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农君: 作品数：11 被引量：14H指数：3; 供职机构：广西医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广西科技厅资助项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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眼镜蛇毒细胞毒素-4N的纯化制备方法及其应用: 本发明公开了一种眼镜蛇毒细胞毒素‑4N的纯化制备方法，先采用DEAE‑SepharoseCL‑6B阴离子交换柱然后再利用SephadexG‑50凝胶层析柱、Macro‑prep High S阳离子交换柱依次进行分离，每次...; 张学荣孙林罗小玲廖明班建东蔡凤桃陈缨农君王秀南余雷; 文献传递

血浆纤维蛋白原测定方法的建立及蝮蛇毒灌胃对小鼠纤维蛋白原浓度的影响: 目的用国产试剂建立克劳斯法并以此法检测江浙蝮蛇毒灌胃对小鼠血浆纤维蛋白原（fibrinogen,Fib）影响。方法用国产凝血酶和Fib标准品建立克劳斯法Fib定量测定方法,对方法进行线性、重复性、准确性、影响测定的实验因...; 张学荣廖秋源陈缨农君舒雨雁; 关键词：纤维蛋白原凝血酶血浆蝮蛇毒; 文献传递

眼镜蛇毒细胞毒素‑4N的纯化制备方法及其应用: 本发明公开了一种眼镜蛇毒细胞毒素‑4N的纯化制备方法，先采用DEAE‑SepharoseCL‑6B阴离子交换柱然后再利用SephadexG‑50凝胶层析柱、Macro‑prep High S阳离子交换柱依次进行分离，每次...; 张学荣孙林罗小玲廖明班建东蔡凤桃陈缨农君王秀南余雷

广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子基因在NIH3T3细胞中的表达被引量：1: 2010年; 目的:构建广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子(NGF)基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NGF,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法:采用RT-PCR的方法扩增蛇毒NGF的基因片段,将目的基因、真核表达载体pcDNA3.1(-)分别酶切后回收,连接、转化而构建重组表达载体pcDNA3.1(-)-NGF,经酶切和测序对重组体进行鉴定。利用脂质体Lipofectamine～(TM) 2000方法转染NIH3T3细胞,对阳性克隆裂解上清中NGF的表达用SDS-PAGE、Western-blot的方法检测。结果:重组载体经酶切、测序分析,插入的基因片段为表达蛇毒NGF的基因,NGF基因在NIH3T3细胞中获得表达。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-NGF,并检测出在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步开展NGF基因治疗神经系统的疾病奠定了实验基础。; 石庆秋张学荣宋慧班建东韦敏农君陈缨; 关键词：眼镜蛇蛇毒 NIH3T3细胞 NGF基因蛇毒神经生长因子 WESTERN-BLOT

眼镜蛇毒神经生长因子在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用: 本发明公开了眼镜蛇毒神经生长因子在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用。研究表明，眼镜蛇毒神经生长因子可诱导HSC-T6凋亡，在细胞水平上具有抗肝纤维化作用，在动物体内也具有抗肝纤维化作用，能够有效抑制或减轻肝纤...; 张学荣罗小玲赖允丽廖明林兴胡仁统班建东廖共山陈缨农君; 文献传递

蛇毒神经生长因子对大鼠肝星状细胞凋亡及蛋白质表达的影响: 【目的】:探讨眼镜蛇毒神经生长因子（NGF）对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）增殖、凋亡以及蛋白质表达差异的影响,进一步为蛇毒NGF抗肝纤维化提供依据。【方法】:实验分为对照组（单纯HSC-T6培养）和实验组（NGF进行干...; 胡仁统张学荣徐瑾罗小玲林兴廖明班建东陈缨农君舒雨雁; 关键词：流式细胞技术双向电泳技术; 文献传递

广西眼镜蛇毒细胞毒素-1对人肝星状细胞LX2的选择性抑制作用被引量：3: 2019年; 肝纤维化是肝硬化、肝癌和肝功能衰竭的共同病理基础和必经阶段,特征是肝内细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积。肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)是合成ECM的关键细胞,因此抑制其增殖并诱导其凋亡是抗肝纤维化的关键[1]。细胞毒素(cytotoxin,CTX)是眼镜蛇毒的主要活性成分,生物活性多样,对多种细胞均具有细胞毒性[2],在抗肿瘤研究中具有广阔的应用前景[3]。; 王秀男陶慧娟陈荣芳班建东农君廖明张学荣; 关键词：肝纤维化眼镜蛇毒分离纯化

广西眼镜蛇毒神经生长因子分离纯化方法被引量：1: 2016年; 为了得到更高纯度和活性的广西眼镜蛇毒神经生长因子(never growth factor,NGF),我们对原有的分离纯化方法进行改进。采用DEAE CL-6B离子交换柱、Sephadex G-50凝胶层析柱、Macro-prep High S离子交换柱结合的方法进行分离。在分离纯化过程中,采用PC12细胞检验每一步所得结果中的NGF活性,并测定NGF诱导PC12细胞分化的最小浓度。经DEAE CL-6B离子交换柱、Sephadex G-50凝胶层析柱、Macro-prep High S离子交换柱分离纯化后,得到的第二峰具有NGF活性,并且已达到电泳纯。经PC12细胞验证后,确定NGF诱导PC12细胞分化的最小浓度为0.1μg/m L。; 侯瑞雪张学荣张可星廖明孙林蔡凤桃班建东农君陈缨; 关键词：PC12细胞 SDS-PAGE电泳

广西眼镜蛇蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化及其对HSC-T6细胞的作用被引量：4: 2015年; 目的对广西眼镜蛇毒中磷脂酶A2（PLA2）进行分离纯化,测定其对肝星状细胞HSC-T6的增殖抑制作用。方法采用Sephadex G-50凝胶层析柱、CM-Sepharose CL-6B离子交换柱、Macro-prep High S预装柱结合的方法分离广西眼镜蛇粗毒,经平板法测定各峰的PLA2活性;经SDS-PAGE电泳鉴定终产物纯度并测定分子量,NanoLC-ESI-MS/MS鉴定其组分;CCK-8法测定PLA2对肝星状细胞（HSC-T6）的增殖抑制作用,确定其凋亡的最小毒性浓度。结果 Sephadex G-50凝胶层析柱、CM-Sepharose CL-6B离子交换柱、Macro-prep High S预装柱层析法,得到第Ⅲ峰具PLA2活性,且达到电泳纯,经NanoLCESI-MS/MS鉴定其为PLA2,分子量约为14.06kD;PLA2在0~1μg/ml的浓度下对HSC-T6细胞具有一定的促增殖作用,2μg/ml时细胞数达到最大值,4~16μg/ml时对细胞生长有抑制作用,且随浓度增大细胞数降低。结论采用Sephadex G-50、CM-Sepharose CL-6B、Macro-prep High S预装柱结合的方法对广西眼镜蛇毒进行分离纯化,得到电泳纯且具PLA2活性的磷脂酶A2;广西眼镜蛇毒PLA2对肝星状细胞HSC-T6增殖有抑制作用,PLA2对HSC-T6细胞的最小毒性浓度为2μg/ml。; 付道莹张学荣付娆张可星侯瑞雪班建东农君陈缨; 关键词：磷脂酶A2 分离纯化 CCK-8

眼镜蛇毒NGF通过PI3K/Akt促人肝星状细胞凋亡的机制研究被引量：5: 2018年; 目的探讨眼镜蛇毒神经生长因子NGF对肝纤维化关键细胞LX2的作用及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度NGF和LY294002对LX2细胞增殖的影响,流式法检测NGF对LX2细胞凋亡的影响,Western blot法研究NGF和LY294002单用与联用对p-Akt蛋白水平表达的影响。结果NGF可降低LX2细胞存活率,最小有效浓度为1 mg·L^(-1);增加LX2细胞凋亡率;降低p-Akt表达水平,而对Akt的表达水平无明显影响。结论 NGF可通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活,促进LX2细胞凋亡,并有一定的浓度依赖性。本研究对阐明肝纤维化的发病机制,为临床上治疗肝纤维化均有重要意义。; 蔡凤桃张学荣孙林王秀男廖明班建东陈缨农君; 关键词：人肝星状细胞眼镜蛇毒凋亡 PI3K/AKT