悬液(SCU-NS),并考察制备过程中的主要影响因素。方法:通过试验确定制备工艺参数,采用单因素试验初选SCU-NS的制备条件,以Zeta电位为评价指标,采用正交试验设计法确定最优处方。结果:所得较优的处方为:0.5 g药物、0.1 g泊洛沙姆188、0.2 g卵磷脂、0.05 g十二烷基硫酸钠(SDS)、0.05 g羟丙甲纤维素E5(HPMC E5),制得的SCU-NS粒径为(122±4)nm,Zeta电位为(-25.5±0.6)m V。透射电镜结果显示SCU-NS呈球形且粒径均一,30 min时的溶出率大于90%。结论:纳米混悬液能显著提高药物的溶出度。 刘壬通 潘雪刁 罗小慧 林伟斯 刘文婷 杨智承关键词:灯盏乙素 正交设计 基于受体配体结合技术研究酸枣仁镇静催眠活性成分 被引量:14 2016年 目的利用受体配体结合法探索酸枣仁中镇静催眠的活性成分,以及该成分的镇静催眠作用机制与苯二氮卓受体的关系。方法首先,对酸枣仁中的化学成分进行乙醇粗提;其次,制备Wistar大鼠脑组织匀浆液;根据受体-配体结合原理,采用体外饱和分子竞争的方法,利用高浓度的地西泮作为阳性竞争药,竞争低浓度的酸枣仁中可与脑组织中苯二氮卓受体结合的配体化合物;收集这些镇静催眠有效化合物,利用HPLC和LC-MS方法对酸枣仁与脑组织孵育提取化合物、地西泮与脑组织孵育提取化合物、地西泮+酸枣仁与脑组织孵育提取化合物进行谱图表征差异性分析鉴定,以确认被地西泮竞争置换出的酸枣仁中的有效镇静催眠化合物。结果 HPLC检测结果显示,与地西泮组、酸枣仁+地西泮组对比,酸枣仁作用组在出峰时间2.71min和46.87min处出现特殊峰。LC-MS检测结果表明,酸枣仁中与苯二氮卓受体结合的配体化合物分别为274.28 m/z、453.34 m/z、496.34 m/z和608.38 m/z,根据酸枣仁指纹图谱的比对这些化合物可能是脂肪酸类物质和三萜类化合物。结论利用受体配体结合技术的原理,结合HPLC和HPLC-MS分析技术研究酸枣仁中镇静催眠活性成分,实验结果发现,酸枣仁中镇静催眠的活性成分可能是脂肪酸类物质棕榈酸(palmitic acid,C_(16)H_(32)O_2)、三萜类化合物麦珠子酸(alphitolic acid,C_(30)H_(48)O_4)和斯皮诺素(spinosin,C_(28)H_(32)O_(15)),这3种化合物由于与地西泮竞争结合苯二氮卓受体,可能具有类似的镇静催眠作用,这为进一步开发新型镇静催眠药奠定了理论基础。 李佳虹 唐旗羚 郭纪全 王其友 祝曙光 王有娣 杨晨 高思远 刘金泳 高瑞萍 王军业 叶晓琼 潘雪刁 臧林泉关键词:酸枣仁 苯二氮卓受体 地西泮 镇静催眠