侯露 作品数:4 被引量:13 H指数:3 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
白血病细胞雄激素受体基因启动子甲基化状态的研究 被引量:7 2007年 目的检测白血病细胞雄激素受体基因启动子区CpG岛甲基化状态情况,初步探讨雄激素受体基因启动子区甲基化与白血病发病机制的可能联系。方法应用甲基化特异性PCR技术(methylation specific PCR,MSP)检测3种白血病细胞株及15例患者骨髓标本雄激素受体基因甲基化状态。结果白血病细胞株均出现甲基化和非甲基化带,呈部分甲基化状态,而作为对照的正常人白细胞均只出现非甲基化带。15例白血病患者全部检出甲基化状态。结论白血病细胞的雄激素受体基因启动子区存在高甲基化现象,可能为白血病的致病机制分析提供了一个新的方向,提示AR基因启动子CPG岛的甲基化有可能成为白血病的新的参考标记物。 王刚 刘利 陈杰 辛海明 张晓兵 蔡云 侯露 郭乔楠 刘泽军关键词:白血病 雄激素受体基因 DNA甲基化 甲基化特异性PCR 干扰iASPP基因对转染MCF-7细胞凋亡变化的观察 被引量:3 2008年 目的:观察iASPP基因干扰RNA转染乳腺癌细胞MCF-7后的干扰效果及细胞凋亡变化。方法:设计特异性siRNA序列,将序列克隆至PGCsilencerTM H1/Neo/GFP质粒中,用脂质体将重组子转染至MCF-7细胞中,用RT-PCR方法检测i ASPP的表达,蛋白质印迹法检测蛋白表达的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的情况。结果:iASPP干扰质粒转染MCF-7细胞后,iASPP的mRNA表达和蛋白表达减少40%~50%;p53蛋白相对表达量由转染阴性质粒的0.37增加到转染干扰质粒的0.64;细胞凋亡率由原来的17.8%和16.2%分别增加到53.5%和51.3%。结论:抑制内源性i ASPP能有效地恢复乳腺癌细胞MCF-7中p53的抑癌功能,为乳腺癌的治疗提供新的思路。 侯露 蔡云 陈杰 辛海明 高兴 卢欣 钟山 刘泽军关键词:乳腺肿瘤 肿瘤抑制 RNA干扰 细胞凋亡 人iASPP全长CDS的分段扩增、克隆及鉴定 被引量:4 2007年 目的最初报道的iASPP长度为351个氨基酸,但最近发现iASPP的全长应为828个氨基酸,为了探讨全长iASPP的功能,我们采取3分段扩增的策略克隆全长iASPP基因。方法从HL-60细胞中提取总RNA、DNA,RT-PCR分段扩增目的基因,克隆至pMD19-Tsimple载体,测序,并亚克隆至pCDNA3.1载体。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-iASPP经测序,与GenBank上登陆的人iASPP cDNA(gi:60457962)序列完全一致。结论成功构建了iASPP真核表达载体。 陈杰 辛海明 蔡云 侯露 王刚 刘利 卢欣 钟山 刘泽军关键词:IASPP 克隆 P53 雄激素受体在白血病细胞中的表达异常与基因甲基化的关系 2007年 性激素受体是类固醇受体之一,通过信号传递途径调控细胞的增殖分化,随着DNA甲基化与肿瘤关系的深入研究,发现性激素受体超家族在许多肿瘤中存在DNA异常甲基化现象,但在白血病中的研究尚少。我们前期的研究发现了性激素受体之一的孕酮受体在白血病细胞中的异常甲基化现象,我们进一步对性激素受体中的雄激素受体(AR)进行了研究,用去甲基化试剂5’-AzaDC对白血病细胞株进行处理,分别用RT—PCR和免疫组化的方法检测雄激素受体基因在处理前后在mRNA和蛋白质水平表达的差异,同时用甲基特异性PCR(MSP)技术分析处理前后的AR甲基化状态的改变,探讨AR基因的表达与其甲基化状态的可能联系,为临床治疗白血病用药提供实验依据。 王刚 陈杰 刘利 侯露 蔡云 张晓兵 郭乔楠 刘泽军关键词:雄激素受体基因 白血病细胞株 基因甲基化 性激素受体 异常甲基化 甲基化状态