廖明 作品数:56 被引量:129 H指数:7 供职机构: 广西医科大学蛇毒研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
Genistein对大鼠肝星状细胞的增殖及TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响 被引量:12 2010年 目的:观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及TGF-β1、MMP-2及TIMP-2基因表达的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制.方法:将体外培养的大鼠HSC-T6分别给予不同浓度的Genistein作用24h后,用噻唑兰比色法(MTT)检测测定活细胞数,采用半定量RT-PCR法检测细胞中TGF-β1、MMP-2及TIMP-2的 mRNA水平.结果:Genistein作用于大鼠HSC-T6后,活细胞数目减少,12.5、25及50mg/L3个作用浓度组与对照组的A值比较有显著性差异(0.306±0.0067,0.256±0.0085,0.1316±0.0049vs0.4468±0.0299,均P<0.05).不同浓度的Genistein干预HSC-T6,MMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显增强(均P<0.05);TGF-β1和TIMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显降低(均P<0.05).结论:Genistein可能通过增强大鼠HSCMMP-2 mRNA的表达,同时抑制TGF-β与TIMP-2 mRNA的表达发挥抗纤维化的作用. 廖明 李彦 舒伟关键词:肝星状细胞 三羟基异黄酮对肝纤维化大鼠血清和肝组织中TGF-β_1表达的影响 被引量:2 2010年 目的观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,在实验的第10周末采血和取肝组织,检测血清中ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原,HE染色法观察肝组织改变,免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1表达。结果血清学检测显示Genistein能明显降低肝纤维化大鼠ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原水平,病理组织学观察发现Genistein能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化,免疫组织化学检测表明肝组织TGF-β1表达量与模型组比较显著降低。结论 Genistein对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有较好的保护作用,对TGF-β1表达的影响可能是其作用机制之一。 廖明关键词:三羟基异黄酮 肝纤维化 TGF-Β1 利用亲和层析法检测乙酰化蛋白的研究 2012年 目的建立一种快速、相对定量检测乙酰化蛋白方法,并初步应用其检测药物作用后Jurkat细胞乙酰化总蛋白水平。方法用不同浓度的曲古菌素A(TSA)诱导Jurkat细胞蛋白高乙酰化后,利用抗乙酰化赖氨酸抗体亲和层析柱富集纯化乙酰化总蛋白,经酸洗脱后固定于酶标板,ELISA法检测乙酰化蛋白相对总量,并用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱仪(MALDI—TOF/TOF)分析验证其成分;同法检测不同浓度的没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A三种药物作用Jurkat细胞后乙酰化总蛋白水平的变化,筛查诱导Jurkat细胞蛋白乙酰化药物。结果1μmol/LTSA作用于4×10^5Jurkat细胞24h,乙酰化总蛋白相对水平最高。MALDI—TOF/TOF分析显示,TSA诱导Jurkat细胞产生的乙酰化蛋白共有22种,其中15种为乙酰化组蛋白。没食子酸、大黄素、单乙酰化大黄素A作用Jut-kat细胞后所导致的乙酰化程度不同,以1μmol/L浓度TSA为阳性对照组,无药物为空白对照组,35.09μmol/L和17.54μmol/L大黄素处理的Jurkat细胞乙酰化蛋白相对水平分别为4.3%和14.2%;1.47μmol/L和2.94μmol/L没食子酸处理组乙酰化蛋白相对水平分别为28.7%和11.5%;152.91μmol/L和30.58μmol/L单乙酰化大黄素组分别为22.O%和3.6%;其中1.47μmol/L没食子酸所诱导的乙酰化蛋白水平最高。结论初步建立了活细胞基础上纯化富集并检测乙酰化总蛋白水平的方法,该法可快速、简便的筛选以组蛋白去乙酰化酶为靶点的抗癌药物。 郑力 钟艳平 萧浩 周怡 罗蓉 李洪涛 李刚 廖明 何敏关键词:组蛋白类 曲古菌素A 色谱法 亲和 JURKAT 眼镜蛇毒细胞毒素-4N的纯化制备方法及其应用 本发明公开了一种眼镜蛇毒细胞毒素‑4N的纯化制备方法,先采用DEAE‑SepharoseCL‑6B阴离子交换柱然后再利用SephadexG‑50凝胶层析柱、Macro‑prep High S阳离子交换柱依次进行分离,每次... 张学荣 孙林 罗小玲 廖明 班建东 蔡凤桃 陈缨 农君 王秀南 余雷文献传递 小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析 被引量:2 2012年 克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc。报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48 h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况。构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性。成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性。 陆俊佳 袁志刚 许淑茹 廖明 赖青鸟 畅荣妮 袁广之 侯伟 舒伟关键词:TIE2 启动子 NDv-7793体外对Hep-2喉癌细胞的杀伤性研究 目的探讨NDV(Newcastle disease virus)7793毒株体外对Hep-2喉癌细胞株的杀伤效应。方法运用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetr azolium,MTT)染色法检测ND... 贺海兰 聂淑科 廖明 钟大妮 王梦婕 张幼捷 姜艳华 樊晓晖文献传递 质谱技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的作用 被引量:2 2012年 目的:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术分析联合用药抗大鼠肝纤维化的肝组织中蛋白质的表达差异。方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,试验分为正常对照组、模型组和联合用药治疗组。在试验的第10周末取大鼠肝组织,提取肝组织总蛋白质,应用SELDI-TOF-MS检测肝组织差异表达的蛋白。结果:SELDI-TOF-MS共检测到176个蛋白峰,其中表达差异2倍以上的蛋白有12个,包括在模型组中表达有降低趋势的10个蛋白质和升高趋势的2个蛋白质;经过联合用药治疗后,这些蛋白表达恢复到正常水平。对这12个差异表达蛋白进行蛋白质组数据库的检索,获得4个蛋白质,涉及负调控细胞生长、抑制细胞增殖和参与细胞信号转导。结论:联合用药能够通过调节大鼠肝脏组织蛋白质的表达,改善和修复肝脏功能。 廖明 莫财锋 周怡 何敏 卓朗关键词:联合用药 肝纤维化 SELDI-TOF-MS 以iTRAQ技术分析大鼠肝纤维化发展成肝癌过程中肝组织差异表达的蛋白质 被引量:4 2015年 目的:分析大鼠肝纤维化发展成为肝癌过程中肝组织差异表达的蛋白,以寻找其发展过程中的关键蛋白.方法:以二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)建立大鼠肝纤维化-肝癌模型,采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iT RAQ)技术结合2D-LC-MS/MS(two dimensional liquid chromatography-tandem mass spectrometry)定量蛋白质组学技术,分析和鉴定建模过程中的第4、10、12、18周肝组织蛋白质的差异表达,经生物信息学分析差异表达的蛋白质功能.结果:质谱分析共鉴定到530种蛋白质.4个时间点鉴定到的差异蛋白质数量分别为128、113、106、127个,均重复鉴定到的差异蛋白为49个,其中上调蛋白37个,下调蛋白12个.通过对这些差异蛋白进行功能分析,发现他们参与翻译后修饰、转录、重组和信号传导等过程.结论:iTRAQ结合LC-ESI-MS/MS定量蛋白质组学技术能整体、动态分析的大鼠肝纤维化演变肝癌过程中的蛋白质表达变化,其中鉴定到过氧化物还原酶1(peroxiredoxin-1,Prdx1)、过氧化物还原酶2(peroxiredoxin-2,Prdx2)、硫代硫酸硫基转移酶(thiosulfate sulfurtransferase,Tst)、真核翻译起始因子3b(eukaryotic translation initiation factor 3subunit b,e IF3b)、α2-HS-糖蛋白(alpha-2-HS-glycoprotein,Ahsg)和超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)蛋白可能是肝纤维化发展为肝癌过程中的关键蛋白,值得进一步深入探讨研究. 付娆 张学荣 廖明 付道莹关键词:差异蛋白 ITRAQ 以支撑前列腺疾病研究为特色的中国防城男性健康队列构建及应用 莫曾南 杨晓波 张海英 高勇 谭爱花 施德毅 梁振家 胡艳玲 秦雪 陆铮 吴春磊 廖明 前列腺疾病是影响男性健康的特有疾病,认为其病因涉及复杂的遗传、环境及两者的交互作用,其发病机制、分子通路及临床表现也互相交织,如水乳交融、难以厘清。该项目经过8年多的努力,建立了覆盖全基因组的基因型、男性健康及疾病相关的...关键词:关键词:前列腺疾病 系统生物学 鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、COL Ⅰ及COL Ⅲ表达的影响 被引量:7 2010年 目的:研究鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)表达的影响.方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,实验分为:牛磺酸组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、三羟基异黄酮组、鸡尾酒组、秋水仙碱组、模型组和正常组.在实验的第10周末取肝组织,HE染色法观察肝组织改变,免疫组织化学法检测肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达.结果:病理组织学观察发现各组能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化,免疫组织化学检测表明鸡尾酒组、三羟基异黄酮组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、牛磺酸组的肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达量与模型组比较均显著降低(TGF-β1:2.57±0.23,4.21±0.35,4.93±0.21,4.81±0.16vs12.11±0.62,P<0.05;COLⅠ:2.69±0.10,4.88±0.42,5.04±0.31,4.79±0.29vs13.06±0.24,P<0.05;COLⅢ:3.17±0.42,5.73±0.23,5.51±0.25,5.24±0.18vs15.15±0.43,P<0.05),并且鸡尾酒组与单一用药各组相比有统计学意义(P<0.05).结论:鸡尾酒疗法能对肝纤维化大鼠的肝脏起保护作用,与单一用药相比更能有效降低TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达,可能具有更高的抗肝纤维化能力. 廖明 林兴 陈兆霓 李彦 卓朗关键词:鸡尾酒疗法 肝组织 肝纤维化