刘红兵
- 作品数：8 被引量：71H指数：3
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- 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在重组痘苗病毒中的表达及对重组病毒免疫效果的影响
- 1998年
- 目的观察人ＧＭ－ＣＳＦ（粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子）对重组痘苗病毒免疫效果的影响。方法大鼠体内观察。结果从核酸和蛋白水平均证实重组痘苗病毒ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ／ＧＭ－ＣＳＦ可同时表达ＧＭ－ＣＳＦ及ＨＳＶ－１ｇＤ（单纯疱疹病毒ｇＤ糖蛋白），但ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ／ＧＭ－ＣＳＦ免疫大鼠产生的抗－ＨＳＶ１ｇＤ特异性抗体水平与ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ组相比无显著性差异。结论人ＧＭ－ＣＳＦ在大鼠体内对特异免疫调节作用不明显，可能与ＧＭ－ＣＳＦ主要促使非特异性细胞免疫增强所致有关。
- 刘红兵张智清姚立红侯云德
- 关键词：痘苗病毒单纯疱疹病毒GM-CSF
- 应用硫氧还蛋白促进外源蛋白在大肠杆菌的可溶性表达被引量：22
- 1999年
- 为了观察硫氧还蛋白（ＴｒｘＡ）促进外源蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的作用，我们从质粒ｐＥＴ－３２ａ（＋）上克隆了ｔｒｘＡ基因，构建了ＴｒｘＡ表达质粒ｐＴ－ＴｒｘＡ。将该质粒与其它蛋白基因的表达质粒共同转化Ｅｃｏｌｉ并同时获得表达。结果表明，共表达ＴｒｘＡ可以明显促进外源蛋白，如甲状旁腺激素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）、ＰＴＨｒＰ受体（ＰＴＨｒＰ－Ｒ）和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的可溶性表达。说明共表达ＴｒｘＡ有助于外源蛋白的正确折叠，防止包涵体的形成。
- 安乃莉张智清王嵩刘红兵曾革非姚立红陈爱君
- 关键词：硫氧还蛋白共表达外源蛋白大肠杆菌
- GM-CSF(12-127)突变体生物学活性的研究被引量：4
- 1996年
- GM－CSF的结构与功能研究表明，N-端的1～13位氨基酸并非生物学活性所必需，且干扰与受体的结合。作者采用PCR突变的方法删除1～11位的氨基酸，保留12位的脯氨酸。突变后的基因经全序列测定证实，之后插入原核高效表达载体pBV220中表达，基因突变后的表达量及表达产物的稳定性均有所提高。大批量表达后经提取包涵体、疏水层析、离子交换层析，最终获得了纯的GM－CSF（12－127）突变体蛋白，其生物学活性比未突变蛋白有明显提高，达3×107U／mg蛋白。受体竞争结合实验显示突变体蛋白受体亲和活性增强。
- 李福胜张智清邵华刘红兵侯云德
- 关键词：GM-CSF粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 海南省虫媒病毒调查被引量：3
- 1993年
- 从海南省儋县地区的蝙蝠、致乏库蚊、三带喙库蚊分离到10株病毒,经初步鉴定,7株为甲属披膜病毒(其中1株为基孔肯雅病毒),1株环状病毒,2株弹状病毒科Rables组病毒。
- 董必军陈玉本陈文洲李秀维刘红兵邝继深阚飙
- 关键词：环状病毒虫媒病毒
- 全文增补中
- PTHrP受体胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 1999年
- ＰＴＨｒＰ（甲状旁腺激素相关蛋白，Ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ）与多种肿瘤的生物学行为有关，尤其对肿瘤的骨转移起重要作用。应用其可溶性受体阻断它的病理作用是一个非常值得研究的课题。从肾癌组织中提取ＲＮＡ，采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）方法获得ＰＴＨｒＰ受体Ｎ端胞外区５４３碱基对的带信号肽的ｃＤＮＡ片段。将其核苷酸序列与国外发表的资料相比，基因中第２６２位核苷酸由Ｔ变为Ｃ，相应密码子由ＴＡＣ变为ＣＡＣ，导致氨基酸变异，即由酪氨酸变为组氨酸。将获得的受体基因克隆到原核表达载体ｐＥＴ３ａ，在大肠杆菌得到高效表达，经ＥＬＩＳＡ证实表达产物可与ＰＴＨｒＰ特异性结合。体外生物学活性检测表明表达产物可阻断ＰＴＨｒＰ的生物学活性。
- 钭理强张智清刘红兵周小明周小明安乃莉周小明熊卫东
- 关键词：甲状旁腺激素相关蛋白受体大肠杆菌
- 应用固定化金属亲和层析纯化His6融合甲状旁腺激素相关蛋白被引量：2
- 1999年
- 应用原核细胞高效表达载体在大肠杆菌表达了N端带 6个组氨酸的重组人PTHrP。利用其对金属鳌合层析介质的亲合性 ,采用含盐咪唑梯度洗脱 ,一步纯化即可得到纯度大于 90 %且具有生物学活性的重组PTHrP ,并进一步制备了抗PTHrP单克隆抗体。应用His6纯化标签的固定化金属亲和层析 (IMAC) ,极大地方便了目的蛋白的纯化 ,为进一步研究PTHrP的生物学特性及其在临床诊断治疗中的应用奠定了基础。
- 钭理强周小明刘红兵安乃莉姚立红郭应禄张智清
- 关键词：PTHRPIMAC纯化
- 用逆转录病毒载体表达人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子被引量：2
- 1995年
- 应用基因工程的方法，将含有巨细胞病毒（ＣＭＶ）启动子的基因片段和人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）的ｃＤＮＡ，克隆进逆转录病毒载体Ｎ２Ａ，得到重组质粒Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ｈＧＭ－ＣＳＦ．经脂质体包装并转染包装细胞，通过Ｇ４１８药物筛选，得到抗性克隆。经ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｍｂｌｏｔ检测证实，ＧＭ－ＣＳＦ基因已整合到该克隆细胞的染色体上，获得的逆转录病毒滴度达１０￣４ＣＦＵ／ｍｌ，克隆细胞培养上清用ＴＦ－１细胞可检测到ＧＭ－ＣＳＦ活性。
- 陈庆华张智清宋永胜李福胜刘红兵姚立红李玉英侯云德
- 关键词：重组逆转录病毒基因工程
- 首次从海南岛蚊虫和蝙蝠中分离出两株基孔肯雅病毒被引量：38
- 1993年
- 作者从海南省儋县地区蚊虫和蝙蝠分离出的两株病毒,电镜观察为球形,直径为50～65nm,对2～3日龄小白鼠能致死,在C6/36白纹伊蚊细胞、BHK_(21)细胞组织培养中增殖并产生明显的病变,经理化和生物学鉴定,对酸,乙醚均敏感,属RNA病毒,经血清学鉴定为基孔肯雅病毒。
- 董必军陈文州李秀维刘红兵陈玉本阚飙邝继琛
- 关键词：基孔肯雅病毒致乏库蚊蝙蝠
