周其峰
- 作品数：2 被引量：24H指数：2
- 供职机构：中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金贵州省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外定向诱导小鼠胚胎干细胞发育为造血干/祖细胞方法的初步研究被引量：20
- 2003年
- 目的 :探讨体外定向诱导胚胎干细胞 (ESC)发育为造血干细胞 (HSC)的方法。方法 :将小鼠E14胚胎干细胞在含干细胞生长因子 (SCF)和血管内皮生长因子 (VEGF)的甲基纤维素培养基中首先诱导发育为胚胎体(EB) ,再将EB置于均含SCF、VEGF、IL - 3、IL - 6及促红细胞生成素 (EPO)的 3种不同培养体系中定向分化为HSC ,并观察HSC表面标志性抗原、造血集落形成及瑞氏 -姬姆萨染色的结果。结果 :经两阶段诱导ESC分化为HSC ,发现在甲基纤维素半固体培养体系中HSC发育缓慢 ,分化 14d后CD34+/Sca - 1+细胞数最高为 ( 31 5± 4 7) %;而在骨髓基质细胞饲养层上HSC发育较快 ,细胞数量较多 ,分化第 10dCD34+/Sca - 1+细胞数即达到峰值 ,为 ( 47 8±6 3) %;骨髓基质细胞饲养层 +胎肝基质细胞上清培养体系中HSC发育同样迅速 ,所产生的CD34+/Sca - 1+细胞数量在 3个体系中最高 ,为 ( 5 3 6± 7 2 ) %。经瑞氏 -姬姆萨染色证实上述细胞为早期造血细胞 ,均有形成各系造血细胞集落的能力。结论 :使用骨髓基质细胞饲养层 +胎肝基质细胞上清培养体系及SCF、VEGF、IL - 3、IL - 6及EPO等细胞因子 ,通过两阶段诱导分化 ,可从小鼠ESC获得较高比例的HSC。
- 何志旭黄绍良周其峰李树浓
- 关键词：骨髓细胞体外定向
- 两步法体外定向诱导小鼠胚胎干细胞发育为CD_(34)^+/Sca-1^+造血干细胞的研究被引量：7
- 2004年
- 目的 建立一种体外诱导胚胎干细胞 (embryonicstemcell,ESC)定向发育为CD+ 3 4 /Sca 1+ 造血干细胞 (hematopoieticstemcell,HSC)的实验方法。方法 联合应用血管内皮生长因子(vascularendothelialcellgrowthfactor ,VEGF)、干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)、白细胞介素 3(interleukin 3,IL 3)、白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )和促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)分阶段首先诱导ESC形成富含CD+ 3 4 /Sca 1+ 细胞的胚胎体 (embryoidbody ,EB) ,然后分别观察EB细胞在甲基纤维素半固体培养体系和骨髓基质细胞饲养层培养体系中进一步分化为HSC的情况。结果VEGF联合其他细胞因子能有效促进EB中HSC的形成 ,CD+ 3 4 /Sca 1+ 细胞数高达 (13 72± 1 92 ) %。收获此阶段的EB进一步诱导发现 ,甲基纤维素培养体系造血克隆形成率明显低于骨髓基质细胞培养体系 ,在甲基纤维素中CD+ 3 4 /Sca 1+ 细胞数最高只能达到 (2 0 5 2± 2 78) % ,而基质细胞中CD+ 3 4 /Sca 1+ 细胞数可达 (34 6 0± 3 71) % (t=5 2 6 ,P <0 0 0 1)以上 ,且来自骨髓基质细胞培养体系的造血分化细胞在造血集落培养时能形成类型和数量更多的造血克隆。结论 使用VEGF联合SCF、IL 3、IL 6、EPO分阶段诱导ESC形成富含CD+ 3 4
- 何志旭黄绍良周其峰李树浓
- 关键词：CD34^+SCA-1^+细胞造血干细胞小鼠胚胎体外定向诱导
