唐红
- 作品数：53 被引量：54H指数：4
- 供职机构：新疆农垦科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项兵团博士基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 转IGF-1基因超细毛羊与非转基因羊肠道粪便菌群多样性及组成差异分析被引量：3
- 2020年
- 旨在探究超细毛羊转入IGF-1基因后是否会引起超细毛羊肠道微生物菌群群落改变而导致转基因羊生物安全存在隐患的问题。本研究在同一羊场随机选取临床健康羊3组,其中转IGF-1基因阳性组(GP组)41只(24母(GDF),17公(GPM)),转基因阴性羊(GN组)43只(25母(GNF),18公(GNM)),非转基因超细毛羊(NG组)29只(18母(NGF),11公(NGM))。取直肠粪样,应用IIlumina HiSeq高通量测序技术测定粪便样本中细菌的16S rRNA V3-V4区序列,分析转基因超细毛羊与非转基因羊间肠道粪样细菌群落组成。结果表明,共计得到17个门,32个纲,56个目,94个科,228个属及185个种;LEfSe分析显示,GPF组有10个生物标记物;GPM组有5个,均是反刍动物肠道菌群的常见定植菌;NGF组的生物标记物为拟杆菌BS11科;NGM组为厚壁菌门。均为反刍动物肠道菌群的主要优势菌。3组肠道菌群的共享菌分析显示,在门纲目科属种6个分类水平拥有共享菌比例高达91%~94%。本研究证实,转入IGF-1基因并未改变超细毛羊肠道菌群的整体结构分布,转基因羊具有生物安全及环境安全性。
- 王新华张星星王立民黄新韩猛立张译元郭延华唐红何延华钟发刚周平
- 关键词：IGF-1基因超细毛羊细菌多样性转基因生物安全
- 基因先决育种法和克隆技术在绵羊新品种(系)培育中的创建和应用
- 刘守仁周平代蓉甘尚权万鹏程王立民杨华卢守亮唐红张宾郭延华沈敏高磊杨井泉刘长彬
- 基因先决育种法是经过刘守仁院士带领的研究团队总结了长年绵羊新品种培育方法和经验，成功创建的绵羊育种新方法，它通过基因位点标记的定位和诊断，准确地测定出绵羊理想性状的主效基因，然后利用携带主效基因的个体进行血亲级进杂交繁殖...
- 关键词：
- 关键词：绵羊克隆技术
- 适用于圈舍饲养家畜的可视耳标
- 本实用新型涉及一种适用于圈舍饲养家畜的可视耳标。一种适用于圈舍饲养家畜的可视耳标，包括公件与母件，母件包含母件本体，在母件本体上设有锥孔、凸帽、金属尖头容纳腔，所述凸帽内部为空腔，形成金属尖头容纳腔；公件包含公件本体，在...
- 郭延华李迎利张译元尹聂生唐红贾开建王立民陈宁周平刘长彬石国庆王新华
- 文献传递
- 用于核移植盲吸法去核体积的数学模型构建方法
- 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于核移植盲吸法去核体积的数学模型构建方法，主要包括以下步骤:将绵羊排出第一极体的成熟卵母细胞移入染色液中染色，放入显微镜下观察染色体与第一极体的相对位置，呈现一定规律等；在不同时间段...
- 郭延华皮文辉万鹏程王立民甘尚权张译元唐红倪建宏代蓉周平王新华
- 胚胎分割液及分割方法对绵羊体外胚分割效果的影响
- 2009年
- 主要研究了胚胎分割液、分割方法和胚胎发育时期对绵羊体外生产胚胎的影响。体外采集绵羊卵丘卵母细胞复合体,成熟培养24 h,经过体外受精培养,得到体外胚胎样品。借助显微操作仪,将体外受精的桑葚胚和囊胚分割,体外培养半胚,观察其发育情况。结果发现:在D-PBS+0.2 mol/L蔗糖液与D-PBS+5%PVP液中分割桑葚胚和囊胚,其分割成功率及半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数三者均无差异显著性(P>0.05);用显微分割法和徒手分割法分割桑葚胚和囊胚,其分割成功率、半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数均无差异显著性(P>0.05);比较桑葚胚和囊胚分割,囊胚的分割成功率显著高于桑葚胚的分割成功率(P<0.05),而半胚的囊胚发育率及半胚细胞数均无差异显著性(P>0.05)。结果表明:在D-PBS液中分别添加0.2 mol/L的蔗糖和5%的PVP都可作为绵羊体外胚的胚胎分割液;显微分割法和徒手分割法均可用于绵羊体外胚胎的分割;囊胚比桑葚胚更适于胚胎分割。
- 张宾石国庆唐红
- 关键词：绵羊体外胚胎胚胎分割
- 角蛋白HGTP及其对羊毛发育的影响被引量：4
- 2011年
- 羊毛的主要成分是角蛋白,其组分高甘氨酸-酪氨酸蛋白(HGTP)家族成员KAP6、KAP7和KAP8基因表达对羊毛细度和弯曲等特性具有重要影响。本文从羊毛的组成、角蛋白的生物学特征以及HGTP基因定位和表达对细度的影响等方面进行了综述,旨在为羊毛发育调控研究提供理论参考。
- 石国庆管峰唐红倪建宏代蓉沈敏柳楠
- 关键词：羊毛角蛋白
- 绵羊胚胎FGF5基因单碱基突变体系的建立被引量：1
- 2021年
- 研究旨在利用单碱基编辑技术定点修饰绵羊(Ovis aries)成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5,FGF5)基因第1外显子以引入终止密码子,获得定点编辑类型的绵羊胚胎,为培育具有长毛性状的绵羊提供试验材料。首先设计合成4个单导向RNA(single guide RNA,sgRNA)寡核苷酸链(sgRNA-T1~sgRNA-T4),构建4组不同的重组表达载体;将构建好的pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin和pCMV-AncBE4max-P2A-GFP质粒以共转染的方法分别转入4组绵羊成纤维细胞,随后用CruiserTM酶对转染的细胞进行活性检测并在胚胎水平进行测序验证。结果显示,sgRNA-T1和sgRNA-T4组细胞的PCR产物可被CruiserTM酶酶切,且测序结果表明都具有靶向效果,编辑效率分别为68.75%和47.37%。利用显微注射技术将不同浓度的AncBE4max mRNA与有效sgRNA混合注射到绵羊孤雌激活胚胎中,并检测胚胎卵裂率、囊胚率和编辑效率,结果显示,胚胎水平的最佳注射浓度组合为AncBE4max(ng/μL)∶sgRNA(ng/μL)=100∶50,从该浓度组中随机挑选的单枚胚胎测序结果显示,引入终止密码子的编辑效率为80%。而sgRNA-T1在不同浓度组合的注射胚胎中均未检测到编辑。本研究针对FGF5基因的第1外显子,通过在成纤维细胞转染表达载体,成功筛选到高效靶向绵羊FGF5基因的2个sgRNA(T1、T4);通过显微注射绵羊孤雌激活胚胎,成功在胚胎上实现FGF5基因第1外显子打靶位点C→T的转变,为后期FGF5基因定点编辑羊的生产奠定基础。
- 蒙亚琦姚旭东任秀美奥郭延华唐红张译元王立民周平
- 关键词：绵羊
- 利用CRISPR/Cas9n系统编辑绵羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因
- 2022年
- 成纤维细胞生长因子5(FGF5)是影响毛囊周期性活动及毛发生长的重要生长因子。本研究利用CRISPR/Cas9n系统靶向编辑绵羊成纤维细胞中FGF5基因。首先利用Gibson Assembly法将U6启动子引导表达单导向RNA(sgRNA)的原件构建至pX461质粒中,获得pX461-U6质粒;再将设计并合成好的1对靶向FGF5基因第3外显子的sgRNA及其互补链,经退火连接形成sgRNA-sg1和sgRNA-sg2双链后,分别克隆至带有BbsⅠ和BsaⅠ黏性末端的pX461-U6质粒。构建好的重组质粒pX461-U6-sg1+sg2经测序鉴定后,以电转染的方式转入绵羊成纤维细胞,72 h后收集细胞进行检测分析。经T7E1酶切检测分析表明,成功获得1对具有靶向效果的sgRNA,PCR扩增的FGF5基因片段经TA克隆后进行测序鉴定,结果sgRNA-sg1+sg2在靶位点的打靶效率为100%;缺失的核苷酸数从10到64个不等;基于预测的3D模型和RT-PCR结果显示,FGF5基因的突变将会影响FGF5蛋白与其受体的结合,导致FGF5蛋白失去其生物学功能。本研究构建了可以在同一载体中同时表达2条sgRNA和Cas9n以及绿色荧光蛋白(GFP)的质粒,瞬时转染至绵羊成纤维细胞后,成功获得了高效靶向绵羊FGF5基因的sgRNA位点,为精确和高效的靶向基因工程提供了科学依据。
- 蒙亚琦姚旭东任秀美奥郭延华唐红张译元王立民周平
- 关键词：绵羊基因敲除
- 绵羊体细胞核移植融合效率影响因素的研究被引量：3
- 2014年
- 【目的】提高克隆胚胎融合率。【方法】从受体卵母细胞的细胞松弛素处理组与对照组,供体细胞的梯度差速选择(胰酶浓度0.1%、0.25%,消化时间3 min、1 min)和4组电脉冲融合参数(100 V、120 V、130 V、150 V)等3个环节对绵羊体细胞核移显微操作进行了优化,以重构胚胎的融合率和卵裂率作为检测指标。【结果】未经细胞松弛素的卵母细胞组融合率显著高于试验组(P<0.05),而胚胎卵裂率差异不显著(P>0.05);胰酶梯度差速消化供体细胞具有初选作用,各组融合率为71.71%、75.86%、78.75%、75.56%,融合压为130 V时融合率最高。【结论】优化后的程序更适合克隆胚胎的膜融合。
- 郭延华王立民唐红张译元周平
- 关键词：细胞松弛素胰酶膜融合
- 绵羊母源基因TRIM28克隆、表达及生物信息学分析
- 2017年
- 为了研究TRIM28基因在绵羊早期克隆胚胎发育过程中基因组去甲基化与重新甲基化及其维持的机制,探索母源关键基因在体细胞克隆效率中的作用,本研究通过提取中国美利奴细毛羊卵巢组织RNA,经反转录获得cDNA,利用特异性引物扩增TRIM28基因编码区序列,测序后采用生物信息学软件对编码区序列及氨基酸序列进行相关生物信息学分析和结构预测,进一步采用RT-PCR对绵羊不同组织中TRIM28表达量进行检测。结果显示:克隆获得了绵羊TRIM28基因编码区序列全长2441bp,编码811个氨基酸。生物信息学分析结果表明,不同物种TRIM28基因编码区核苷酸和氨基酸序列具有较高保守性。组织表达谱结果显示,TRIM28 mRNA在中国美利奴细毛羊肺脏、脾脏和卵巢中高丰度表达,且与Zfp57表达情况一致。结论:TRIM28基因结构和进化方面高度保守,推测其在不同组织中行使转录中介因子这一特定的生物学功能相关,TRIM8与ZFP57复合体在分化组织中对基因组甲基化的维持起着重要作用。
- 罗健王立民张译元郭延华唐红周平刘守仁
- 关键词：DNA甲基化生物信息学
